(11)	017377 (13) B1	Разделы: A B C D E F G H
(21)	200970782
(22)	2008.02.20
(51)	C12N 15/62 (2006.01) C07K 14/505 (2006.01) A61K 38/18 (2006.01)
(31)	07003659.5; 60/894,948
(32)	2007.02.22; 2007.03.15
(33)	EP; US
(43)	2010.08.30
(86)	PCT/EP2008/001311
(87)	WO 2008/101680 2008.08.28
(71)	(73) ПОЛИМУН САЙНТИФИК ИММУНБИОЛОГИШЕ ФОРШУНГ ГМБХ (AT)
(72)	Вайк Роберт, Хеметсбергер Томас, Редль Хайнц (AT)
(74)	Медведев В.Н. (RU)
(54)	СЛИТЫЙ БЕЛОК ЭРИТРОПОЭТИНА

(57) 1. Рекомбинантный слитый белок ЕРО, имеющий увеличенный физиологический период полувыведения и пониженную гематопоэтическую активность по сравнению с ЕРО in vivo и дополнительно имеющий нейрорегенеративную активность in vivo, отличающийся тем, что он содержит Fc-фрагмент молекулы человеческого IgG и фрагмент эритропоэтина (ЕРО), предпочтительно фрагмент человеческого эритропоэтина, в котором Fc-фрагмент непосредственно соединен через его N-конец с С-концом фрагмента ЕРО, и где слитый белок модифицирован посредством карбамоилирования.

2. Слитый белок по п.1, в котором по крайней мере один, предпочтительно два или более остатков лизина и/или N-концевая аминокислота указанного слитого белка являются карбамоилированными.

3. Слитый белок по п.1 или 2, в котором Fc-фрагмент содержит шарнирную область, домен СН2 и домен CH3, полученные из человеческого IgG.

4. Слитый белок по любому из пп.1-3, в котором слияние осуществляется в шарнирной области.

5. Слитый белок по любому из пп.1-4, в котором два мономера слитого белка EPO-Fc соединены друг с другом и образуют гомодимер.

6. Способ получения карбамоилированного рекомбинантного слитого белка EPO-Fc, содержащего Fc-фрагмент молекулы человеческого IgG и ЕРО-фрагмент, предпочтительно фрагмент человеческого эритропоэтина, в котором Fc-фрагмент непосредственно соединен через его N-конец с С-концом фрагмента ЕРО, где способ включает:

получение молекулы ДНК, кодирующей слитый белок EPO-Fc;

трансформирование клетки-хозяина указанной молекулой ДНК;

экспрессию указанного слитого белка EPO-Fc, кодируемого упомянутой молекулой ДНК;

получение из культуры указанного слитого белка EPO-Fc;

очистку указанного слитого белка EPO-Fc и

карбамоилирование указанного слитого белка EPO-Fc посредством взаимодействия цианата с указанным слитым белком EPO-Fc,

где по крайней мере один, предпочтительно два или более остатков лизина и/или N-концевая аминокислота слитого белка являются карбамоилированными.

7. Слитый белок по любому из пп.1-5 для применения в качестве лекарственного средства.

8. Применение слитого белка по любому из пп.1-5 для получения фармацевтической композиции для лечения заболевания центральной нервной системы (ЦНС) и/или периферической нервной системы.

9. Применение по п.8, в котором заболевание выбирают из группы, состоящей из инсульта, ишемического явления в ЦНС, отличного от инсульта, закрытой травмы, травмы спинного мозга, травматического повреждения мозга и нейродегенеративного заболевания.

10. Фармацевтическая композиция, содержащая слитый белок по любому из пп.1-5, вместе с фармацевтически приемлемым носителем, предпочтительно для парентерального введения.

11. Фармацевтическая композиция по п.10, применяемая в виде раствора для инъекций.