(21)	201491728 (13) A1	Разделы: A B C D E F G H
(22)	2013.03.20
(51)	C12N 15/10 (2006.01) C12N 15/113 (2010.01)
(31)	61/613,373; 61/625,420
(32)	2012.03.20; 2012.04.17
(33)	US
(86)	PCT/US2013/033106
(87)	WO 2013/142578 2013.09.26
(71)	ВИЛНИУС ЮНИВЕРСИТИ (LT)
(72)	Сиксныс Виргиниюс, Гасиунас Гиэрдриус, Карвелис Таутвыдас, Лубыс Арвыдас, Залиаускиэне Лолита, Глемзаите Моника (LT), Смит Аня (US)
(74)	Захарова Н.С. (RU)
(54)	НАПРАВЛЯЕМОЕ РНК РАСЩЕПЛЕНИЕ ДНК С ПОМОЩЬЮ КОМПЛЕКСА Cas9-crРНК

(57) Выделение или сборка in vitro комплекса Cas9-crРНК системы CRISPR3/Cas Streptococcus thermophilus и использование для расщепления ДНК, несущей нуклеотидную последовательность, комплементарную к crРНК и смежному с протоспейсером мотиву. Способы сайт-специфической модификации молекулы ДНК-мишени in vitro или in vivo с использованием РНК-направляемой ДНК-эндонуклеазы, содержащей последовательности РНК и по меньшей мере один из мотивов активного сайта RuvC и мотивов активного сайта HNH; для преобразования полипептида Cas9 в никазу, расщепляющую одну нить двухцепочечной ДНК путем инактивации одного из активных сайтов (RuvC или HNH) в полипептиде с помощью по меньшей мере одной точечной мутации; для сборки активного комплекса полипептидов-полирибонуклеотидов in vivo или in vitro и для репрограммирования специфичности комплекса Cas9-crРНК in vitro и с использованием кассеты, содержащей единственную единицу повтор-спейсер-повтор.