(11) | 015584 (13) B1 |
    Разделы: A B C D E F G H  |
(21) | 200702053 |
(22) | 2006.03.23 |
(51) | C07K 16/28 (2006.01)
C07K 14/705 (2006.01)
A61K 39/395 (2006.01)
G01N 33/50 (2006.01)
C12N 5/10 (2006.01)
A61P 35/00 (2006.01)
A61P 37/00 (2006.01) |
(31) | PA 2005 00429; US 60/667,579; US 60/696,163; US 60/728,561 |
(32) | 2005.03.23; 2005.04.01; 2005.07.01; 2005.10.20 |
(33) | DK; US; US; US |
(43) | 2008.02.28 |
(86) | PCT/DK2006/000166 |
(87) | WO 2006/099875 2006.09.28 |
(71) | (73) ГЕНМАБ А/С (DK) |
(72) | Верс Мишель де, Граус Иво, Опринс Юдит, Паррен Пауль Паррен, Винкел Ян ван де, Вюгт Мартин ван (NL) |
(74) | Соболев А.Ю. (RU) |
(54) | АНТИТЕЛО К CD38 ЧЕЛОВЕКА И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ |
(57) 1. Антитело, связывающееся с CD38 человека, или его фрагмент, содержащее:
(а) вариабельные участки легкой и тяжелой цепи антитела человека, кодируемые нуклеотидными последовательностями SEQ ID NO:1 и SEQ ID NO:6 соответственно; или
(б) вариабельные участки легкой и тяжелой цепи антитела человека, кодируемые нуклеотидными последовательностями SEQ ID NO:11 и SEQ ID NO:16 соответственно; или
(в) вариабельные участки легкой и тяжелой цепи антитела человека, кодируемые нуклеотидными последовательностями SEQ ID NO:21 и SEQ ID NO:26 соответственно; или
(г) вариабельные участки легкой и тяжелой цепи антитела человека, которые содержат консервативные модификации по сравнению с участками (а), (б) или (в).
2. Антитело, связывающееся с CD38 человека, включающее VH CDR3 с последовательностью SEQ ID NO:10.
3. Антитело по п.2, дополнительно включающее VL CDR3 с последовательностью SEQ ID NO:5.
4. Антитело по п.2, дополнительно включающее VL CDR1 с последовательностью SEQ ID NO:3, VL CDR2 с последовательностью SEQ ID NO:4 и VL CDR3 с последовательностью SEQ ID NO:5, а также VH CDR1 с последовательностью SEQ ID NO:8 и VH CDR2 с последовательностью SEQ ID NO:9.
5. Антитело, связывающееся с CD38 человека, включающее VL район с последовательностью SEQ ID NO:2.
6. Антитело, связывающееся с CD38 человека, включающее VL район, обладающий по меньшей мере приблизительно 90%-ной, например приблизительно 95%-ной идентичностью с последовательностью SEQ ID NO:2.
7. Антитело, связывающееся с CD38 человека, включающее VH район с последовательностью SEQ ID NO:7.
8. Антитело, связывающееся с CD38 человека, включающее участок VH CDR1-VH CDR3 в SEQ ID NO:7.
9. Антитело, связывающееся с CD38 человека, включающее VH район или его участок, обладающие по меньшей мере приблизительно 90%-ной, например приблизительно 95%-ной идентичностью с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:7 или с участком VH CDR1-VH CDR3 в SEQ ID NO:7.
10. Антитело, связывающееся с CD38 человека, включающее VH район, имеющий 1-5, например 1-3, аминокислотных замен, делеций или добавлений по сравнению с последовательностью SEQ ID NO:7 или с участком VH CDR1-VH CDR3 в SEQ ID NO:7.
11. Антитело, связывающееся с CD38 человека, включающее VL район, как определено в п.5, и VH район, как определено в п.7.
12. Антитело, связывающееся с CD38 человека, включающее VH CDR3 с последовательностью SEQ ID NO:20.
13. Антитело по п.12, дополнительно включающее VL CDR3 с последовательностью SEQ ID NO:15.
14. Антитело по п.12, дополнительно включающее VL CDR1 с последовательностью SEQ ID NO:13, VL CDR2 с последовательностью SEQ ID NO:14, VL CDR3 с последовательностью SEQ ID NO:15, VH CDR1 с последовательностью SEQ ID NO:18 и VH CDR2 с последовательностью SEQ ID NO:19.
15. Антитело, связывающееся с CD38 человека, включающее VL район с последовательностью SEQ ID NO:12.
16. Антитело, связывающееся с CD38 человека, включающее VL район, обладающий по меньшей мере приблизительно 90%-ной, например приблизительно 95%-ной идентичностью с последовательностью SEQ ID NO:12.
17. Антитело, связывающееся с CD38 человека, включающее VH район с последовательностью SEQ ID NO:17.
18. Антитело, связывающееся с CD38 человека, включающее участок VH CDR1-VH CDR3 в SEQ ID NO:17.
19. Антитело, связывающееся с CD38 человека, включающее VH район или его участок, обладающие по меньшей мере приблизительно 90%-ной, например приблизительно 95%-ной идентичностью с последовательностью SEQ ID NO:17 или с участком VH CDR1-VH CDR3 в SEQ ID NO:17.
20. Антитело, связывающееся с CD38 человека, включающее VH район, имеющий 1-5, например 1-3, аминокислотных замен, делеций или добавлений по сравнению с последовательностью SEQ ID NO:17 или с участком VH CDR1-VH CDR3 в SEQ ID NO:17.
21. Антитело, связывающееся с CD38 человека, включающее VL район, как определено в п.15, и VH район, как определено в п.17.
22. Антитело, связывающееся с CD38 человека, включающее VH CDR3 с последовательностью SEQ ID NO:30.
23. Антитело по п.22, дополнительно включающее VL CDR3 с последовательностью SEQ ID NO:25.
24. Антитело по п.22, дополнительно включающее VL CDR1 с последовательностью SEQ ID NO:23, VL CDR2 с последовательностью SEQ ID NO:24, VL CDR3 с последовательностью SEQ ID NO:25, VH CDR1 с последовательностью SEQ ID NO:28 и VH CDR2 с последовательностью SEQ ID NO:29.
25. Антитело, связывающееся с CD38 человека, включающее VL район с последовательностью SEQ ID NO:22.
26. Антитело, связывающееся с CD38 человека, включающее VL район, обладающий по меньшей мере приблизительно 90%-ной, например приблизительно 95%-ной идентичностью с последовательностью SEQ ID NO:22.
27. Антитело, связывающееся с CD38 человека, включающее VH район с последовательностью SEQ ID NO:27.
28. Антитело, связывающееся с CD38 человека, включающее участок VH CDR1-VH CDR3 в SEQ ID NO:27.
29. Антитело, связывающееся с CD38 человека, включающее VH район или его участок, обладающие по меньшей мере приблизительно 90%-ной, например приблизительно 95%-ной идентичностью с последовательностью SEQ ID NO:27 или с участком VH CDR1-VH CDR3 в SEQ ID NO:27.
30. Антитело, связывающееся с CD38 человека, включающее VH район, имеющий 1-5, например 1-3, аминокислотных замен, делеций или добавлений по сравнению с последовательностью SEQ ID NO:27 или с участком VH CDR1-VH CDR3 в SEQ ID NO:27.
31. Антитело, связывающееся с CD38 человека, включающее VL район, как определено в п.25, и VH район, как определено в п.27.
32. Антитело по любому из пп.1-31, которое связывается с CD38 человека (SEQ ID NO:31) и которое не связывается с мутантным CD38 человека, в котором остаток серина в положении 274 замещен остатком фенилаланина (SEQ ID NO:34), в той же степени, в какой оно связывается с CD38 человека (SEQ ID NO:31).
33. Антитело по п.32, ЕС50которого по отношению к мутантному CD38 человека, в котором остаток серина в положении 274 замещен остатком фенилаланина (SEQ ID NO:34), составляет менее 50%, например менее 10, менее 5 или менее 1% величины ЕС50 для CD38 человека (SEQ ID NO:31).
34. Антитело по любому из пп.1-31, которое связывается с CD38 человека (SEQ ID NO:31) и которое не связывается с мутантным CD38 человека, в котором остаток глутамина в положении 272 замещен остатком аргинина (SEQ ID NO:33), в той же степени, в какой оно связывается с CD38 человека (SEQ ID NO:31).
35. Антитело по п.34, ЕС50которого по отношению к мутантному CD38 человека, в котором остаток глутамина в положении 272 замещен остатком аргинина (SEQ ID NO:33), составляет менее 50%, например менее 10, менее 5 или менее 1% величины ЕС50 для CD38 человека (SEQ ID NO:31).
36. Антитело по любому из пп.32-35, которое связывается с мутантным CD38 человека, в котором остаток треонина в положении 237 замещен остатком аланина (SEQ ID NO:32), в той же степени, в какой оно связывается с CD38 человека (SEQ ID NO:31).
37. Антитело по любому из пп.32-35, ЕС50 которого по отношению к мутантному CD38 человека, в котором остаток треонина в положении 237 замещен остатком аланина (SEQ ID NO:32), соответствует 75-125% величины ЕС50 для CD38 человека (SEQ ID NO:31).
38. Антитело по любому из пп.33, 35 или 37, где ЕС50 определяют с помощью ELISA, как раскрыто в примере 17 описания.
39. Антитело по любому из пп.1-31, которое специфически связывается с районом SKRNIQFSCKNIYR и районом EKVQTLEAWVIHGG в CD38 человека (SEQ ID NO:31).
40. Антитело по любому из пп.1-31, связывающееся с CD38 человека, где антитело обладает одной или более из следующих характеристик связывания:
(а) действует как антагонист CD38;
(б) не индуцирует значительную пролиферацию мононуклеарных клеток периферической крови, как определяют способом, раскрытым в примере 18 описания;
(в) не индуцирует высвобождение значительного количества IL-6 моноцитами человека или мононуклеарными клетками периферической крови, как определяют способом, раскрытым в примере 19 описания;
(г) не индуцирует высвобождение детектируемого количества IFN-g Т-клетками человека или мононуклеарными клетками периферической крови человека, как определяют способом, раскрытым в примере 20 описания;
(д) интернализуется клетками, экспрессирующими CD38, например интернализуется клетками CHO-CD38 в течение 5-15 мин при 37°С, как определяют способом, раскрытым в примере 12 описания;
(е) индуцирует ADCC, например, со значением ЕС50 ниже 15 нг/мл, например ниже 10 нг/мл в клетках Daudi-luc и со значением ЕС50ниже 75 нг/мл, например ниже 50, 30 или 10 нг/мл в клетках ММ, как определяют способом, раскрытым в примере 5 описания;
(ж) индуцирует CDC в присутствии комплемента, например, со значением ЕС50 ниже 5 мкг/мл, например ниже 1 мкг/мл в клетках Daudi-luc или CHO-CD38, как определяют способом, раскрытым в примере 6 описания;
(з) ингибирует синтез цГДФР;
(и) ингибирует синтез цАДФР;
(к) связывается с CD38 человека со сродством (KD) ниже 10-8 М, например в интервале от 10-8 до 10-11 М, например в интервале от 7´10-9 до 10-10 М, как определяют с помощью поверхностного плазмонного резонанса согласно примеру 20 описания.
41. Антитело по п.40, которое ингибирует синтез цГДФР по меньшей мере на 25%, например на 30%, через 90 мин в концентрации 3 мкг/мл, как определяют с помощью спектрофотометрического способа согласно примеру 24 описания.
42. Антитело по п.40, которое ингибирует синтез цАДФР по меньшей мере на 25%, например на 30%, через 90 мин в концентрации 3 мкг/мл, как определяют с помощью ВЭЖХ.
43. Антитело по любому из пп.32-42, которое является моноклональным антителом человека.
44. Антитело по любому из пп.1-31 или 43, характеризующееся тем, что оно является полноразмерным антителом IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgD, IgA, IgE или IgM, например антителом IgG1, предпочтительно антителом IgG1,k или антителом IgM, предпочтительно антителом IgM,k.
45. Антитело по любому из пп.1-44, которое подвергается гликозилированию в эукариотической клетке.
46. Антитело по любому из пп.1-31 или 43, 44, которое является одноцепочечным антителом.
47. Антитело по любому из пп.1-46, дополнительно включающее хелатирующий линкер для присоединения радиоизотопа.
48. Антитело по любому из пп.1-47, которое находится, по существу, в изолированной форме.
49. Изолированная нуклеиновая кислота, кодирующая антитело по любому из пп.1-48.
50. Экспрессирующий вектор, включающий последовательность нуклеиновой кислоты по п.49.
51. Экспрессирующий вектор, кодирующий антитело по п.1, включающий:
(а) нуклеотидную последовательность VL SEQ ID NO:1, или
(б) нуклеотидную последовательность VH SEQ ID NO:6, или
(в) нуклеотидную последовательность VL SEQ ID NO:1 и нуклеотидную последовательность VH SEQ ID NO:6, или
(г) нуклеотидную последовательность VL SEQ ID NO:11, или
(д) нуклеотидную последовательность VH SEQ ID NO:16, или
(е) нуклеотидную последовательность VL SEQ ID NO:11 и нуклеотидную последовательность VH SEQ ID NO:16, или
(ж) нуклеотидную последовательность VL SEQ ID NO:21, или
(з) нуклеотидную последовательность VH SEQ ID NO:26, или
(и) нуклеотидную последовательность VL SEQ ID NO:21 и нуклеотидную последовательность VH SEQ ID NO:26.
52. Экспрессирующий вектор по п.50 или 51, дополнительно включающий нуклеотидную последовательность, кодирующую константный район легкой цепи, тяжелой цепи или как легкой, так и тяжелой цепей антитела человека.
53. Экспрессирующий вектор по п.52, в котором нуклеотидная последовательность, кодирующая константный район легкой цепи, тяжелой цепи или как легкой, так и тяжелой цепей антитела человека, кодирует антитело IgG1.
54. Трансфектома, которая продуцирует моноклональное анти-CD38 антитело человека по п.1.
55. Трансфектома, которая продуцирует моноклональное анти-CD38 антитело человека по п.1, имеющее вариабельные участки тяжелой и легкой цепи антитела человека, выбранные из группы, включающей:
(а) последовательность вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO:2 и последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO:7,
(б) последовательность вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO:12 и последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO:17,
(в) последовательность вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO:22 и последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO:27 и
(г) последовательности вариабельных областей легкой и тяжелой цепей, которые содержат консервативные модификации, согласно (а), (б) или (в).
56. Эукариотическая или прокариотическая клетка-хозяин, которая продуцирует антитело по любому из пп.1-48.
57. Эукариотическая или прокариотическая клетка-хозяин, содержащая экспрессирующий вектор по любому из пп.50-53.
58. Трансгенное животное, отличное от человека, включающее нуклеиновую кислоту по п.49, которое продуцирует детектируемое количество антитела по любому из пп.1-48.
59. Трансгенное растение, включающее нуклеиновую кислоту по п.49, которое продуцирует детектируемое количество антитела по любому из пп.1-48.
60. Иммуноконъюгат, включающий антитело по любому из пп.1-48, связанное с цитотоксическим агентом, радиоизотопом или лекарственным средством.
61. Иммуноконъюгат, включающий антитело по любому из пп.1-48, где антитело является мономерным антителом IgM, связанным с цитотоксическим агентом, радиоизотопом или лекарственным средством.
62. Биспецифичная или мультиспецифичная молекула, включающая антитело по любому из пп.1-48 и одновременно связывающая эффекторную клетку человека.
63. Биспецифичная или мультиспецифичная молекула, включающая антитело по любому из пп.1-48 и одновременно связывающая CD3, CD4, CD138, IL-15R, мембраносвязанный или связанный с рецептором TNF-a, человеческий Fc-рецептор или мембраносвязанный или связанный с рецептором IL-15.
64. Фармацевтическая композиция, включающая антитело по любому из пп.1-48 или иммуноконъюгат по п.60 или 61 и фармацевтически приемлемый носитель.
65. Фармацевтическая композиция по п.64, включающая один или более дополнительных терапевтических агентов.
66. Способ ингибирования роста и/или пролиферации клеток, экспрессирующих CD38, включающий введение антитела по любому из пп.1-48, иммуноконъюгата по п.60 или 61, фармацевтической композиции по п.64 или 65 или экспрессирующего вектора по любому из пп.50-53, так что рост и/или пролиферации клеток ингибируются.
67. Способ лечения заболевания или нарушения, вовлекающего экспрессирующие CD38 клетки, у субъекта, где способ включает введение антитела по любому из пп.1-48, иммуноконъюгата по п.60 или 61, фармацевтической композиции по п.64 или 65 или экспрессирующего вектора по любому из пп.50-53 субъекту, в этом нуждающемуся.
68. Способ профилактики заболевания или нарушения, вовлекающего экспрессирующие CD38 клетки, у субъекта, где способ включает введение антитела по любому из пп.1-48, иммуноконъюгата по п.60 или 61, фармацевтической композиции по п.64 или 65 или экспрессирующего вектора по любому из пп.50-53 субъекту, в этом нуждающемуся.
69. Способ по п.67 или 68, где заболевание или нарушение является ревматоидным артритом.
70. Способ по п.67 или 68, где заболевание или нарушение является множественной миеломой.
71. Способ по любому из пп.66-70, где способ включает введение одного или более дополнительных терапевтических агентов субъекту.
72. Способ по п.71, где один или более дополнительных терапевтических агентов выбирают из химиотерапевтического агента, противовоспалительного агента или иммуносупрессивного агента и/или иммуномодуляторного агента.
73. Способ по п.71, где один или более дополнительных терапевтических агентов выбирают из группы, состоящей из цисплатина, гефитиниба, цетуксимаба, ритуксимаба, бевацизумаба, эрлотиниба, бортезомиба, талидомида, памидроната, золедроновой кислоты, клодроната, ризендроната, ибадроната, этидроната, алендроната, тилудроната, триоксида мышьяка, леналидомида, филграстима, пегфилграстима, сарграмостима, субероиланилида гидроксамовой кислоты и SCIO-469.
74. Способ in vitro для детектирования присутствия CD38-антигена или клеток, экспрессирующих CD38, в образце, включающий:
(а) контактирование образца с антителом по любому из пп.1-48 в условиях, позволяющих образование комплекса между антителом и CD38, и
(б) детектирование образования комплекса.
75. Набор для детектирования присутствия CD38-антигена или клеток, экспрессирующих CD38, в образце, включающий антитело по любому из пп.1-48.
76. Способ in vivo для детектирования присутствия CD38-антигена или клеток, экспрессирующих CD38, у субъекта, включающий:
(а) введение антитела по любому из пп.1-48 в условиях, позволяющих образование комплекса между антителом и CD38,
(б) детектирование образовавшегося комплекса.
77. Антиидиотипическое антитело, связывающееся с антителом по любому из пп.1-31, 43-44 или 46.
78. Применение антиидиотипического антитела по п.77 для детектирования уровня антитела по любому из пп.1-31, 43-44 или 46 в образце.
79. Применение антиидиотипического антитела по п.77 для детектирования уровня моноклонального антитела человека против CD38 в образце.
| 
