(57) 1. Способ получения липидов, содержащих полиненасыщенные жирные кислоты, из микроорганизмов, способных продуцировать липиды в количестве по меньшей мере приблизительно 10 вес.% от их биомассы, который включает фазу увеличения плотности биомассы и фазу продуцирования липидов, включающий:
a) добавление во время фазы увеличения плотности биомассы к ферментационной среде, содержащей указанные микроорганизмы, источника углерода и по меньшей мере двух источников лимитирующих питательных веществ со скоростью, достаточной для увеличения плотности биомассы указанной ферментационной среды по меньшей мере до 50 г/л; и
b) прекращение или снижение в значительной степени подачи по меньшей мере двух из указанных источников лимитирующих питательных веществ в фазе продуцирования липидов, при поддержании подачи источника углерода, где микроорганизмы выбраны из родов Schizochytrium и Aurantiochytrium, указанные по меньшей мере два источника лимитирующих питательных веществ представляют собой источник азота и источник фосфата, и концентрация обоих указанных по меньшей мере двух источников лимитирующих питательных веществ опускается ниже 0,01 моль/л во время ферментации.
2. Способ по п.1, где концентрация указанных по меньшей мере двух источников лимитирующих питательных веществ находится ниже 0,01 моль/л в течение по меньшей мере 30% продолжительности фазы продуцирования липидов, предпочтительно в течение по меньшей мере 40, 50 или 60% продолжительности фазы продуцирования липидов, наиболее предпочтительно в течение по меньшей мере 70, 80 или 90% продолжительности фазы продуцирования липидов.
3. Способ по п.1 или 2, где концентрация обоих указанных по меньшей мере двух источников лимитирующих питательных веществ опускается ниже 0,005 моль/л, наиболее предпочтительно ниже 0,003 моль/л, в частности, до нуля и/или ниже предела обнаружения этих источников лимитирующих питательных веществ во время ферментации.
4. Способ по любому из пп.1-3, где концентрации указанных по меньшей мере двух источников лимитирующих питательных веществ опускаются ниже 0,01 моль/л, более предпочтительно ниже 0,005 моль/л, наиболее предпочтительно ниже 0,003 моль/л, в частности, до нуля и/или ниже предела обнаружения этих источников лимитирующих питательных веществ в течение 40 ч, предпочтительно в течение 30 ч, более предпочтительно в течение 20 ч после инициации фазы продуцирования липидов.
5. Способ по любому из предыдущих пунктов, где концентрации указанных по меньшей мере двух источников лимитирующих питательных веществ находятся ниже 0,01 моль/л, более предпочтительно ниже 0,005 моль/л, наиболее предпочтительно ниже 0,003 моль/л, в частности, равняются нулю и/или находятся ниже предела обнаружения этих источников лимитирующих питательных веществ по меньшей мере в течение всего промежутка, соответствующего заключительным 40%, более предпочтительно по меньшей мере в течение всего промежутка, соответствующего заключительным 50%, более предпочтительно по меньшей мере в течение всего промежутка, соответствующего заключительным 60, 70 или 80% продолжительности фазы продуцирования липидов.
6. Способ по любому из предыдущих пунктов, где концентрации указанных по меньшей мере двух источников лимитирующих питательных веществ находятся ниже 0,01 моль/л, более предпочтительно ниже 0,005 моль/л, наиболее предпочтительно ниже 0,003 моль/л, в частности, равняются нулю и/или находятся ниже предела обнаружения этих источников лимитирующих питательных веществ по меньшей мере в течение последних 20 ч ферментации, более предпочтительно по меньшей мере в течение последних 40 ч ферментации, в частности, по меньшей мере в течение последних 60 ч ферментации.
7. Способ по любому из пп.1-6, где указанный источник азота включает неорганическую соль аммония, в частности гидроксид аммония, или аммиак, или их смеси.
8. Способ по любому из пп.1-7, где источник фосфата включает фосфорную кислоту или неорганические фосфатные соли, в частности дигидрофосфат калия, или их смеси.
9. Способ по любому из пп.1-8, где в фазе продуцирования липидов количество источника(ов) азота уменьшается ниже концентрации 5,6´10^-3 моль/л и количество источника(ов) фосфата уменьшается ниже концентрации 5,4´10^-3 моль/л в течение временного промежутка не более чем 40 ч, предпочтительно не более чем 30 или 20 ч.
10. Способ по любому из пп.1-9, где в фазе продуцирования липидов количество источника(ов) азота и источника(ов) фосфата уменьшается до нуля и/или ниже предела обнаружения этих соединений в течение временного промежутка не более чем 40 ч, предпочтительно не более чем 30 ч, более предпочтительно не более чем 20 или 10 ч.
11. Способ по любому из пп.1-10, где концентрация источника(ов) азота всегда находится ниже 5,6´10^-3 моль/л, а концентрация источника(ов) фосфата всегда находится ниже 5,4´10^-3 моль/л по меньшей мере в течение заключительных 75%, предпочтительно по меньшей мере в течение заключительных 80%, более предпочтительно по меньшей мере в течение заключительных 90% продолжительности фазы продуцирования липидов.
12. Способ по любому из предыдущих пунктов, где во время фазы продуцирования липидов подачу по меньшей мере двух источников лимитирующих питательных веществ прекращают.
13. Способ по любому из пп.1-11, где во время фазы продуцирования липидов подачу по меньшей мере одного, предпочтительно всех, по меньшей мере из двух источников лимитирующих питательных веществ поддерживают.
14. Способ по любому из предыдущих пунктов, где фазу увеличения плотности биомассы проводят до тех пор, пока плотность биомассы не достигнет по меньшей мере 80 г/л, предпочтительно по меньшей мере 100 г/л, более предпочтительно по меньшей мере 120 г/л, в частности, по меньшей мере 150 г/л.
15. Способ по любому из предыдущих пунктов, где микроорганизмы способны к продуцированию липидов в количестве по меньшей мере приблизительно 20 вес.%, предпочтительно по меньшей мере приблизительно 30 вес.%, более предпочтительно по меньшей мере приблизительно 40 вес.% от их биомассы.
16. Способ по любому из предыдущих пунктов, где по меньшей мере приблизительно 15 вес.% полученных липидов являются полиненасыщенными липидами.

---