(57) 1. Способ анализа популяции семян хлебного злака с маленькими зернами на присутствие нуклеиновой кислоты, представляющей интерес, который включает стадии:
а) раскрытие эндосперма по меньшей мере одного отдельного семени указанной популяции путем, по меньшей мере, частичного удаления конца семени хлебного злака, противоположного микропилярному концу семени;
б) инкубация семени в водном растворе, содержащем один или более ферментов, вызывающих разрушение углеводов, в течение времени, достаточного для высвобождения нуклеиновых кислот из семени, в результате чего образуется раствор, содержащий нуклеиновые кислоты;
в) концентрирование, амплифицирование и/или очистка нуклеиновых кислот от вымачивающего раствора;
г) анализ указанного раствора или указанных нуклеиновых кислот для обнаружения присутствия нуклеиновой кислоты, представляющей интерес.
2. Способ по п.1, в котором указанную популяцию семян сортируют в субпопуляции семян, где указанную представляющую интерес ДНК можно обнаружить или не обнаружить.
3. Способ по п.1 или 2, в котором указанную популяцию сортируют в субпопуляции семян в соответствии с гомозиготным, гемизиготным, гетерозиготным или азиготным проявлением указанной ДНК, представляющей интерес.
4. Способ по любому из пп.1-3, в котором указанная представляющая интерес нуклеиновая кислота представляет собой ДНК.
5. Способ по любому из пп.1-3, в котором указанная представляющая интерес нуклеиновая кислота представляет собой отцовскую ДНК.
6. Способ по любому из пп.1-3, в котором указанная представляющая интерес нуклеиновая кислота представляет собой материнскую ДНК.
7. Способ по любому из пп.1-6, в котором указанный раствор для инкубации семян содержит один или несколько ферментов, вызывающих разрушение углеводов, таких как фермент, разрушающий клеточную стенку, фермент, гидролизующий сложный эфир, такой как эстераза, кутиназа, или липаза, или амилаза, и один или несколько ферментов, выбираемых из пектиназы, целлюлазы, ксиланазы, амилазы или Candida antartica липазы В.
8. Способ по любому из пп.1-7, в котором указанное время инкубации в растворе составляет от 15 мин до 4 ч.
9. Способ по любому из пп.1-7, в котором указанное время инкубации в растворе составляет от 30 мин до 2 ч.
10. Способ по любому из пп.1-9, в котором микропилярный конец семени покрыт защитным слоем.
11. Способ по п.10, в котором микропилярный конец семени содержится внутри гильзы, такой как гильза на основе силикона.
12. Способ по п.10, в котором микропилярный конец семени покрыт нетоксичным покровным материалом, включая воски, клеи, лаки или политуры.
13. Способ по п.10, в котором микропилярный конец семени покрыт древесным клеем или столярным клеем, предпочтительно водорастворимым нетоксичным древесным клеем.
14. Способ по п.10, в котором микропилярный конец семени покрыт водным полиуретаном, таким как дисперсия алифатического полиуретана на основе поликарбоната и простого полиэфира, таким как импранил.
15. Способ по любому из пп.10-14, в котором незакрытый конец семени обрабатывают абразивом, таким как песок или стеклянные шарики, до тех пор, пока эндосперм не будет раскрыт.
16. Способ по любому из пп.1-15, в котором микропилярный конец семени обрабатывают наждачной бумагой или напильником до тех пор, пока эндосперм не будет раскрыт.
17. Способ по любому из пп.1-15, в котором микропилярный конец семени механически удаляют, например, ножом или ножницами для ногтей.
18. Способ по любому из пп.1-15, в котором эндосперм раскрывают потоком струи воды.
19. Способ по любому из пп.1-18, в котором семя хлебного злака представляет собой семя пшеницы, а конец семени, противоположный микропилярному концу семени, представляет собой конец, имеющий хохолок или бородку.
20. Способ выделения нуклеиновых кислот из семени хлебного злака с маленькими зернами, включающий стадии:
а) раскрытие эндосперма семени;
б) инкубация семени в водном растворе в течение времени, достаточного для высвобождения нуклеиновых кислот из семени, в результате чего образуется раствор, содержащий нуклеиновые кислоты, где указанный раствор для инкубации семян содержит один или более разлагающих углеводы ферментов.
21. Способ по п.20, в котором указанный раствор для инкубации семян содержит фермент, разрушающий стенку клетки, фермент, гидролизующий сложный эфир, такой как эстераза, кутиназа, или липаза, или амилаза, и один или более ферментов, выбираемых из пектиназы, целлюлазы, ксиланазы, амилазы или Candida antartica липазы В.
22. Способ по п.20, в котором раскрытие эндосперма осуществляют потоком струи воды.

---