(57) 1. Способ определения антикоагулянтов в образце крови или плазме крови, в котором антикоагулянты, определяемые с его помощью, являются ингибиторами прямого действия активированных факторов IIa и Xa свертывания крови, выбранными из следующей группы: дабигатран, апиксабан, ривароксабан, гирудин, или же они принадлежат к группе, включающей ингибиторы непрямого действия активированных факторов IIa и Ха свертывания крови, выбранные из следующей подгруппы: фракционированные гепарины, нефракционированные гепарины, проводимый с использованием по меньшей мере двух процедур мокрой химии для определения протромбинового времени по Оврену, включающий стадии:
(а) на первой стадии определения протромбинового времени с помощью первой процедуры измеряют протромбиновое время в первой реакционной смеси, полученной разбавлением первого объема крови или плазмы крови первым объемом жидкого реагента, содержащего тромбопластин, фибриноген и фактор V свертывания крови,
(б) на второй стадии определения протромбинового времени с помощью второй процедуры измеряют протромбиновое время во второй реакционной смеси, полученной разбавлением второго объема упомянутой крови или плазмы крови вторым объемом упомянутого жидкого реагента, содержащего тромбопластин, фибриноген и фактор V свертывания крови, при этом концентрация крови или плазмы крови во второй реакционной смеси отличается от концентрации крови или плазмы крови в первой реакционной смеси,
характеризующийся тем, что
упомянутые по меньшей мере две процедуры определения протромбинового времени калибруют для обеспечения идентичных или приблизительно идентичных результатов определения протромбинового времени
путем использования для анализа эталонной крови или плазмы крови, не содержащей антикоагулянтов, представляющих интерес с точки зрения анализа,
при этом дополнительно осуществляют
стадию (в), на которой вычисляют разницу в значениях протромбинового времени, полученных на стадиях (а) и (б), при этом если разница в значениях протромбинового времени
(1) значительна, то это считают указанием на присутствие в образце крови или плазме крови антикоагулянтов, а если она
(2) незначительна, то это считают указанием на отсутствие в образце крови или плазме крови антикоагулянтов в концентрациях выше порога чувствительности, при этом разница считается значительной при значении относительной разницы, превышающей коэффициент вариации в два или более раз, и разница считается незначительной, если она меньше удвоенного коэффициента вариации.
2. Способ по п.1, в котором, если полученная на стадии (в) разница в значениях протромбинового времени значительна и вид антикоагулянта известен, то концентрация антикоагулянта в данном образце крови или плазме крови может быть рассчитана, при этом когда выполняют две процедуры определения протромбинового времени, упомянутая концентрация может быть рассчитана с использованием разницы результатов протромбинового времени и результатов протромбинового времени из анализа с самым высоким разведением образца, или когда выполняют больше двух процедур определения протромбинового времени, вычисляют больше чем одну разницу.
3. Способ по п.1, в котором, если полученная на стадии (в) разница в значениях протромбинового времени незначительна и вид антикоагулянта известен, то концентрацию антикоагулянта в данном образце крови или плазме крови назначают.
4. Способ по любому из пп.1 или 2, в котором, если полученная на стадии (в) разница в значениях протромбинового времени значительна, то вычисляют оценочное значение протромбинового времени для образца крови или плазмы крови, в котором отсутствуют антикоагулянты.
5. Способ по любому из пп.1-4, в котором процедуры для определения протромбинового времени выполняют при температуре помещения в диапазоне от 17 до 45°С, предпочтительно в диапазоне от 18 до 30°С, более предпочтительно в диапазоне от 21 до 30°С, наиболее предпочтительно в диапазоне от 25 до 30°С.
6. Способ по любому из пп.1-5, в котором первый объем жидкого реагента в первой реакционной смеси равен второму объему жидкого реагента во второй реакционной смеси.
7. Способ по любому из пп.1-6, в котором объем крови или плазмы крови, разбавленной жидким реагентом, составляет от 1 до 20 мкл.
8. Способ по любому из пп.1-7, в котором кровь или плазму крови в необходимом объеме вводят в жидкий реагент с помощью капиллярной трубки типа "конец-в-конец".
9. Способ по любому из пп.1-8, в котором отношение объема крови или плазмы крови к объему жидкого реагента в составе реакционной смеси составляет от 1:2 до 1:200, от 1:5 до 1:100 или от 1:10 до 1:50.
10. Способ по любому из пп.1-9, в котором содержание крови или плазмы крови в первой реакционной смеси в количество раз приблизительно от 1,5 до 100, от 1,5 до 50, от 1,5 до 25, от 1,5 до 10 или от 1,5 до 5 выше, чем содержание крови или плазмы крови во второй реакционной смеси.
11. Способ по любому из пп.1-10, в котором конечная концентрация ионов кальция в реакционной смеси составляет величину в диапазоне от 10 до 50 мМ, в диапазоне от 10 до 30 мМ или в диапазоне от 10 до 24 мМ.
12. Способ по любому из пп.1-11, в котором осмоляльность реакционной смеси составляет приблизительно от 0,3 до 0,5 осмоль/кг или приблизительно от 0,3 до 0,4 осмоль/кг.

---