Евразийский сервер публикаций
Евразийский патент № 036081
Библиографические данные | ||||||||||||||||||||||||||||
| ||||||||||||||||||||||||||||
Формула | ||||||||||||||||||||||||||||
(57) Способ радиолигандного определения активности связывания b1-адренорецепторов Т-лимфоцитов человека, для осуществления которого проводят
а) забор у объекта крови из периферической вены; б) выделение Т-лимфоцитов общепринятым способом; в) постановку четырех параллельных анализов, при этом в первом из них к среде, содержащей Т-лимфоциты, добавляют воду, во втором в избытке добавляют "холодный" цианопиндолол, в третьем добавляют b1-АР лиганд CGP 20712, в четвертом добавляют b2-АР лиганд ICI 118551; г) инкубацию в течение 25-30 мин при 37°С и скорости движения шейкера 100 об/мин; д) добавление ко всем четырем предварительно инкубированным реакционным смесям по 100 мкл [125I]цианопиндолола; е) остановку реакции добавлением холодной воды; ж) центрифугирование реакционной массы при 2000 g в течение 10-12 мин с отбрасыванием супернатанта; з) суспендирование осадка в холодном (+4°С) буфере PBS с последующим центрифугированием в тех же условиях с отбрасыванием супернатанта; и) суспендирование осадка в холодном (+4°С) буфере PBS с последующим центрифугированием при 10000-12000 g в течение 2-3 мин с отбрасыванием супернатанта; к) просчитывание осадка на g-счетчике для измерения количества радиоактивного материала в каждой пробе и л) вычисление активности связывания b1-адренорецепторов по разности общего связывания и бета-специфического связывания цианопиндолола, отнесенного на 1 млн клеток. Загрузка данных...
| ||||||||||||||||||||||||||||