(11)	032192 (13) B1	Разделы: A B C D E F G H
(21)	201500132
(22)	2013.07.11
(51)	C07K 16/22 (2006.01) C07K 16/46 (2006.01) C07K 16/28 (2006.01)
(31)	12176299.1
(32)	2012.07.13
(33)	EP
(43)	2015.08.31
(86)	PCT/EP2013/064672
(87)	WO 2014/009465 2014.01.16
(71)	(73) РОШЕ ГЛИКАРТ АГ (CH)
(72)	Дюрр Харальд, Хертинг Франк (DE), Клайн Кристиан (CH), Регула Йёрг Томас, Рют Маттиас, Штубенраух Кай-Гуннар (DE)
(74)	Веселицкая И.А., Кузенкова Н.В., Веселицкий М.Б., Каксис Р.А., Белоусов Ю.В., Куликов А.В., Кузнецова Е.В., Соколов Р.А., Кузнецова Т.В. (RU)
(54)	БИСПЕЦИФИЧЕСКОЕ АНТИТЕЛО К VEGF/ANG-2, НУКЛЕИНОВАЯ КИСЛОТА, КОДИРУЮЩАЯ ЭТО АНТИТЕЛО, ВЕКТОР, СОДЕРЖАЩИЙ НУКЛЕИНОВУЮ КИСЛОТУ, КЛЕТКА-ХОЗЯИН, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИСПЕЦИФИЧЕСКОГО АНТИТЕЛА И СОДЕРЖАЩАЯ ЕГО ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ

(57) 1. Биспецифическое антитело, содержащее первый антигенсвязывающий центр, который специфически связывается с человеческим VEGF, и второй антигенсвязывающий центр, который специфически связывается с человеческим ANG-2, в котором:

I) указанный первый антигенсвязывающий центр, специфически связывающийся с VEGF, содержит в вариабельном домене тяжелой цепи CDR3H-участок, имеющий SEQ ID NO: I, CDR2H-участок, имеющий SEQ ID NO: 2, и CDR1H-участок, имеющий SEQ ID NO: 3, и в вариабельном домене легкой цепи CDR3L-участок, имеющий SEQ ID NO: 4, CDR2L-участок, имеющий SEQ ID NO: 5, и CDR1L-участок, имеющий SEQ ID NO: 6; и

II) указанный второй антигенсвязывающий центр, специфически связывающийся с ANG-2, содержит в вариабельном домене тяжелой цепи CDR3H-участок, имеющий SEQ ID NO: 9, CDR2H-участок, имеющий SEQ ID NO: 10, и CDR1H-участок, имеющий SEQ ID NO: 11, и в вариабельном домене легкой цепи CDR3L-участок, имеющий SEQ ID NO: 12, CDR2L-участок, имеющий SEQ ID NO: 13, и CDR1L-участок, имеющий SEQ ID NO: 14, и в котором

III) биспецифическое антитело содержит константную область тяжелой цепи человеческого подкласса IgG1 (происходящую из человеческого антитела) и содержащую мутации I253A, H310A и H435A (нумерация согласно EU-индексу Кэбота).

2. Биспецифическое антитело по п.1, в котором:

I) указанный первый антигенсвязывающий центр, специфически связывающийся с VEGF, содержит в качестве вариабельного домена тяжелой цепи VH аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7 и в качестве вариабельного домена легкой цепи VL аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8 и

II) указанный второй антигенсвязывающий центр, специфически связывающийся с ANG-2, содержит в качестве вариабельного домена тяжелой цепи VH аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15 и в качестве вариабельного домена легкой цепи VL аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16.

3. Биспецифическое антитело по п.1, в котором константная область тяжелой цепи IgG1-подкласса содержит также мутации L234A, L235A и P329G (нумерация согласно EU-индексу Кэбота).

4. Биспецифическое антитело по п.1, включающее аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 27 и SEQ ID NO: 28.

5. Биспецифическое антитело по п.1, включающее аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 23 и SEQ ID NO: 24.

6. Фармацевтическая композиция, содержащая антитело по любому из пп.1-5 и фармацевтически приемлемый носитель, для лечения сосудистых заболеваний глаз.

7. Фармацевтическая композиция по п.6 для интравитреального введения.

8. Нуклеиновая кислота, кодирующая биспецифическое антитело по любому из пп.1-5.

9. Экспрессионный вектор, содержащий нуклеиновую кислоту по п.8, который обладает способностью экспрессировать указанную нуклеиновую кислоту в прокариотической или эукариотической клетке-хозяине.

10. Прокариотическая или эукариотическая клетка-хозяин, содержащая вектор по п.9.

11. Способ получения биспецифического антитела по любому из пп.1-5, включающий стадии, на которых:

а) трансформируют клетку-хозяин вектором, содержащим молекулу нуклеиновой кислоты, которая кодирует указанное антитело;

б) культивируют указанную клетку-хозяин в условиях, обеспечивающих синтез указанной молекулы антитела; и

в) выделяют указанную молекулу антитела из указанной культуры.

12. Биспецифическое антитело, полученное с помощью способа по п.11.