(11)	031729 (13) B1	Разделы: A B C D E F G H
(21)	201390146
(22)	2011.08.26
(51)	A61K 39/395 (2006.01) C12P 21/08 (2006.01)
(31)	61/377,886
(32)	2010.08.27
(33)	US
(43)	2013.12.30
(86)	PCT/US2011/049448
(87)	WO 2012/027721 2012.03.01
(71)	(73) ДЖИЛИД БАЙОЛОДЖИКС, ИНК. (US)
(72)	Макколи Скотт Алан, Вайзберг Мария (US)
(74)	Нилова М.И. (RU)
(54)	АНТИТЕЛА К МАТРИКСНОЙ МЕТАЛЛОПРОТЕИНАЗЕ 9

(57) 1. ММР9-связывающий белок, содержащий полипептид тяжелой цепи иммуноглобулина или его функциональный фрагмент и полипептид легкой цепи иммуноглобулина или его функциональный фрагмент,

причем указанный ММР9-связывающий белок связывает ММР9 специфичным образом, и

причем указанный полипептид тяжелой цепи иммуноглобулина или его функциональный фрагмент содержит участки (CDR), определяющие комплементарность, согласно SEQ ID NO: 13-15 и указанный полипептид легкой цепи иммуноглобулина или его функциональный фрагмент содержит CDR согласно SEQ ID NO: 16-18.

2. ММР9-связывающий белок по п.1, отличающийся тем, что указанный ММР9-связывающий белок связывает эпитоп ММР9 человека, содержащий аминокислотные остатки R162, Е111, D113 и I198.

3. ММР9-связывающий белок по п.1, отличающийся тем, что указанный ММР9-связывающий белок содержит полипептид вариабельной области тяжелой цепи, содержащий последовательность аминокислот, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 3 или 5-8.

4. ММР9-связывающий белок по п.3, отличающийся тем, что указанный ММР9-связывающий белок содержит полипептид вариабельной области тяжелой цепи, содержащий последовательность аминокислот согласно SEQ ID NO: 7.

5. ММР9-связывающий белок по п.1, отличающийся тем, что указанный ММР9-связывающий белок содержит полипептид вариабельной области легкой цепи, содержащий последовательность аминокислот, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 4 или 9-12.

6. ММР9-связывающий белок по п.5, отличающийся тем, что указанный ММР9-связывающий белок содержит полипептид вариабельной области легкой цепи, содержащий последовательность аминокислот согласно SEQ ID NO: 12.

7. ММР9-связывающий белок по п.1, отличающийся тем, что указанный ММР9-связывающий белок содержит полипептид тяжелой цепи, содержащий вариабельную область, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 3 или 5-8, и полипептид легкой цепи, содержащий вариабельную область, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 4 или 9-12.

8. ММР9-связывающий белок по п.7, отличающийся тем, что указанный ММР9-связывающий белок содержит полипептид вариабельной области тяжелой цепи, содержащий вариабельную область согласно SEQ ID NO: 7, и полипептид легкой цепи, содержащий вариабельную область согласно SEQ ID NO: 12.

9. ММР9-связывающий белок по п.1, отличающийся тем, что указанный полипептид тяжелой цепи представляет собой IgG.

10. ММР9-связывающий белок по п.1, отличающийся тем, что связывание указанного ММР9-связывающего белка с ММР9 ингибирует ферментативную активность ММР9.

11. ММР9-связывающий белок по п.10, отличающийся тем, что указанное ингибирование является неконкурентным.

12. ММР9-связывающий белок по п.1, отличающийся тем, что указанный ММР9-связывающий белок содержит полипептид тяжелой цепи, кодируемый полинуклеотидом, имеющим последовательность нуклеотидов, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 19-22, и полипептид легкой цепи, кодируемый полинуклеотидом, который имеет последовательность нуклеотидов, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 23-26.

13. ММР9-связывающий белок по п.12, отличающийся тем, что указанный ММР9-связывающий белок содержит полипептид тяжелой цепи, кодируемый полинуклеотидом, имеющим последовательность нуклеотидов согласно SEQ ID NO: 21, и полипептид легкой цепи, кодируемый полинуклеотидом, который имеет последовательность нуклеотидов согласно SEQ ID NO: 26.

14. ММР9-связывающий белок по п.1, отличающийся тем, что указанный ММР9-связывающий белок представляет собой гуманизированное или химерное антитело.

15. ММР9-связывающий белок, содержащий антигенсвязывающий фрагмент полипептида тяжелой цепи иммуноглобулина и антигенсвязывающий фрагмент полипептида легкой цепи иммуноглобулина,

при этом указанный ММР9-связывающий белок связывает ММР9 специфичным образом,

при этом указанный антигенсвязывающий фрагмент полипептида тяжелой цепи иммуноглобулина содержит участки (CDR), определяющие комплементарность, согласно SEQ ID NO: 13-15 и указанный антигенсвязывающий фрагмент полипептида легкой цепи иммуноглобулина содержит CDR согласно SEQ ID NO: 16-18, и

при этом указанный ММР9-связывающий белок связывает эпитоп ММР9 человека, содержащий остатки аминокислот R162, Е111, D113 и I198.

16. ММР9-связывающий белок по п.15, отличающийся тем, что полипептид вариабельной области тяжелой цепи содержит последовательность аминокислот, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 3, 5, 6, 7 и 8.

17. ММР9-связывающий белок по п.16, отличающийся тем, что полипептид вариабельной области тяжелой цепи содержит последовательность аминокислот согласно SEQ ID NO: 7.

18. ММР9-связывающий белок по п.15, отличающийся тем, что полипептид вариабельной области легкой цепи содержит последовательность аминокислот, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 4, 9, 10, 11 и 12.

19. ММР9-связывающий белок по п.18, отличающийся тем, что полипептид вариабельной области легкой цепи содержит последовательность аминокислот согласно SEQ ID NO: 12.

20. ММР9-связывающий белок по п.15, отличающийся тем, что связывание указанного ММР9-связывающего белка с ММР9 ингибирует ферментативную активность ММР9.

21. ММР9-связывающий белок по п.20, отличающийся тем, что указанное ингибирование является неконкурентным.

22. Выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая ММР9-связывающий белок согласно любому из пп.1-21, содержащая последовательность нуклеотидов, кодирующую

полипептид тяжелой цепи, содержащий участки (CDR), определяющие комплементарность, согласно SEQ ID NO: 13-15 и

полипептид легкой цепи, содержащий CDR согласно SEQ ID NO: 16-18.

23. Выделенная нуклеиновая кислота по п.22, отличающаяся тем, что вариабельная область полипептида тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1, 3 и 5-8.

24. Выделенная нуклеиновая кислота по п.23, отличающаяся тем, что указанный полипептид тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 7.

25. Выделенная нуклеиновая кислота по п.22, отличающаяся тем, что вариабельная область полипептида легкой цепи включает аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 2, 4 и 9-12.

26. Выделенная нуклеиновая кислота по п.25, отличающаяся тем, что вариабельная область полипептида легкой цепи содержит аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 12.

27. Выделенная нуклеиновая кислота по п.22, содержащая последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 19-26.

28. Выделенная нуклеиновая кислота по п.27, содержащая последовательность согласно SEQ ID NO: 21.

29. Выделенная нуклеиновая кислота по п.27, содержащая последовательность согласно SEQ ID NO: 26.

30. Выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая полипептид тяжелой цепи ММР9-связывающего белка по любому из пп.1-21 или его функциональный фрагмент, содержащая последовательность нуклеотидов, кодирующую полипептид тяжелой цепи, содержащий участки (CDR), определяющие комплементарность, согласно SEQ ID NO: 13-15.

31. Выделенная нуклеиновая кислота по п.30, отличающаяся тем, что вариабельная область полипептида тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1, 3 и 5-8.

32. Выделенная нуклеиновая кислота по п.30, отличающаяся тем, что указанный полипептид тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 7.

33. Выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая полипептид легкой цепи иммуноглобулина ММР9-связывающего белка по любому из пп.1-21 или его функциональный фрагмент, содержащая последовательность нуклеотидов, кодирующую полипептид легкой цепи, содержащий участки (CDR), определяющие комплементарность, согласно SEQ ID NO: 16-18.

34. Выделенная нуклеиновая кислота по п.33, отличающаяся тем, что вариабельная область полипептида легкой цепи содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 2, 4 и 9-12.

35. Выделенная нуклеиновая кислота по п.34, отличающаяся тем, что указанная вариабельная область полипептида легкой цепи содержит аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 12.

36. Вектор для получения ММР9-связывающего белка, содержащий выделенную нуклеиновую кислоту по любому из пп.22, 30 или 33.

37. Клетка для получения ММР9-связывающего белка, содержащая вектор по п.36.

38. Фармацевтическая композиция для лечения заболеваний и расстройств, связанных с активностью ММР9, содержащая ММР9-связывающий белок по п.1 и фармацевтически приемлемый носитель.

39. Фармацевтическая композиция для лечения заболеваний и расстройств, связанных с активностью ММР9, содержащая ММР9-связывающий белок по п.15 и фармацевтически приемлемый носитель.

40. Фармацевтическая композиция для лечения заболеваний и расстройств, связанных с активностью ММР9, содержащая вектор по п.36 и фармацевтически приемлемый носитель.

41. Фармацевтическая композиция для лечения заболеваний и расстройств, связанных с активностью ММР9, содержащая нуклеиновую кислоту по пп.22, 30 или 33 и фармацевтически приемлемый носитель.

42. Фармацевтическая композиция для лечения заболеваний и расстройств, связанных с активностью ММР9, содержащая клетку по п.37 и фармацевтически приемлемый носитель.

43. Способ ингибирования активности ММР9 у субъекта, у которого присутствует опухоль или ассоциированная с опухолью ткань, в которой обнаруживается активность ММР9, включающий введение указанному субъекту фармацевтической композиции по любому из пп.38-42 в количестве, эффективном для ингибирования активности ММР9.

44. Способ обнаружения экспрессии ММР9 в ткани пациента, включающий

осуществление контакта образца ткани указанного пациента с ММР9-связывающим белком по любому из пп.1-21 и

обнаружение комплекса (ММР9-связывающий белок/ММР9), присутствие которого указывает на экспрессию ММР9 в ткани.