(11)	024629 (13) B1	Разделы: A B C D E F G H
(21)	201270654
(22)	2010.12.08
(51)	C07K 16/28 (2006.01) A61K 39/395 (2006.01)
(31)	61/285,018
(32)	2009.12.09
(33)	US
(43)	2013.02.28
(86)	PCT/IB2010/003411
(87)	WO 2011/070443 2011.06.16
(71)	(73) ИНСТИТУТ НАСЬОНАЛЬ ДЕ ЛА САНТ ДЕ ЛА РЕШЕРШЕ МЕДИКАЛЬ (FR)
(72)	Пьерр Мишель, Вивье Эрик, Баратен Мириам (FR)
(74)	Лыу Т.Н. (RU)
(54)	МОНОКЛОНАЛЬНЫЕ АНТИТЕЛА, СВЯЗЫВАЮЩИЕ B7H6, И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ

(57) 1. Выделенное моноклональное антитело или его антигенсвязывающая часть, связывающиеся с внеклеточным доменом В7Н6 человека (аминокислотные остатки 25-266 последовательности SEQ ID NO:2), включающие определяющие комплементарность участки (CDR) тяжелой и легкой цепей или последовательности тяжелой и легкой цепей антитела, продуцируемого:

a) гибридомным клоном с маркировочным номером 4Е5.5 (депозитный № CNCM I-4242) или

b) гибридомным клоном с маркировочным номером 17В1.3 (депозитный № CNCM I-4245);

где данное моноклональное антитело ингибирует взаимодействие В7Н6 человека с NKp30 человека, подавляя клеточное узнавание целевых клеток, экспрессирующих В7Н6.

2. Антитело по п.1, которое является мышиным антителом, химерным антителом, гуманизированным антителом или антителом человека, или его антигенсвязывающая часть.

3. Антитело по п.1, представляющее собой мышиное антитело, продуцируемое:

a) гибридомным клоном с маркировочным номером 4Е5.5 (депозитный № CNCM-4242) или антигенсвязывающая часть указанного антитела; или

b) гибридомным клоном с маркировочным номером 17В1.3 (депозитный № CNCM-4245) или антигенсвязывающая часть указанного антитела.

4. Антитело по п.2, которое является гуманизированным антителом, или его антигенсвязывающая часть.

5. Антитело по любому из пп.1-4, которое является одноцепочечным антителом, или его антигенсвязывающая часть.

6. Антитело по любому из пп.1-5, которое содержит Fc-домен, обладающий активностью антителозависимой клеточной цитотоксичности (ADCC) и/или активностью комплементзависимой цитотоксичности (CDC).

7. Антитело или его антигенсвязывающая часть по п.6, в котором Fc-домен является одноцепочечным (scFc).

8. Диагностический набор для диагностики В7Н6-экспрессирующей опухоли, включающий антитело или его антигенсвязывающую часть по любому из пп.1-7 и реактивы для детекции связывания указанного антитела или его антигенсвязывающей части с внеклеточным доменом В7Н6 человека (аминокислотные остатки 25-266 последовательности SEQ ID NO: 2).

9. Конъюгат антитела по любому из пп.1-7 и цитотоксического агента.

10. Конъюгат по п.9, в котором цитотоксический агент выбран из антитубулинового агента, агента, связывающегося с малой бороздкой ДНК, вещества, алкилирующего малую бороздку ДНК, дуокармицина и пуромицина.

11. Конъюгат по п.10, в котором антитубулиновый агент выбран из доластатина, винка-алкалоида, подофиллоатосина, таксана, производного баккатина, криптофизина, майтанзиноида и комбрестатина.

12. Конъюгат по п.9, в котором антитело конъюгировано с цитотоксическим агентом посредством линкера.

13. Конъюгат по п.12, в котором линкер является расщепляемым под действием внутриклеточных условий.

14. Конъюгат по п.13, в котором расщепляемый линкер представляет собой пептидный линкер, расщепляемый под действием внутриклеточной протеазы.

15. Композиция для лечения отторжения аллотрансплантата клеток костного мозга (ВМС) у пациента, содержащая антитело или его антигенсвязывающую часть по любому из пп.1-5 и фармацевтически приемлемый носитель.

16. Композиция для лечения В7Н6-экспрессирующей опухоли у пациента, содержащая антитело или его антигенсвязывающую часть по любому из пп.6 и 7 или конъюгат по любому из пп.9-14 и фармацевтически приемлемый носитель.

17. Способ in vitro снижения активности натуральных киллеров (НК-клеток) человека по отношению к экспрессирующим В7Н6 клеткам человека, включающий контакт клеток, экспрессирующих В7Н6 человека, в присутствии человеческих НК-клеток с эффективным количеством антитела или его антигенсвязывающей части по любому из пп.1-7.

18. Способ in vitro уничтожения или подавления роста В7Н6-экспрессирующих клеток внутри клеточной популяции, содержащей такие В7Н6-экспрессирующие клетки, включающий контакт упомянутых В7Н6-экспрессирующих клеток с эффективным количеством конъюгата антитела с лекарственным средством по любому из пп.9-14.

19. Применение конъюгата антитела с лекарственным средством по любому из пп.9-14 при лечении В7Н6-экспрессирующей опухоли у пациента.

20. Применение моноклонального антитела или его антигенсвязывающей части по любому из пп.1-7 при лечении В7Н6-экспрессирующей опухоли у пациента.

21. Применение по п.19 или 20, в котором В7Н6-экспрессирующей опухолью является рак толстой кишки, печени, шейки матки, легкого, поджелудочной железы или простаты, или в котором В7Н6-экспрессирующая опухоль представляет собой прогемоцитарную лейкемию, В-клеточную лимфому, Т-клеточную лимфому, моноцитарную лимфому, эритролейкемию, лимфому Беркитта, хронический миелолейкоз или острую лимфобластную лейкемию.

22. Способ in vitro детекции экспрессии В7Н6 клеткой, включающий:

(1) обработку биологического образца, содержащего анализируемые клетки человека, антителом или его антигенсвязывающей частью по любому из пп.1-7; и

(2) детекцию связывания данного антитела или его антигенсвязывающей части, в котором связывание указанного антитела или его антигенсвязывающей части с внеклеточным доменом В7Н6 человека (аминокислотные остатки 25-266 последовательности SEQ ID NO:2) показывает присутствие В7Н6 на исследуемых клетках, для определения таким способом экспрессии клеткой В7Н6.

23. Способ in vitro по п.22, в котором исследуемый биологический образец содержит интактные клетки человека или мембранную фракцию тестируемых клеток.

24. Способ in vitro по п.22 или 23, в котором используемое антитело или его антигенсвязывающая часть помечены детектируемой меткой, выбранной из радиоизотопа, флуоресцентной метки, хемилюминесцентной метки, ферментативной метки или биолюминесцентной метки.

25. Применение антитела или его антигенсвязывающей части по любому из пп.1-7 при диагностике В7Н6-экспрессирующей опухоли у пациента, при этом используемое антитело или его антигенсвязывающая часть конъюгированы с детектируемой меткой.

26. Применение по п.25, в котором опухолью является рак толстой кишки, печени, шейки матки, легкого, поджелудочной железы или простаты.

27. Гибридомный клон с маркировочным номером 4Е5.5 (депозитный № CNCM I-4242), продуцирующий антитело по любому из пп.1-6.

28. Гибридомный клон с маркировочным номером 17В1.3 (депозитный № CNCM I-4245), продуцирующий антитело по любому из пп.1-6.