(11)	022475 (13) B1	Разделы: A B C D E F G H
(21)	201001513
(22)	2010.10.19
(51)	C12Q 1/68 (2006.01) G01H 3/00 (2006.01)
(43)	2012.04.30
(96)	2010000134 (RU) 2010.10.19
(71)	(73) ООО "ЦЕНТР ИННОВАЦИОННЫХ ТЕХНОЛОГИЙ-НАНО" (RU)
(72)	Юдаков Михаил Александрович, Волков Юрий Петрович, Мантуров Алексей Олегович (RU)
(74)	Куприянова О.И. (RU)
(54)	СПОСОБ СЕКВЕНИРОВАНИЯ ДНК

(57) 1. Способ секвенирования ДНК, включающий фрагментацию молекулы ДНК, многократное копирование фрагментов ДНК, с последующим проведением синтеза копий фрагментов ДНК посредством полимеразной цепной реакции с использованием раствора, включающего ДНК полимеразу и четыре нуклеотида, входящих в состав молекулы ДНК, расшифровку нуклеотидной последовательности ДНК, при проведении полимеразной цепной реакции отдельные копии одного фрагмента ДНК помещают в четыре раствора, каждый из которых характеризуется значительно сниженной концентрацией одного из нуклеотидов, по сравнению с остальными тремя нуклеотидами, во время проведения полимеразной цепной реакции в каждом из растворов регистрируют перемещение ДНК полимеразы по цепочке ДНК в процессе синтеза, возникающее после присоединения очередного нуклеотида с измерением промежутков времени между перемещениями ДНК полимеразы, по наличию значительно большего промежутка времени делают вывод о присоединении нуклеотида с пониженной концентрацией и определяют расположение данного нуклеотида в секвенируемой ДНК, последовательность нуклеотидов в секвенированной ДНК восстанавливают путем совмещения полученных данных о расположении нуклеотидов в каждом из четырех растворов, отличающийся тем, что регистрируют скачкообразное перемещение ДНК полимеразы по копируемой молекуле ДНК посредством измерения акустического сигнала, вызванного перемещением ДНК полимеразы.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что фрагменты отдельных копий молекулы ДНК полимеразы прикрепляют к носителям, а в качестве носителей используют диэлектрические, в частности полистироловые, или магнитные микросферы.

3. Способ по п.1, отличающийся тем, что при фрагментации получают фрагменты молекулы ДНК длиной более 5000 нуклеотидов.