| |
(11) | 021541 (13) B1 |
Разделы: A B C D E F G H |
(21) | 200901337 |
(22) | 2008.04.03 |
(51) | A01H 5/00 (2006.01) A01H 5/10 (2006.01) C12N 15/82 (2006.01) C12N 9/88 (2006.01) |
(31) | 60/910,028 |
(32) | 2007.04.04 |
(33) | US |
(43) | 2010.06.30 |
(86) | PCT/US2008/059257 |
(87) | WO 2008/124495 2008.10.16 |
(71) | (73) БАСФ ПЛАНТ САЙЕНС ГМБХ (DE) |
(72) | Мэкэлвер Джон А., Зинг Биджай (US) |
(74) | Беляева Е.Н. (BY) |
(54) | РЕКОМБИНАНТНЫЙ ИЛИ МУТАНТНЫЙ ПОЛИНУКЛЕОТИД ДЛЯ ПРИДАНИЯ РАСТЕНИЯМ ТОЛЕРАНТНОСТИ К ГЕРБИЦИДАМ, ИНГИБИРУЮЩИМ АЦЕТОГИДРОКСИКИСЛОТНУЮ СИНТАЗУ (AHAS) (ВАРИАНТЫ), РАСТЕНИЕ, НЕ ВСТРЕЧАЮЩЕЕСЯ В ПРИРОДЕ, И ЕГО СЕМЕНА, СПОСОБ БОРЬБЫ С СОРНЯКАМИ, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ТРАНСГЕННОГО РАСТЕНИЯ, ТОЛЕРАНТНОГО К СОЕДИНЕНИЯМ, ИНГИБИРУЮЩИМ AHAS, СПОСОБ ИДЕНТИФИКАЦИИ ИЛИ ОТБОРА КЛЕТКИ РАСТЕНИЯ, ТКАНИ РАСТЕНИЯ ИЛИ РАСТЕНИЯ ИЛИ ЧАСТИ РАСТЕНИЯ, СПОСОБ ПРЕДОТВРАЩЕНИЯ НЕЖЕЛАТЕЛЬНОГО ВЕГЕТАТИВНОГО РОСТА И СПОСОБ ИДЕНТИФИКАЦИИ РАСТЕНИЯ |
(57) 1. Рекомбинантный или мутантный полинуклеотид для придания растениям толерантности к гербицидам, ингибирующим ацетогидроксикислотную синтазу (AHAS), кодирующий полипептид большой субъединицы ацетогидроксикислотной синтазы (AHASL) с аминокислотными замещениями, выбранный из:
a) полипептида, имеющего валин-, треонин-, глутамин-, цистеин- или метионин-замещение в положении, соответствующем положению 122 SEQ ID NO: 1 или положению 90 SEQ ID NO: 2, и фенилаланин-, аспарагин-, треонин-, глицин-, валин-, изолейцин- или триптофан-замещение в положении, соответствующем положению 653 SEQ ID NO: 1 или положению 621 SEQ ID NO: 2;
b) полипептида, имеющего валин-, треонин-, глутамин-, цистеин- или метионин-замещение в положении, соответствующем положению 122 SEQ ID NO: 1 или положению 90 SEQ ID NO: 2, и аланин-, глутаминовую кислоту-, серин-, фенилаланин-, треонин-, аспарагиновую кислоту-, цистеин- или аспарагин-замещение в положении, соответствующем положению 199 SEQ ID NO: 1 или положению 167 SEQ ID NO: 2;
c) полипептида, имеющего валин-, треонин-, глутамин-, цистеин- или метионин-замещение в положении, соответствующем положению 122 SEQ ID NO: 1 или положению 90 SEQ ID NO: 2, и серин-, аланин-, глутаминовую кислоту-, лейцин-, глутамин-, аргинин-, валин-, триптофан-, тирозин- или изолейцин-замещение в положении, соответствующем положению 197 SEQ ID NO: 1 или положению 165 SEQ ID NO: 2;
d) полипептида, имеющего валин-, треонин-, глутамин-, цистеин- или метионин-замещение в положении, соответствующем положению 122 SEQ ID NO: 1 или положению 90 SEQ ID NO: 2, и глутаминовую кислоту-, изолейцин-, лейцин- или аспарагин-замещение в положении, соответствующем положению 124 SEQ ID NO: 1 или положению 92 SEQ ID NO: 2;
e) полипептида, имеющего валин-, треонин-, глутамин-, цистеин- или метионин-замещение в положении, соответствующем положению 122 SEQ ID NO: 1 или положению 90 SEQ ID NO: 2, и изолейцин-замещение в положении, соответствующем положению 139 SEQ ID NO: 1 или положению 107 SEQ ID NO: 2;
f) полипептида, имеющего валин-, треонин-, глутамин-, цистеин- или метионин-замещение в положении, соответствующем положению 122 SEQ ID NO: 1 или положению 90 SEQ ID NO: 2, и гистидин-замещение в положении, соответствующем положению 269 SEQ ID NO: 1 или положению 237 SEQ ID NO: 2;
g) полипептида, имеющего валин-, треонин-, глутамин-, цистеин- или метионин-замещение в положении, соответствующем положению 122 SEQ ID NO: 1 или положению 90 SEQ ID NO: 2, и метионин-замещение в положении, соответствующем положению 416 SEQ ID NO: 1 или положению 384 SEQ ID NO: 2;
h) полипептида, имеющего валин-, треонин-, глутамин-, цистеин- или метионин-замещение в положении, соответствующем положению 122 SEQ ID NO: 1 или положению 90 SEQ ID NO: 2, и изолейцин-замещение в положении, соответствующем положению 426 SEQ ID NO: 1 или положению 394 SEQ ID NO: 2;
i) полипептида, имеющего валин-, треонин-, глутамин-, цистеин- или метионин-замещение в положении, соответствующем положению 122 SEQ ID NO: 1 или положению 90 SEQ ID NO: 2, и валин-замещение в положении, соответствующем положению 430 SEQ ID NO: 1 или положению 398 SEQ ID NO: 2;
j) полипептида, имеющего валин-, треонин-, глутамин-, цистеин- или метионин-замещение в положении, соответствующем положению 122 SEQ ID NO: 1 или положению 90 SEQ ID NO: 2, и изолейцин-замещение в положении, соответствующем положению 442 SEQ ID NO: 1 или положению 410 SEQ ID NO: 2;
k) полипептида, имеющего валин-, треонин-, глутамин-, цистеин- или метионин-замещение в положении, соответствующем положению 122 SEQ ID NO: 1 или положению 90 SEQ ID NO: 2, и изолейцин- или замещение аспарагиновой кислотой в положении, соответствующем положению 445 SEQ ID NO: 1 или положению 413 SEQ ID NO: 2;
l) полипептида, имеющего валин-, треонин-, глутамин-, цистеин- или метионин-замещение в положении, соответствующем положению 122 SEQ ID NO: 1 или положению 90 SEQ ID NO: 2, и замещение глутаминовой кислотой в положении, соответствующем положению 580 SEQ ID NO: 1 или положению 548 SEQ ID NO: 2;
m) полипептида, имеющего глутаминовую кислоту-, изолейцин-, лейцин- или аспарагин-замещение в положении, соответствующем положению 124 SEQ ID NO: 1 или положению 92 SEQ ID NO: 2, и фенилаланин-, аспарагин-, треонин-, глицин-, валин-, изолейцин- или триптофан-замещение в положении, соответствующем положению 653 SEQ ID NO: 1 или положению 621 SEQ ID NO: 2;
n) полипептида, имеющего серин-, аланин-, глутаминовую кислоту-, лейцин-, глутамин-, аргинин-, валин-, триптофан-, тирозин- или изолейцин-замещение в положении, соответствующем положению 197 SEQ ID NO: 1 или положению 165 SEQ ID NO: 2, и фенилаланин-, аспарагин-, треонин-, глицин-, валин- или триптофан-замещение в положении, соответствующем положению 653 SEQ ID NO: 1 или положению 621 SEQ ID NO: 2;
о) полипептида, имеющего серин-, аланин-, глутаминовую кислоту-, лейцин-, глутамин-, аргинин-, валин-, триптофан-, тирозин- или изолейцин-замещение в положении, соответствующем положению 197 SEQ ID NO: 1 или положению 165 SEQ ID NO: 2, и аспарагин-замещение в положении, соответствующем положению 375 SEQ ID NO: 1 или положению 343 SEQ ID NO: 2;
р) полипептида, имеющего аланин-, глутаминовую кислоту-, лейцин-, глутамин-, аргинин-, валин-, триптофан-, тирозин- или изолейцин-замещение в положении, соответствующем положению 197 SEQ ID NO: 1 или положению 165 SEQ ID NO: 2, и аланин-, глутаминовую кислоту-, серин-, фенилаланин-, треонин-, аспарагиновую кислоту-, цистеин- или аспарагин-замещение в положении, соответствующем положению 199 SEQ ID NO: 1 или положению 167 SEQ ID NO: 2;
q) полипептида, имеющего аланин-, глутаминовую кислоту-, серин-, фенилаланин-, треонин-, аспарагиновую кислоту-, цистеин- или аспарагин-замещение в положении, соответствующем положению 199 SEQ ID NO: 1 или положению 167 SEQ ID NO: 2, и фенилаланин-, аспарагин-, треонин-, глицин-, валин-, изолейцин- или триптофан-замещение в положении, соответствующем положению 653 SEQ ID NO: 1 или положению 621 SEQ ID NO: 2;
r) полипептида, имеющего валин-, цистеин-, аспарагиновую кислоту-, глутаминовую кислоту-, аргинин-, треонин-, триптофан- или тирозин-замещение в положении, соответствующем положению 205 SEQ ID NO: 1 или положению 173 SEQ ID NO: 2, и фенилаланин-, аспарагин-, треонин-, глицин-, валин-, изолейцин- или триптофан-замещение в положении, соответствующем положению 653 SEQ ID NO: 1 или положению 621 SEQ ID NO: 2;
s) полипептида, имеющего любое аминокислотное замещение в положении, соответствующем положению 574 SEQ ID NO: 1 или положению 542 SEQ ID NO: 2, и фенилаланин-, аспарагин-, треонин-, глицин-, валин-, изолейцин- или триптофан-замещение в положении, соответствующем положению 653 SEQ ID NO: 1 или положению 621 SEQ ID NO: 2; и
t) полипептида, имеющего серин-, аланин-, глутаминовую кислоту-, лейцин-, глутамин-, аргинин-, валин-, триптофан-, тирозин- или изолейцин-замещение в положении, соответствующем положению 197 SEQ ID NO: 1 или положению 165 SEQ ID NO: 2, и аланин-, глутаминовую кислоту-, серин-, фенилаланин-, треонин-, аспарагиновую кислоту-, цистеин- или аспарагин-замещение в положении, соответствующем положению 199 SEQ ID NO: 1 или положению 167 SEQ ID NO: 2,
причем указанный полинуклеотид представляет собой полинуклеотид растения, которое выбрано из членов семейства Brassica, членов семейства бобовых и членов семейства зерновых.
2. Полинуклеотид по п.1, кодирующий полипептид AHASL, выбранный из:
а) полипептида, имеющего валин-, треонин-, глутамин-, цистеин- или метионин-замещение в положении, соответствующем положению 122 SEQ ID NO: 1 или положению 90 SEQ ID NO: 2, и фенилаланин-, аспарагин-, треонин-, глицин-, валин-, изолейцин- или триптофан-замещение в положении, соответствующем положению 653 SEQ ID NO: 1 или положению 621 SEQ ID NO: 2;
b) полипептида, имеющего валин-, треонин-, глутамин-, цистеин- или метионин-замещение в положении, соответствующем положению 122 SEQ ID NO: 1 или положению 90 SEQ ID NO: 2, и серин-, аланин-, глутаминовую кислоту-, лейцин-, глутамин-, аргинин-, валин-, триптофан-, тирозин- или изолейцин-замещение в положении, соответствующем положению 197 SEQ ID NO: 1 или положению 165 SEQ ID NO: 2;
c) полипептида, имеющего валин-, треонин-, глутамин-, цистеин- или метионин-замещение в положении, соответствующем положению 122 SEQ ID NO: 1 или положению 90 SEQ ID NO: 2, и аланин-, глутаминовую кислоту-, серин-, фенилаланин-, треонин-, аспарагиновую кислоту-, цистеин- или аспарагин-замещение в положении, соответствующем положению 199 SEQ ID NO: 1 или положению 167 SEQ ID NO: 2;
d) полипептида, имеющего серин-, аланин-, глутаминовую кислоту-, лейцин-, глутамин-, аргинин-, валин-, триптофан-, тирозин- или изолейцин-замещение в положении, соответствующем положению 197 SEQ ID NO: 1 или положению 165 SEQ ID NO: 2, и фенилаланин-, аспарагин-, треонин-, глицин-, валин- или триптофан-замещение в положении, соответствующем положению 653 SEQ ID NO: 1 или положению 621 SEQ ID NO: 2;
e) полипептида, имеющего валин-, цистеин-, аспарагиновую кислоту-, глутаминовую кислоту-, аргинин-, треонин-, триптофан- или тирозин-замещение в положении, соответствующем положению 205 SEQ ID NO: 1 или положению 173 SEQ ID NO: 2, и фенилаланин-, аспарагин-, треонин-, глицин-, валин-, изолейцин- или триптофан-замещение в положении, соответствующем положению 653 SEQ ID NO: 1 или положению 621 SEQ ID NO: 2;
f) полипептида, имеющего любое аминокислотное замещение в положении, соответствующем положению 574 SEQ ID NO: 1 или положению 542 SEQ ID NO: 2, и фенилаланин-, аспарагин-, треонин-, глицин-, валин-, изолейцин- или триптофан-замещение в положении, соответствующем положению 653 SEQ ID NO: 1 или положению 621 SEQ ID NO: 2.
3. Полинуклеотид по п.2, кодирующий полипептид AHASL, имеющий треонин-замещение в положении, соответствующем положению 122 SEQ ID NO: 1 или положению 90 SEQ IDNO: 2, и аспарагин-замещение в положении, соответствующем положению 653 SEQ ID NO: 1 или положению 621 SEQ ID NO: 2.
4. Полинуклеотид по п.2, кодирующий полипептид AHASL, имеющий глутамин-замещение в положении, соответствующем положению 122 SEQ ID NO: 1 или положению 90 SEQ ID NO: 2, и аспарагин-замещение в положении, соответствующем положению 653 SEQ ID NO: 1 или положению 621 SEQ ID NO: 2.
5. Полинуклеотид по п.2, кодирующий полипептид AHASL, имеющий треонин-замещение в положении, соответствующем положению 122 SEQ ID NO: 1 или положению 90 SEQ ID NO: 2, и лейцин-замещение в положении, соответствующем положению 197 SEQ ID NO: 1 или положению 165 SEQ ID NO: 2.
6. Полинуклеотид по п.2, кодирующий полипептид AHASL, имеющий глутамин-замещение в положении, соответствующем положению 122 SEQ ID NO: 1 или положению 90 SEQ ID NO: 2, и лейцин-замещение в положении, соответствующем положению 197 SEQ ID NO: 1 или положению 165 SEQ ID NO: 2.
7. Полинуклеотид по п.2, кодирующий полипептид AHASL, имеющий треонин-замещение в положении, соответствующем положению 122 SEQ ID NO: 1 или положению 90 SEQ ID NO: 2, и аланин-замещение в положении, соответствующем положению 199 SEQ ID NO: 1 или положению 167 SEQ ID NO: 2.
8. Полинуклеотид по п.2, кодирующий полипептид AHASL, имеющий глутамин-замещение в положении, соответствующем положению 122 SEQ ID NO: 1 или положению 90 SEQ ID NO: 2, и аланин-замещение в положении, соответствующем положению 199 SEQ ID NO: 1 или положению 167 SEQ ID NO: 2.
9. Полинуклеотид по п.2, кодирующий полипептид AHASL, имеющий лейцин-замещение в положении, соответствующем положению 197 SEQ ID NO: 1 или положению 165 SEQ ID NO: 2, и аспарагин-замещение в положении, соответствующем положению 653 SEQ ID NO: 1 или положению 621 SEQ ID NO: 2.
10. Полинуклеотид по п.2, кодирующий полипептид AHASL, имеющий валин-замещение в положении, соответствующем положению 205 SEQ ID NO: 1 или положению 173 SEQ ID NO: 2, и аспарагин-замещение в положении, соответствующем положению 653 SEQ ID NO: 1 или положению 621 SEQ ID NO: 2.
11. Полинуклеотид по п.2, кодирующий полипептид AHASL, имеющий лейцин-замещение в положении, соответствующем положению 574 SEQ ID NO: 1 или положению 542 SEQ ID NO: 2, и аспарагин-замещение в положении, соответствующем положению 653 SEQ ID NO: 1 или положению 621 SEQ ID NO: 2.
12. Полинуклеотид по любому из пп.1-11, в котором указанное растение, выбранное из членов семейства Brassica, представляет собой Arabidosis thaliana, растение, выбранное из членов семейства бобовых, представляет собой соевый боб, и растение, выбранное из членов семейства зерновых, представляет собой кукурузу.
13. Растение, не встречающееся в природе, толерантное к гербицидам, ингибирующим AHAS, и содержащее полинуклеотид по любому из пп.1-12, являющийся трансгенным или мутантным, где растение выбрано из группы, состоящей из членов семейства Brassica, членов семейства бобовых и членов семейства зерновых.
14. Растение по п.13, где растение, выбранное из членов семейства Brassica, представляет собой Arabidosis thaliana, растение, выбранное из членов семейства бобовых, представляет собой соевый боб, и растение, выбранное из членов семейства зерновых, представляет собой кукурузу.
15. Рекомбинантный или мутантный полинуклеотид для придания растениям толерантности к гербицидам, ингибирующим ацетогидроксикислотную синтазу (AHAS), кодирующий полипептид AHASL с аминокислотными замещениями, выбранный из группы, включающей:
а) полипептид, имеющий валин-, треонин-, глутамин-, цистеин- или метионин-замещение в положении, соответствующем положению 122 SEQ ID NO: 1 или положению 90 SEQ ID NO: 2, аланин-, глутаминовую кислоту-, серин-, фенилаланин-, треонин-, аспарагиновую кислоту-, цистеин- или аспарагин-замещение в положении, соответствующем положению 199 SEQ ID NO: 1 или положению 167 SEQ ID NO: 2, и фенилаланин-, аспарагин-, треонин-, глицин-, валин-, изолейцин- или триптофан-замещение в положении, соответствующем положению 653 SEQ ID NO: 1 или положению 621 SEQ ID NO: 2;
b) полипептид, имеющий валин-, треонин-, глутамин-, цистеин- или метионин-замещение в положении, соответствующем положению 122 SEQ ID NO: 1 или положению 90 SEQ ID NO: 2, серин-, аланин-, глутаминовую кислоту-, лейцин-, глутамин-, аргинин-, валин-, триптофан-, тирозин- или изолейцин-замещение в положении, соответствующем положению 197 SEQ ID NO: 1 или положению 165 SEQ ID NO: 2, и фенилаланин-, аспарагин-, треонин-, глицин-, валин-, изолейцин- или триптофан-замещение в положении, соответствующем положению 653 SEQ ID NO: 1 или положению 621 SEQ ID NO: 2;
c) полипептид, имеющий валин-, треонин-, глутамин-, цистеин- или метионин-замещение в положении, соответствующем положению 122 SEQ ID NO: 1 или положению 90 SEQ ID NO: 2, и серин-, аланин-, глутаминовую кислоту-, лейцин-, глутамин-, аргинин-, валин-, триптофан-, тирозин- или изолейцин-замещение в положении, соответствующем положению 197 SEQ ID NO: 1 или положению 165 SEQ ID NO: 2, и аланин-, глутаминовую кислоту-, серин-, фенилаланин-, треонин-, аспарагиновую кислоту-, цистеин- или аспарагин-замещение в положении, соответствующем положению 199 SEQ ID NO: 1 или положению 167 SEQ ID NO: 2;
d) полипептид, имеющий глутаминовую кислоту-, изолейцин-, лейцин- или аспарагин-замещение в положении, соответствующем положению 124 SEQ ID NO: 1 или положению 92 SEQ ID NO: 2, серин-, аланин-, глутаминовую кислоту-, лейцин-, глутамин-, аргинин-, валин-, триптофан-, тирозин- или изолейцин-замещение в положении, соответствующем положению 197 SEQ ID NO: 1 или положению 165 SEQ ID NO: 2, и аланин-, глутаминовую кислоту-, серин-, фенилаланин-, треонин-, аспарагиновую кислоту-, цистеин- или аспарагин-замещение в положении, соответствующем положению 199 SEQ ID NO: 1 или положению 167 SEQ ID NO: 2;
e) полипептид, имеющий лейцин-замещение в положении, соответствующем положению 95 SEQ ID NO: 1 или положению 63 SEQ ID NO: 2, замещение глутаминовой кислотой в положении, соответствующем положению 416 SEQ ID NO: 1 или положению 384 SEQ ID NO: 2, и фенилаланин-, аспарагин-, треонин-, глицин-, валин-, изолейцин- или триптофан-замещение в положении, соответствующем положению 653 SEQ ID NO: 1 или положению 621 SEQ ID NO: 2; и
f) полипептид, имеющий серин-, аланин-, глутаминовую кислоту-, лейцин-, глутамин-, аргинин-, валин-, триптофан-, тирозин- или изолейцин-замещение в положении, соответствующем положению 197 SEQ ID NO: 1 или положению 165 SEQ ID NO: 2, и аланин-, глутаминовую кислоту-, серин-, фенилаланин-, треонин-, аспарагиновую кислоту-, цистеин- или аспарагин-замещение в положении, соответствующем положению 199 SEQ ID NO: 1 или положению 167 SEQ ID NO: 2, и замещение любой аминокислотой в положении, соответствующем положению 574 SEQ ID NO: 1 или положению 542 SEQ ID NO: 2,
причем указанный полинуклеотид представляет собой полинуклеотид растения, которое выбрано из группы, состоящей из членов семейства Brassica, членов семейства бобовых и членов семейства зерновых.
16. Полинуклеотид по п.15, где указанный полинуклеотид кодирует полипептид AHASL, выбранный из:
a) полипептида, имеющего валин-, треонин-, глутамин-, цистеин- или метионин-замещение в положении, соответствующем положению 122 SEQ ID NO: 1 или положению 90 SEQ ID NO: 2, аланин-, глутаминовую кислоту-, серин-, фенилаланин-, треонин-, аспарагиновую кислоту-, цистеин- или аспарагин-замещение в положении, соответствующем положению 199 SEQ ID NO: 1 или положению 167 SEQ ID NO: 2, и фенилаланин-, аспарагин-, треонин-, глицин-, валин-, изолейцин- или триптофан-замещение в положении, соответствующем положению 653 SEQ ID NO: 1 или положению 621 SEQ ID NO: 2;
b) полипептида, имеющего валин-, треонин-, глутамин-, цистеин- или метионин-замещение в положении, соответствующем положению 122 SEQ ID NO: 1 или положению 90 SEQ ID NO: 2, серин-, аланин-, глутаминовую кислоту-, лейцин-, глутамин-, аргинин-, валин-, триптофан-, тирозин- или изолейцин-замещение в положении, соответствующем положению 197 SEQ ID NO: 1 или положению 165 SEQ ID NO: 2, и фенилаланин-, аспарагин-, треонин-, глицин-, валин-, изолейцин- или триптофан-замещение в положении, соответствующем положению 653 SEQ ID NO: 1 или положению 621 SEQ ID NO: 2;
c) полипептида, имеющего валин-, треонин-, глутамин-, цистеин- или метионин-замещение в положении, соответствующем положению 122 SEQ ID NO: 1 или положению 90 SEQ ID NO: 2, и серин-, аланин-, глутаминовую кислоту-, лейцин-, глутамин-, аргинин-, валин-, триптофан-, тирозин- или изолейцин-замещение в положении, соответствующем положению 197 SEQ ID NO: 1 или положению 165 SEQ ID NO: 2, и аланин-, глутаминовую кислоту-, серин-, фенилаланин-, треонин-, аспарагиновую кислоту-, цистеин- или аспарагин-замещение в положении, соответствующем положению 199 SEQ ID NO: 1 или положению 167 SEQ ID NO: 2;
d) полипептида, имеющего серин-, аланин-, глутаминовую кислоту-, лейцин-, глутамин-, аргинин-, валин-, триптофан-, тирозин- или изолейцин-замещение в положении, соответствующем положению 197 SEQ ID NO: 1 или положению 165 SEQ ID NO: 2, и аланин-, глутаминовую кислоту-, серин-, фенилаланин-, треонин-, аспарагиновую кислоту-, цистеин- или аспарагин-замещение в положении, соответствующем положению 199 SEQ ID NO: 1 или положению 167 SEQ ID NO: 2, и замещение любой аминокислотой в положении, соответствующем положению 574 SEQ ID NO: 1 или положению 542 SEQ ID NO: 2.
17. Полинуклеотид по п.16, где указанный полинуклеотид кодирует AHASL полипептид, имеющий треонин-замещение в положении, соответствующем положению 122 SEQ ID NO: 1 или положению 90 SEQ ID NO: 2, аланин-замещение в положении, соответствующем положению 199 SEQ ID NO: 1 или положению 167 SEQ ID NO: 2, и аспарагин-замещение в положении, соответствующем положению 653 SEQ ID NO: 1 или положению 621 SEQ ID NO: 2.
18. Полинуклеотид по п.16, где указанный полинуклеотид кодирует AHASL полипептид, имеющий глутамин-замещение в положении, соответствующем положению 122 SEQ ID NO: 1 или положению 90 SEQ ID NO: 2, аланин-замещение в положении, соответствующем положению 199 SEQ ID NO: 1 или положению 167 SEQ ID NO: 2, и аспарагин-замещение в положении, соответствующем положению 653 SEQ ID NO: 1 или положению 621 SEQ ID NO: 2.
19. Полинуклеотид по п.16, где указанный полинуклеотид кодирует AHASL полипептид, имеющий треонин-замещение в положении, соответствующем положению 122 SEQ ID NO: 1 или положению 90 SEQ ID NO: 2, лейцин-замещение в положении, соответствующем положению 197 SEQ ID NO: 1 или положению 165 SEQ ID NO: 2, и аспарагин-замещение в положении, соответствующем положению 653 SEQ ID NO: 1 или положению 621 SEQ ID NO: 2.
20. Полинуклеотид по п.16, где указанный полинуклеотид кодирует AHASL полипептид, имеющий глутамин-замещение в положении, соответствующем положению 122 SEQ ID NO: 1 или положению 90 SEQ ID NO: 2, лейцин-замещение в положении, соответствующем положению 197 SEQ ID NO: 1 или положению 165 SEQ ID NO: 2, и аспарагин-замещение в положении, соответствующем положению 653 SEQ ID NO: 1 или положению 621 SEQ ID NO: 2.
21. Полинуклеотид по п.16, где указанный полинуклеотид кодирует AHASL полипептид, имеющий треонин-замещение в положении, соответствующем положению 122 SEQ ID NO: 1 или положению 90 SEQ ID NO: 2, и лейцин-замещение в положении, соответствующем положению 197 SEQ ID NO: 1 или положению 165 SEQ ID NO: 2, и аланин-замещение в положении, соответствующем положению 199 SEQ ID NO: 1 или положению 167 SEQ ID NO: 2.
22. Полинуклеотид по п.16, где указанный полинуклеотид кодирует AHASL полипептид, имеющий глутамин-замещение в положении, соответствующем положению 122 SEQ ID NO: 1 или положению 90 SEQ ID NO: 2, и лейцин-замещение в положении, соответствующем положению 197 SEQ ID NO: 1 или положению 165 SEQ ID NO: 2, и аланин-замещение в положении, соответствующем положению 199 SEQ ID NO: 1 или положению 167 SEQ ID NO: 2.
23. Полинуклеотид по п.16, где указанный полинуклеотид кодирует AHASL полипептид, имеющий лейцин-замещение в положении, соответствующем положению 197 SEQ ID NO: 1 или положению 165 SEQ ID NO: 2, и аланин-замещение в положении, соответствующем положению 199 SEQ ID NO: 1 или положению 167 SEQ ID NO: 2, и лейцин-замещение в положении, соответствующем положению 574 SEQ ID NO: 1 или положению 542 SEQ ID NO: 2.
24. Полинуклеотид по любому из пп.15-23, в котором растение, выбранное из членов семейства Brassica, представляет собой Arabidosis thaliana, растение, выбранное из членов семейства бобовых, представляет собой соевый боб, и указанное растение, выбранное из членов семейства зерновых, представляет собой кукурузу.
25. Полипептид AHASL, кодируемый полинуклеотидом по одному из пп.1-12 и 15-24.
26. Растение, не встречающееся в природе, толерантное к гербицидам, ингибирующим AHAS, и содержащее полинуклеотид по любому из пп.15-24, являющийся трансгенным или мутантным, где указанное растение выбрано из группы, состоящей из членов семейства Brassica, членов семейства бобовых и членов семейства зерновых.
27. Растение по п.26, где указанное растение, выбранное из членов семейства Brassica, представляет собой Arabidosis thaliana, растение, выбранное из членов семейства бобовых, представляет собой соевый боб, и растение, выбранное из членов семейства зерновых, представляет собой кукурузу.
28. Семена, полученные от растения по любому из пп.13, 14, 26 и 27, где семена содержат полинуклеотид, кодирующий AHASL, по любому из пп.1-12 и 15-24.
29. Семена по п.28, где указанные семена обработаны гербицидом, ингибирующим AHAS.
30. Семена по п.29, где гербицид, ингибирующий AHAS, представляет собой один или более из следующих гербицидов: имидазолиноновый гербицид, сульфонилмочевинный гербицид, триазолпиримидиновый гербицид и пиримидинилоксибензоатный гербицид.
31. Семена по п.30, где гербицидом, ингибирующим AHAS, является имидазолиноновый гербицид.
32. Семена по п.30, где имидазолиноновый гербицид представляет собой один или более из следующих гербицидов: имазетапир, имазапик, имазамокс и имазапир.
33. Способ борьбы с сорняками в районе произрастания сельскохозяйственных культур, включающий:
i) посев в поле семян по п.28 и выращивание из них сельскохозяйственных культур;
ii) внесение эффективного количества гербицидной композиции, содержащей имидазолиноновый гербицид, сульфонилмочевинный гербицид или их смеси, под сорняки и сельскохозяйственные культуры в поле для борьбы с сорняками.
34. Способ получения трансгенного растения, толерантного к соединениям, ингибирующим AHAS, включающий следующие стадии:
i) трансформация растительных клеток экспрессионным вектором, включающим полинуклеотид по любому из пп.1-12 и 15-24; и
ii) регенерация из растительной клетки трансгенного растения, экспрессирующего AHASL мутантный полипептид.
35. Способ идентификации или отбора клетки растения, ткани растения или растения или части растения, содержащих полинуклеотид по любому из пп.1-12, 15-24, включающий:
i) получение клетки растения, ткани растения или растения или его части;
ii) приведение полученной клетки растения, ткани растения или растения или его части в контакт по меньшей мере с одним гербицидом, ингибирующим AHAS;
iii) определение того, повреждены ли клетка растения, ткань растения или растение или его часть указанным гербицидом, причем, если клетка растения, ткань растения или растение или его часть не повреждены указанным гербицидом или повреждены в меньшей степени, чем соответствующие клетки растения, ткань растения или растение или его часть дикого типа, которые приводили в контакт с гербицидом, ингибирующим AHAS, делается вывод, что клетки растения, ткани растения или растения или его часть содержат полинуклеотид по любому из пп.1-12 и 15-24.
36. Способ получения толерантного к гербициду, ингибирующему AHAS, растения, включающий скрещивание первого растения, которое толерантно к гербициду, ингибирующему AHAS, со вторым растением, которое не толерантно к гербициду, ингибирующему AHAS, отличающийся тем, что первое растение является растением по любому из пп.13, 14, 26 и 27, и отбор растения-потомка, которое устойчиво к указанному гербициду.
37. Способ предотвращения нежелательного вегетативного роста, включающий обработку семян растений по любому из пп.13, 14, 26 и 27 перед посевом и/или после предварительного проращивания гербицидом, ингибирующим AHAS.
38. Способ по любому из пп.33-37, в котором гербицид, ингибирующий AHAS, представляет собой один или более из следующих гербицидов: имидазолиноновый гербицид, сульфонилмочевинный гербицид, триазолпиримидиновый гербицид, пиримидинилоксибензоатный гербицид.
39. Способ по п.37, в котором гербицидом, ингибирующим AHAS, является имидазолиноновый гербицид.
40. Способ идентификации растения по любому из пп. 13, 14, 26 и 27, включающий:
(A) получение биологического материала из растения;
(B) проведение PCR исследования или исследования ингибирования генов большой субъединицы ацетогидроксикислотной синтазы (AHASL) в указанном биологическом материале для определения того, содержит ли биологический материал полинуклеотид по любому из пп.1-12 и 15-24; и
(C) определение на основании результатов на стадии (В), является ли растение со стадии (А) растением, содержащим полинуклеотид по любому из пп.13, 14, 26 и 27.
41. Способ по п.40, где указанный биологический материал представляет собой семена растения.
|