Бюллетень ЕАПВ "Изобретения (евразийские заявки и евразийские патенты)"Бюллетень 7´2015

Бюллетень ЕАПВ "Изобретения (евразийские заявки и евразийские патенты)"
Бюллетень 7´2015

(11)	021539 (13) B1	Разделы: A B C D E F G H
(21)	200702402
(22)	2006.04.28
(51)	*C07K 14/51* (2006.01) *C07K 16/18* (2006.01)
(31)	60/677,583; 60/776,847; 60/782,244; 60/792,645; 11/411,003
(32)	2005.05.03; 2006.02.24; 2006.03.13; 2006.04.17; 2006.04.25
(33)	US
(43)	2008.04.28
(86)	PCT/US2006/016441
(87)	WO 2006/119107 2006.11.09
(71)	(73) ЮСБ ФАРМА С.А. (BE); ЭМДЖЕН ИНК. (US)
(72)	Пашти Кристофер (US), Робинсон Мартин Ким (GB), Грэхам Кевин (US), Генри Элистер Джеймс (GB), Хоффманн Келли Сью, Лэтам Джон (US), Лоусон Эластэйр (GB), Лу Сиэн Сэнь, Поупплвелл Энди, Шэнь Вэньянь, Уинклер Дэвид, Уинтерс Аарон Джордж (US)
(74)	Медведев В.Н. (RU)
(54)	АНТИТЕЛО К СКЛЕРОСТИНУ И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ

(57) 1. Выделенное антитело или его фрагмент, которые перекрестно блокируют связывание по меньшей мере одного эталонного антитела, выбранного из группы, состоящей из раскрытых в описании антител Ab-A, Ab-B, Ab-1, Ab-4, Ab-5, Ab-6, Ab-7, Ab-8, Ab-9, Ab-10, Ab-12, Ab-19, Ab-20, Ab-23 и Ab-24 со склеростином, где антитело или его фрагмент содержат по меньшей мере одну последовательность CDR, по меньшей мере на 75% идентичную CDR, выбранной из последовательностей SEQ ID NO: 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 78, 79, 80, 81, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 239, 240, 241, 245, 246, 247, 248, 249, 250, 251, 252, 253, 254, 255, 256, 257, 258, 259, 260, 261, 262, 263, 264, 265, 269, 270, 271, 351, 352, 353, 358, 359 и 360.

2. Выделенное антитело или его фрагмент, связывание которых со склеростином перекрестно блокируется по меньшей мере одним эталонным антителом, выбранным из группы, состоящей из раскрытых в описании антител Ab-A, Ab-B, Ab-1, Ab-4, Ab-5, Ab-6, Ab-7, Ab-8, Ab-9, Ab-10, Ab-12, Ab-19, Ab-20, Ab-23 и Ab-24, где антитело или его фрагмент содержат по меньшей мере одну последовательность CDR, по меньшей мере на 75% идентичную CDR, выбранной из последовательностей SEQ ID NO: 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 78, 79, 80, 81, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 239, 240, 241, 245, 246, 247, 248, 249, 250, 251, 252, 253, 254, 255, 256, 257, 258, 259, 260, 261, 262, 263, 264, 265, 269, 270, 271, 351, 352, 353, 358, 359 и 360.

3. Антитело или его фрагмент по п.1 или 2, где способность указанного антитела или его фрагмента перекрестно блокировать или быть перекрестно блокированным выявляют в анализе Biacore или в анализе ELISA.

4. Антитело или его фрагмент по п.1 или 2, где указанное антитело или его фрагмент могут увеличивать по меньшей мере один из параметров: остеогенез, минеральную плотность костей, содержание минеральных веществ в костях, костную массу, качество костей и прочность костей у млекопитающего, и/или могут блокировать ингибирующее действие склеростина в анализе минерализации, который осуществляется на клетках.

5. Антитело или его фрагмент по п.1 или 2, содержащие:

a) последовательности CDR SEQ ID NO: 51, 52 и 53;

b) последовательности CDR SEQ ID NO: 54, 55 и 56;

c) последовательности CDR SEQ ID NO: 57, 58 и 59;

d) последовательности CDR SEQ ID NO: 60, 61 и 62;

e) последовательности CDR SEQ ID NO: 78, 79 и 80;

f) последовательности CDR SEQ ID NO: 245, 246 и 247;

g) последовательности CDR SEQ ID NO: 81, 99 и 100;

h) последовательности CDR SEQ ID NO: 248, 249 и 250;

i) последовательности CDR SEQ ID NO: 101, 102 и 103;

j) последовательности CDR SEQ ID NO: 251, 252 и 253;

k) последовательности CDR SEQ ID NO: 104, 105 и 106;

l) последовательности CDR SEQ ID NO: 254, 255 и 256;

m) последовательности CDR SEQ ID NO: 107, 108 и 109;

n) последовательности CDR SEQ ID NO: 257, 258 и 259;

о) последовательности CDR SEQ ID NO: 110, 111 и 112;

р) последовательности CDR SEQ ID NO: 260, 261 и 262;

q) последовательности CDR SEQ ID NO: 113, 114 и 115;

r) последовательности CDR SEQ ID NO: 263, 264 и 265;

s) последовательности CDR SEQ ID NO: 239, 240 и 241;

t) последовательности CDR SEQ ID NO: 269, 270 и 271;

u) последовательности CDR SEQ ID NO: 351, 352 и 353 или

v) последовательности CDR SEQ ID NO: 358, 359 и 360.

6. Антитело или его фрагмент по п.1 или 2, содержащие:

a) последовательности CDR SEQ ID NO: 54, 55 и 56 и последовательности CDR SEQ ID NO: 51, 52 и 53;

b) последовательности CDR SEQ ID NO: 60, 61 и 62 и последовательности CDR SEQ ID NO: 57, 58 и 59;

c) последовательности CDR SEQ ID NO: 78, 79 и 80 и последовательности CDR SEQ ID NO: 245, 246 и 247;

d) последовательности CDR SEQ ID NO: 81, 99 и 100 и последовательности CDR SEQ ID NO: 248, 249 и 250;

e) последовательности CDR SEQ ID NO: 101, 102 и 103 и последовательности CDR SEQ ID NO: 251, 252 и 253;

f) последовательности CDR SEQ ID NO: 104, 105 и 106 и последовательности CDR SEQ ID NO: 254, 255 и 256;

g) последовательности CDR SEQ ID NO: 107, 108 и 109 и последовательности CDR SEQ ID NO: 257, 258 и 259;

h) последовательности CDR SEQ ID NO: 110, 111 и 112 и последовательности CDR SEQ ID NO: 260, 261 и 262;

i) последовательности CDR SEQ ID NO: 113, 114 и 115 и последовательности CDR SEQ ID NO: 263, 264 и 265;

j) последовательности CDR SEQ ID NO: 239, 240 и 241 и последовательности CDR SEQ ID NO: 269, 270 и 271 или

k) последовательности CDR SEQ ID NO: 351, 352 и 353 и последовательности CDR SEQ ID NO: 358, 359 и 360.

7. Выделенное антитело или его фрагмент, которые связывают склеростин и содержат по меньшей мере одну последовательность CDR, имеющую по меньшей мере 75%-ную идентичность с CDR, выбранной из последовательностей SEQ ID NO: 245, 246, 247, 78, 79, 80, 269, 270, 271, 239, 240 и 241.

8. Выделенное антитело или его фрагмент, которые связывают склеростин и содержат по меньшей мере одну последовательность CDR, имеющую по меньшей мере 75%-ную идентичность с CDR, выбранной из CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2 и CDR-L3, где CDR-H1 имеет последовательность SEQ ID NO: 245 или SEQ ID NO: 269, CDR-H2 имеет последовательность SEQ ID NO: 246 или SEQ ID NO: 270, CDR-H3 имеет последовательность SEQ ID NO: 247 или SEQ ID NO: 271, CDR-L1 имеет последовательность SEQ ID NO: 78 или SEQ ID NO: 239, CDR-L2 имеет последовательность SEQ ID NO: 79 или SEQ ID NO: 240 и CDR-L3 имеет последовательность SEQ ID NO: 80 или SEQ ID NO: 241.

9. Антитело или его фрагмент по п.8, содержащие три CDR, CDR-H1, CDR-H2 и CDR-H3, где

(a) CDR-H1 имеет последовательность SEQ ID NO: 245, CDR-H2 имеет последовательность SEQ ID NO: 246 и CDR-H3 имеет последовательность SEQ ID NO: 247 или

(b) CDR-H1 имеет последовательность SEQ ID NO: 269, CDR-H2 имеет последовательность SEQ ID NO: 270 и CDR-H3 имеет последовательность SEQ ID NO: 271.

10. Антитело или его фрагмент по п.8, содержащие три CDR: CDR-L1, CDR-L2 и CDR-L3, где

(a) CDR-L1 имеет последовательность SEQ ID NO: 78, CDR-L2 имеет последовательность SEQ ID NO: 79 и CDR-L3 имеет последовательность SEQ ID NO: 80 или

(b) CDR-L1 имеет последовательность SEQ ID NO: 239, CDR-L2 имеет последовательность SEQ ID NO: 240 и CDR-L3 имеет последовательность SEQ ID NO: 241.

11. Антитело или его фрагмент по п.8, в которых CDR-H1 имеет последовательность SEQ ID NO: 245, CDR-H2 имеет последовательность SEQ ID NO: 246, CDR-H3 имеет последовательность SEQ ID NO: 247, CDR-L1 имеет последовательность SEQ ID NO: 78, CDR-L2 имеет последовательность SEQ ID NO: 79 и CDR-L3 имеет последовательность SEQ ID NO: 80.

12. Антитело или его фрагмент по п.8, в которых CDR-H1 имеет последовательность SEQ ID NO: 269, CDR-H2 имеет последовательность SEQ ID NO: 270, CDR-H3 имеет последовательность SEQ ID NO: 271, CDR-L1 имеет последовательность SEQ ID NO: 239, CDR-L2 имеет последовательность SEQ ID NO: 240 и CDR-L3 имеет последовательность SEQ ID NO: 241.

13. Антитело или его фрагмент по любому из пп.5-12, содержащие тяжелую цепь, включающую полипептид, имеющий по меньшей мере 85%-ную идентичность с последовательностью SEQ ID NO: 378; SEQ ID NO: 327 или SEQ ID NO: 366.

14. Антитело или его фрагмент по любому из пп.5-12, содержащие легкую цепь, включающую полипептид, имеющий по меньшей мере 85%-ную идентичность с последовательностью SEQ ID NO: 332; SEQ ID NO: 376; SEQ ID NO: 314 или SEQ ID NO: 364.

15. Антитело или его фрагмент по любому из пп.5-12, содержащие и тяжелую цепь, и легкую цепь, где

(а) тяжелая цепь содержит полипептид, имеющий по меньшей мере 85%-ную идентичность с последовательностью SEQ ID NO: 378, и легкая цепь содержит полипептид, имеющий по меньшей мере 85%-ную идентичность с последовательностью SEQ ID NO: 376; или

(b) тяжелая цепь содержит полипептид, имеющий по меньшей мере 85%-ную идентичность с последовательностью SEQ ID NO: 327, и легкая цепь содержит полипептид, имеющий по меньшей мере 85%-ную идентичность с последовательностью SEQ ID NO: 314; или

(c) тяжелая цепь содержит полипептид, имеющий по меньшей мере 85%-ную идентичность с последовательностью SEQ ID NO: 366, и легкая цепь содержит полипептид, имеющий по меньшей мере 85%-ную идентичность с последовательностью SEQ ID NO: 364.

16. Антитело или его фрагмент по любому из пп.1-15, которые содержат константную область легкой цепи и/или тяжелой цепи.

17. Антитело или его фрагмент по п.16, которые содержат константную область IgG4 или IgG2.

18. Выделенное антитело или его фрагмент, которые связывают склеростин и содержат тяжелую цепь, включающую полипептид, имеющий последовательность SEQ ID NO: 137, 145 или 392 или ее вариант, содержащий последовательности CDR, по меньшей мере на 75% идентичные последовательностям SEQ ID NO: 245, 246 и 247, и легкую цепь, включающую полипептид, имеющий последовательность SEQ ID NO: 133 или 141 или ее вариант, содержащий последовательности CDR, по меньшей мере на 75% идентичные последовательностям SEQ ID NO: 78, 79 и 80.

19. Выделенное антитело или его фрагмент, которые связывают склеростин и содержат тяжелую цепь, включающую полипептид, имеющий последовательность SEQ ID NO: 331, 335, 345 или 396 или ее вариант, содержащий последовательности CDR, по меньшей мере на 75% идентичные последовательностям SEQ ID NO: 269, 270 и 271, и легкую цепь, включающую полипептид, имеющий последовательность SEQ ID NO: 334 или SEQ ID NO: 341 или ее вариант, содержащий последовательности CDR, по меньшей мере на 75% идентичные последовательностям SEQ ID NO: 239, 240 и 241.

20. Выделенное антитело или его фрагмент, которые связывают склеростин и содержат:

(a) тяжелую цепь, включающую полипептид, имеющий последовательность SEQ ID NO: 137, и легкую цепь, содержащую полипептид, имеющий последовательность SEQ ID NO: 133;

(b) тяжелую цепь, включающую полипептид, имеющий последовательность SEQ ID NO: 145 или 392, и легкую цепь, содержащую полипептид, имеющий последовательность SEQ ID NO: 141;

(c) тяжелую цепь, включающую полипептид, имеющий последовательность SEQ ID NO: 335, и легкую цепь, содержащую полипептид, имеющий последовательность SEQ ID NO: 334;

(d) тяжелую цепь, включающую полипептид, имеющий последовательность SEQ ID NO: 331, и легкую цепь, содержащую полипептид, имеющий последовательность SEQ ID NO: 341; или

(e) тяжелую цепь, включающую полипептид, имеющий последовательность SEQ ID NO: 345 или 396, и легкую цепь, содержащую полипептид, имеющий последовательность SEQ ID NO: 341.

21. Антитело или его фрагмент по любому из пп.1-20, которые связываются со склеростином человека с аффинностью связывания (K_D), равной или меньшей чем 1´10^-7 M, равной или меньшей чем 1´10^-8 M, равной или меньшей чем 1´10^-9 M, равной или меньшей чем 1´10^-10 M, равной или меньшей чем 1´10^-¹¹ M или равной или меньшей чем 1´10^-12 M.

22. Антитело или его фрагмент по любому из пп.1-21, которые представляют собой антитело IgG.

23. Фрагмент антитела по любому из пп.1-21.

24. Фрагмент по п.23, который содержит вариабельную область легкой цепи, вариабельную область тяжелой цепи, F(ab')₂, Fab, Fab', Fv, Fc или фрагмент Fd.

25. Выделенное моноклональное антитело, содержащее последовательности CDR тяжелой цепи SEQ ID NO: 245, 246 и 247 и последовательности CDR легкой цепи SEQ ID NO: 78, 79 и 80, где антитело связывает склеростин, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, с аффинностью связывания (K_D), равной или меньшей чем 1´10^-7 M.

26. Моноклональное антитело по п.25, в котором тяжелая цепь содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378, и легкая цепь содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 376.

27. Выделенное моноклональное антитело, содержащее последовательности CDR тяжелой цепи SEQ ID NO: 269, 270 и 271 и последовательности CDR легкой цепи SEQ ID NO: 239, 240 и 241, где антитело связывает склеростин, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, с аффинностью связывания (K_D), равной или меньшей чем 1´10^-7 M.

28. Моноклональное антитело по п.29, в котором тяжелая цепь содержит последовательность SEQ ID NO: 366, и легкая цепь содержит последовательность SEQ ID NO: 364.

29. Моноклональное антитело по любому из пп.25-28, где антитело связывает склеростин, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, с аффинностью связывания (K_D), равной или меньшей чем 1´10^-8 M.

30. Выделенное антитело, содержащее тяжелые цепи, каждая из которых имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 145 или SEQ ID NO: 392, и легкие цепи, каждая из которых имеет SEQ ID NO: 141, где антитело связывает склеростин.

31. Выделенное антитело, содержащее тяжелые цепи, каждая из которых имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 345 или SEQ ID NO: 396 и легкие цепи каждая из которых имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 341, где антитело связывает склеростин.

32. Антитело или его фрагмент по любому из пп.1-31, которое является ренкомбинантным.

33. Антитело или его фрагмент по любому из пп.1-32, с которыми связана одна или несколько эффекторных или репортерных молекул.

34. Изолированный полинуклеотид, кодирующий антитело или его фрагмент по любому из пп.1-32.

35. Клонирующий или экспрессирующий вектор, содержащий один или несколько полинуклеотидов по п.34.

36. Вектор по п.35, содержащий по меньшей мере одну последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 134, 136, 138, 140, 142, 144, 146, 148, 308, 310, 312, 342, 344, 346, 348, 349, 365, 367, 377 и 379.

37. Клетка-хозяин, содержащая один или несколько клонирующих или экспрессирующих векторов по п.35 или 36.

38. Способ получения антитела или его фрагмента по любому из пп.1-32, включающий культивирование клетки-хозяина по п.37 и выделение антитела или его фрагмента.

39. Фармацевтическая композиция, содержащая антитело или его фрагмент по любому из пп.1-32 в комбинации с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми эксципиентами, разбавителями или носителями.

40. Применение антитела или его фрагмента по любому из пп.1-32 для лечения или профилактики патологического нарушения, которое опосредовано склеростином или которое связано с повышенным уровнем склеростина.

41. Применение фармацевтической композиции по п.39 для лечения или профилактики патологического нарушения, которое опосредовано склеростином или которое связано с повышенным уровнем склеростина.

42. Применение фармацевтической композиции по п.39 для приготовления лекарственного средства для увеличения остеогенеза, содержания минеральных веществ в костях, костной массы, минеральной плотности костей, качества костей или прочности костей у млекопитающего.

43. Применение фармацевтической композиции по п.39 для приготовления лекарственного средства для лечения дисплазии, остеопении, остеопороза и потери костной массы.

44. Применение фармацевтической композиции по п.39 для приготовления лекарственного средства для лечения потери костной массы у пациентов с ахондроплазией, ключично-черепным дизостозом, эхондроматозом, фиброзной дисплазией, болезнью Гоше, гипофосфатемическим рахитом, синдромом Марфана, множественными наследственными экзостозами, нейрофиброматозами, несовершенным остеогенезом, остеопетрозом, остеопойкилозом, склеротическими повреждениями, псевдоартрозом, пиогенным остеомиелитом, заболеванием периодонта, индуцированной противоэпилептическими средствами потерей костной массы, первичным и вторичным гиперпаратиреоидизмом, синдромами семейного гиперпаратиреоидизма, индуцированной невесомостью потерей костной массы, остеопорозом у мужчин, постклимактерической потерей костной массы, остеоартритом, нефрогенной остеодистрофией, инфильтративными заболеваниями костей, потерей массы костей ротовой полости, остеонекрозом челюсти, ювенильной формой болезни Педжета, мелореостозом, метаболическими заболеваниями костей, мастоцитозом, серповидноклеточной анемией, потерей костной массы, связанной с трансплантацией органа, потерей костной массы, связанной с трансплантацией почки, системной красной волчанкой, анкилозирующим спондилитом, эпилепсией, поражениями кожи у детей ревматического происхождения, талассемией, мукополисахаридозами, болезнью Фабри, синдромом Тернера, синдромом Дауна, синдромом Кляйнфелтера, проказой, болезнью Пертеса, подростковым идиопатическим сколиозом, многосистемным воспалительным заболеванием у детей, синдромом Винчестера, болезнью Менкеса, болезнью Вильсона, ишемическим заболеванием костей, болезнью Легга-Кальве-Пертеса, регионарным мигрирующим остеопорозом, анемическими состояниями, состояниями, вызванными стероидами, индуцированной глюкокортикоидами потерей массы костей, индуцированной гепарином потерей массы костей, заболеваниями костного мозга, цингой, недостаточным питанием, дефицитом кальция, остеопорозом, остеопенией, алкоголизмом, хроническим заболеванием печени, постклимактерическим состоянием, хроническими воспалительными состояниями, ревматоидным артритом, воспалительным заболеванием кишечника, язвенным колитом, воспалительным колитом, болезнью Крона, олигоменореей, аменореей, беременностью, сахарным диабетом, гипертиреоидизмом, расстройствами щитовидной железы, расстройствами паратиреоидной железы, болезнью Кушинга, акромегалией, гипогонадизмом, лишением подвижности или бездействием, синдромом симпатической рефлекторной дистрофии, регионарным остеопорозом, остеомаляцией, потерей костной массы, связанной с заменой сустава, связанной с ВИЧ потерей костной массы, потерей костной массы, связанной со снижением уровня гормона роста, потерей костной массы, связанной с кистозным фиброзом, связанной с химиотерапией потерей костной массы, индуцированной опухолью потерей костной массы, связанной со злокачественной опухолью потерей костной массы, потерей костной массы при гормональном разрушении, множественной миеломой, индуцированной лекарственными средствами потерей костной массы, нервной анорексией, связанной с заболеванием потерей массы костей лицевой части черепа, связанной с заболеванием потерей массы костей мозговой части черепа, связанной с заболеванием потерей костной массы челюсти, связанной с заболеванием потерей костной массы черепа, потерей костной массы, связанной со старением, потерей массы костей лицевой части черепа, связанной со старением, потерей массы костей мозговой части черепа, связанной со старением, потерей костной массы челюсти, связанной со старением, потерей массы костей черепа, связанной со старением, и потерей костной массы, связанной с полетом в космос.

45. Применение фармацевтической композиции по п.39 для приготовления лекарственного средства для улучшения исхода лечения млекопитающего, подвергаемого стоматологической процедуре, проводимой на зубах, имплантационной хирургии, замене сустава, костной пластики, косметической хирургии на костях и восстановлению костей, например, при срастании переломов, заживлении несросшихся переломов, заживлении при медленном срастании или при реконструкции лица.

46. Диагностический набор, содержащий антитело или его фрагмент по любому из пп.1-32.

наверх