| |
(21) | 201391238 (13) A1 |
Разделы: A B C D E F G H |
(22) | 2012.04.12 |
(51) | C12P 21/00 (2006.01) C07K 14/195 (2006.01) C07K 14/34 (2006.01) A61K 39/02 (2006.01) |
(31) | 61/474,815; 1106225.4 |
(32) | 2011.04.13 |
(33) | US; GB |
(86) | PCT/EP2012/056728 |
(87) | WO 2012/140171 2012.10.18 |
(71) | ГЛАКСОСМИТКЛАЙН БАЙОЛОДЖИКАЛС С.А. (BE) |
(72) | Деоттай Филипп Марк Элен, Гоффен Филипп (BE) |
(74) | Поликарпов А.В. (RU) |
(54) | СПОСОБ ФЕРМЕНТАЦИИ |
(57) В настоящем изобретении предлагается способ периплазматического экспрессирования бактериального анатоксина, включающий стадии: а) выращивания культуры грамотрицательной клетки-хозяина в ферментационной среде, где клетку-хозяина трансформируют полинуклеотидом, который кодирует бактериальный анатоксин и периплазматическую сигнальную последовательность; или обеспечение грамотрицательной клетки-хозяина, где клетку-хозяина трансформируют полинуклеотидом, который кодирует бактериальный анатоксин и периплазматическую сигнальную последовательность, и где грамотрицательная клетка-хозяин содержит бактериальный анатоксин, экспрессированный в периплазму; а1) индуцирования экспрессии бактериального анатоксина; б) созревания клетки-хозяина, где стадия созревания включает: 1) подвергание клетки-хозяина рН-шоку; 2) инкубирование клетки-хозяина без добавления питания; и/или 3) подвергание клетки-хозяина воздействию температуры ниже -20°С; и в) экстрагирования бактериального анатоксина из клетки-хозяина, где процесс экстрагирования включает осмотический шок.
|