(11)	017086 (13) B1	Разделы: A B C D E F G H
(21)	200870020
(22)	2006.12.08
(51)	C07K 16/28 (2006.01) G01N 33/53 (2006.01) A61P 35/00 (2006.01)
(31)	60/748,914; 60/824,593
(32)	2005.12.08; 2006.09.05
(33)	US
(43)	2009.12.30
(86)	PCT/US2006/061816
(87)	WO 2007/067991 2007.06.14
(71)	(73) МЕДАРЕКС, ИНК. (US)
(72)	Корман Алан Дж., Селби Марк Дж., Лу Ли-Шэн, Витте Элисон, Хуан Хайчунь (US)
(74)	Медведев В.Н. (RU)
(54)	ЧЕЛОВЕЧЕСКИЕ МОНОКЛОНАЛЬНЫЕ АНТИТЕЛА ПРОТИВ О8Е И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ

(57) 1. Выделенное человеческое моноклональное антитело или его антигенсвязывающая часть, содержащее вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере примерно на 90% гомологична аминокислотной последовательности, кодируемой геном V_H4-34 человека, геном V_H3-53 человека или геном V_H3-9, и вариабельную область легкой цепи, которая содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере примерно на 90% гомологична аминокислотной последовательности, кодируемой геном V_KA27 или геном V_KL6 человека, где указанное антитело или его антигенсвязывающая часть:

(a) специфически связывается с человеческим O8E с K_D=1´10^{-7 M} или менее;

(b) индуцирует лизис O8E⁺ опухолевых клеток карциномы молочной железы SKBR3 и O8E-трансфицированных клеток SKOV3 посредством антитело-зависимой клеточной цитотоксичности (ADCC);

(c) интернализуется O8E⁺ опухолевыми клетками карциномы молочной железы SKBR3.

2. Антитело или его антигенсвязывающая часть по п.1, которые представляют собой полноразмерное антитело изотипа IgG1 или IgG4 или его антигенсвязывающую часть.

3. Антитело или его антигенсвязывающая часть по п.1, которые представляют собой фрагменты Fab, Fab' или Fab'₂ или одноцепочечное антитело.

4. Антитело или его антигенсвязывающая часть по п.1, где указанное антитело или его антигенсвязывающая часть связываются с человеческим O8E с K_D=5,5´10^{-9 M} или менее.

5. Антитело или его антигенсвязывающая часть по п.1, где указанное антитело или его антигенсвязывающая часть связываются с человеческим O8E с K_D=3´10^{-9 M} или менее.

6. Антитело или его антигенсвязывающая часть по п.1, где указанное антитело или его антигенсвязывающая часть связываются с человеческим O8E с K_D=2´10^{-9 M} или менее.

7. Антитело или его антигенсвязывающая часть по п.1, где указанное антитело или его антигенсвязывающая часть не содержит фукозильных остатков.

8. Антитело или его антигенсвязывающая часть по п.1, содержащие:

(a) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 11;

(b) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16;

(c) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 21;

(d) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 26;

(e) CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 31;

(f) CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 36.

9. Антитело или его антигенсвязывающая часть по п.1, содержащие:

(a) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12;

(b) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17;

(c) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 22;

(d) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 27;

(e) CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 32; и

(f) CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 37.

10. Антитело или его антигенсвязывающая часть по п.1, содержащие:

(a) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13;

(b) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18;

(c) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 23;

(d) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 28;

(e) CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 33; и

(f) CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 38.

11. Антитело или его антигенсвязывающая часть по п.1, содержащие:

(a) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14;

(b) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 19;

(c) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 24;

(d) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 29;

(e) CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 34; и

(f) CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 39.

12. Антитело или его антигенсвязывающая часть по п.1, содержащие:

(a) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15;

(b) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 20;

(c) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 25;

(d) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 30;

(e) CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 35; и

(f) CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 40.

13. Антитело или его антигенсвязывающая часть по п.1, содержащие:

(a) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере примерно на 95% гомологична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 1; и

(b) вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере примерно на 95% гомологична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 6.

14. Антитело или его антигенсвязывающая часть по п.1, содержащие:

(a) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере примерно на 95% гомологична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 2; и

(b) вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере примерно на 95% гомологична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 7.

15. Антитело или его антигенсвязывающая часть по п.1, содержащие:

(a) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере примерно на 95% гомологична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 3; и

(b) вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере примерно на 95% гомологична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 8.

16. Антитело или его антигенсвязывающая часть по п.1, содержащие:

(a) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере примерно на 95% гомологична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 4; и

(b) вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере примерно на 95% гомологична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 9.

17. Антитело или его антигенсвязывающая часть по п.1, содержащие:

(a) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере примерно на 95% гомологична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 5; и

(b) вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере примерно на 95% гомологична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 10.

18. Антитело или его антигенсвязывающая часть по п.1, содержащие вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательности CDR1, CDR2 и CDR3, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательности CDR1, CDR2 и CDR3, где:

(a) последовательность CDR3 вариабельной области тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO: 21, 22, 23, 24 и 25 и их консервативных модификаций, и

(b) последовательность CDR3 вариабельной области легкой цепи содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO: 36, 37, 38, 39 и 40 и их консервативных модификаций.

19. Антитело или его антигенсвязывающая часть по п.18, где:

(a) последовательность CDR2 вариабельной области тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO: 16, 17, 18, 19 и 20 и их консервативных модификаций, и

(b) последовательность CDR2 вариабельной области легкой цепи содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO: 31, 32, 33, 34 и 35 и их консервативных модификаций.

20. Антитело или его антигенсвязывающая часть по п.18, где:

(a) последовательность CDR1 вариабельной области тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO: 11, 12, 13, 14 и 15 и их консервативных модификаций, и

(b) последовательность CDR1 вариабельной области легкой цепи содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO: 26, 27, 28, 29 и 30 и их консервативных модификаций.

21. Композиция, содержащая антитело или его антигенсвязывающую часть по любому из пп.1-20 и фармацевтически приемлемый носитель.

22. Иммуноконъюгат, содержащий антитело или его антигенсвязывающую часть по любому из пп.1-20, связанные с терапевтическим средством.

23. Композиция, содержащая иммуноконъюгат по п.22 и фармацевтически приемлемый носитель.

24. Иммуноконъюгат по п.22, где терапевтическим средством является цитотоксин.

25. Композиция, содержащая иммуноконъюгат по п.24 и фармацевтически приемлемый носитель.

26. Иммуноконъюгат по п.22, где терапевтическим средством является радиоактивный изотоп.

27. Композиция, содержащая иммуноконъюгат по п.26 и фармацевтически приемлемый носитель.

28. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая антитело или его антигенсвязывающую часть по любому из пп.1-20.

29. Экспрессирующий вектор, содержащий молекулу нуклеиновой кислоты по п.28.

30. Клетка-хозяин, содержащая экспрессирующий вектор по п.29.

31. Способ получения анти-O8E-антитела, включающий экспрессию указанного антитела в клетке-хозяине по п.30 и выделение указанного антитела из клетки-хозяина.

32. Способ лечения или предупреждения заболевания, характеризующегося ростом опухолевых клеток, экспрессирующих O8E, где указанный способ включает введение индивидууму антитела или его антигенсвязывающей части по любому из пп.1-20 в количестве, эффективном для лечения или предупреждения указанного заболевания.

33. Способ по п.32, где указанным заболеванием является рак.

34. Способ по п.33, где указанным раковым заболеванием является карцинома молочной железы.

35. Способ по п.33, где указанным раковым заболеванием является рак яичника.

36. Способ по п.33, где указанным раковым заболеванием является рак почек.

37. Способ по п.33, где указанным раковым заболеванием является рак головы и шеи.

38. Выделенное моноклональное антитело или его антигенсвязывающая часть, которые содержат:

(a) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12;

(b) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17;

(c) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 22;

(d) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 27;

(e) CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 32; и

(f) CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 37,

где указанное антитело специфически связывается с O8E.

39. Выделенное моноклональное антитело или его антигенсвязывающая часть, которые содержат:

(a) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2;

(b) вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7,

где указанное антитело специфически связывается с O8E.