(21)	201070206 (13) A1	Разделы: A B C D E F G H
(22)	2008.07.31
(51)	C12P 19/34 (2006.01)
(31)	60/953,171
(32)	2007.07.31
(33)	US
(86)	PCT/US2008/071771
(87)	WO 2009/018449 2009.02.05
(71)	ВЕРЕНИУМ КОРПОРЕЙШН (US)
(72)	Тан Сюйцю (US)
(74)	Медведев В.Н. (RU)
(54)	СПЕЦИАЛИЗИРОВАННАЯ МНОГОСАЙТОВАЯ КОМБИНАТОРНАЯ СБОРКА

(57) Настоящее изобретение относится к новому способу получения множества модифицированных полинуклеотидов, имеющих разные комбинации различных мутаций во множественных сайтах, посредством специализированной многосайтовой комбинаторной сборки, включающему добавление по меньшей мере двух или по меньшей мере трех праймеров к двухцепочечному матричному полинуклеотиду в одной реакционной смеси, где праймеры не перекрываются, и где каждый из праймеров содержит по меньшей мере одну мутацию, отличающуюся от других праймеров, где по меньшей мере один праймер является прямым праймером, способным отжигаться с минус-цепью матрицы, и по меньшей мере один праймер является обратным праймером, способным отжигаться с плюс-цепью матрицы, и подвергание реакционной смеси реакции полимеразной достройки для получения множества достроенных модифицированных полинуклеотидов по меньшей мере из трех праймеров. Способ можно осуществлять без использования этапа лигирования перед трансформацией клетки достроенными модифицированными полинуклеотидами. Множество достроенных модифицированных полинуклеотидов перед трансформацией клетки можно обрабатывать ферментом для разрушения матричного полинуклеотида.