(11) | 013565 (13) B1 |
    Разделы: A B C D E F G H  |
(21) | 200700460 |
(22) | 2005.08.18 |
(51) | A61K 38/17 (2006.01)
C07K 14/495 (2006.01)
A61P 25/00 (2006.01) |
(31) | 60/602,825; 60/694,067 |
(32) | 2004.08.19; 2005.06.24 |
(33) | US |
(43) | 2007.10.26 |
(86) | PCT/US2005/029637 |
(87) | WO 2006/023781 2006.03.02 |
(71) | (73) БАЙОДЖЕН АЙДЕК МА ИНК. (US) |
(72) | Россомандо Энтони, Сильвиан Лаура, Пепински Р. Блэйк (US) |
(74) | Медведев В.Н. (RU) |
(54) | ВАРИАНТЫ ПОЛИПЕПТИДОВ НЕЙБЛАСТИНА, СПОСОБЫ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ |
(57) 1. Вариант полипептида нейбластина, содержащий аминокислотную последовательность, по крайней мере на 80% идентичную аминокислотам 15-113 последовательности SEQ ID NO:1, где аминокислотная последовательность содержит замещенную аминокислоту, отличную от аргинина в положении 48 и в положении 49 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:1; причем указанный вариант полипептида после димеризации связывается с комплексом, содержащим GFRa3 и RET, и где указанный вариант полипептида обладает значительно меньшей способностью связывать гепарин по сравнению с полипептидом нейбластина дикого типа с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:1.
2. Вариант полипептида по п.1, где остаток аргинина в положении 48 и остаток аргинина в положении 49 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:1 замещены неконсервативными аминокислотными остатками.
3. Вариант полипептида по п.1, где остаток аргинина в положении 48 и остаток аргинина в положении 49 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:1 замещены глутаминовой кислотой.
4. Вариант полипептида по любому из пп.1-3, содержащий аминокислотную последовательность, которая по крайней мере на 90% идентична аминокислотам 15-113 последовательности SEQ ID NO:1.
5. Вариант полипептида по любому из пп.1-3, содержащий аминокислотную последовательность, которая по крайней мере на 95% идентична аминокислотам 15-113 последовательности SEQ ID NO:1.
6. Вариант полипептида по любому из пп.1-3, содержащий аминокислотную последовательность, которая по крайней мере на 98% идентична аминокислотам 15-113 последовательности SEQ ID NO:1.
7. Вариант полипептида нейбластина, содержащий аминокислоты 15-113 последовательности SEQ ID NO:5.
8. Вариант полипептида нейбластина, содержащий аминокислоты 10-113 последовательности SEQ ID NO:5.
9. Вариант полипептида нейбластина, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:5.
10. Вариант полипептида нейбластина, состоящий из аминокислот 15-113 последовательности SEQ ID NO:5.
11. Вариант полипептида нейбластина, состоящий из аминокислот 10-113 последовательности SEQ ID NO:5.
12. Вариант полипептида нейбластина, состоящий из аминокислотной последовательности SEQ ID NO:5 или SEQ ID NO:7.
13. Димер, содержащий два любых варианта полипептида нейбластина по любому из пп.1-12.
14. Конъюгат, содержащий вариант полипептида нейбластина по любому из пп.1-12, который связан с неприродным полимером.
15. Конъюгат по п.14, в котором неприродный полимер представляет собой полиалкиленгликоль.
16. Конъюгат по п.15, в котором полиалкиленгликоль представляет собой полиэтиленгликоль.
17. Конъюгат по любому из пп.14-16, в котором неприродный полимер связан с вариантом полипептида нейбластина на его аминоконце.
18. Конъюгат по любому из пп.14-16, в котором неприродный полимер связан с вариантом полипептида нейбластина по внутреннему сайту для конъюгирования полимера.
19. Слитый белок, содержащий вариант полипептида нейбластина по любому из пп.1-12 и гетерологичную аминокислотную последовательность.
20. Фармацевтическая композиция, содержащая вариант полипептида нейбластина по любому из пп.1-12, димер по п.13, конъюгат по любому из пп.14-18 или слитый белок по п.19, а также фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент.
21. Нуклеиновая кислота, содержащая последовательность, кодирующую вариант полипептида нейбластина по любому из пп.1-12.
22. Экспрессирующий вектор, содержащий нуклеиновую кислоту по п.21.
23. Клетка, содержащая экспрессирующий вектор по п.22.
24. Способ получения варианта полипептида нейбластина, включающий
получение клетки по п.23 и
культивирование клетки в условиях, способствующих экспрессии нуклеиновой кислоты, кодирующей вариант полипептида нейбластина.
25. Способ лечения или предотвращения заболевания или нарушения нервной системы у млекопитающего, включающий введение млекопитающему терапевтически эффективного количества варианта полипептида нейбластина по любому из пп.1-12, димера по п.13, конъюгата по любому из пп.14-18 или слитого белка по п.19.
26. Способ лечения нейропатической боли у млекопитающего, включающий введение млекопитающему терапевтически эффективного количества варианта полипептида нейбластина по любому из пп.1-12, димера по п.13, конъюгата по любому из пп.14-18 или слитого белка по п.19.
27. Способ активации рецептора RET у млекопитающего, включающий введение млекопитающему эффективного количества варианта полипептида нейбластина по любому из пп.1-12, димера по п.13, конъюгата по любому из пп.14-18 или слитого белка по п.19.
28. Способ по любому из пп.25-27, в котором млекопитающее является человеком.
29. Вариант полипептида нейбластина, содержащий аминокислотную последовательность, по крайней мере на 80% идентичную аминокислотам 15-113 последовательности SEQ ID NO:1, которая содержит по крайней мере одну замещенную аминокислоту по сравнению с SEQ ID NO:1, выбранную из группы, состоящей из
аминокислоты, отличной от серина в положении 20 SEQ ID NO:1;
аминокислоты, отличной от глутамина в положении 21 SEQ ID NO:1;
аминокислоты, отличной от гистидина в положении 32 SEQ ID NO:1;
аминокислоты, отличной от аргинина в положении 33 SEQ ID NO:1;
аминокислоты, отличной от аргинина в положении 39 SEQ ID NO:1;
аминокислоты, отличной от серина в положении 46 SEQ ID NO:1;
аминокислоты, отличной от аргинина в положении 68 SEQ ID NO:1;
аминокислоты, отличной от глицина в положении 72 SEQ ID NO:1;
аминокислоты, отличной от серина в положении 73 SEQ ID NO:1; и
аминокислоты, отличной от валина в положении 94 SEQ ID NO:1,
причем указанный полипептид после димеризации связывается с комплексом, содержащим GFRa3 и RET.
30. Вариант полипептида по п.29, содержащий аминокислотную последовательность, которая по крайней мере на 90% идентична аминокислотам 15-113 последовательности SEQ ID NO:1.
31. Вариант полипептида по п.29, содержащий аминокислотную последовательность, которая по крайней мере на 95% идентична аминокислотам 15-113 последовательности SEQ ID NO:1.
32. Вариант полипептида по п.29, содержащий аминокислотную последовательность, которая по крайней мере на 98% идентична аминокислотам 15-113 последовательности SEQ ID NO:1.
33. Вариант полипептида нейбластина, содержащий аминокислотную последовательность, по крайней мере на 80% идентичную последовательности SEQ ID NO:1, которая содержит по крайней мере одну замещенную аминокислоту по сравнению с SEQ ID NO:1, выбранную из группы, состоящей из
аминокислоты, отличной от аргинина в положении 7 SEQ ID NO:1;
аминокислоты, отличной от аргинина в положении 9 SEQ ID NO:1; и
аминокислоты, отличной от аргинина в положении 14 SEQ ID NO:1,
причем указанный полипептид после димеризации связывается с комплексом, содержащим GFRa3 и RET.
34. Вариант полипептида по п.33, содержащий отличную от аргинина аминокислоту в положении 7 SEQ ID NO:1.
35. Вариант полипептида по п.34, где указанная аминокислота представляет собой неконсервативную аминокислоту.
36. Вариант полипептида по п.34, где указанная аминокислота представляет собой глутаминовую кислоту.
37. Вариант полипептида по п.33, содержащий отличную от аргинина аминокислоту в положении 9 SEQ ID NO:1.
38. Вариант полипептида по п.37, где указанная аминокислота представляет собой неконсервативную аминокислоту.
39. Вариант полипептида по п.37, где указанная аминокислота представляет собой глутаминовую кислоту.
40. Вариант полипептида по п.33, содержащий отличную от аргинина аминокислоту в положении 14 SEQ ID NO:1.
41. Вариант полипептида по п.40, где указанная аминокислота представляет собой неконсервативную аминокислоту.
42. Вариант полипептида по п.40, где указанная аминокислота представляет собой глутаминовую кислоту.
43. Вариант полипептида по любому из пп.33-42, содержащий аминокислотную последовательность, которая по крайней мере на 90% идентична последовательности SEQ ID NO:1.
44. Вариант полипептида по любому из пп.33-42, содержащий аминокислотную последовательность, которая по крайней мере на 95% идентична последовательности SEQ ID NO:1.
45. Вариант полипептида по любому из пп.33-42, содержащий аминокислотную последовательность, которая по крайней мере на 98% идентична аминокислотам 15-113 последовательности SEQ ID NO:1.
46. Димер, содержащий два любых варианта полипептида нейбластина по любому из пп.29-45.
47. Конъюгат, содержащий вариант полипептида нейбластина по любому из пп.29-45 и неприродный полимер.
48. Слитый белок, содержащий вариант полипептида нейбластина по любому из пп.29-45 и гетерологичную аминокислотную последовательность.
49. Фармацевтическая композиция, содержащая вариант полипептида нейбластина по любому из пп.29-45, димер по п.46, конъюгат по п.47 или слитый белок по п.48, а также фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент.
50. Нуклеиновая кислота, содержащая последовательность, кодирующую вариант полипептида нейбластина по любому из пп.29-45.
51. Экспрессирующий вектор, содержащий нуклеиновую кислоту по п.50.
52. Клетка, содержащая экспрессирующий вектор по п.51.
53. Способ получения варианта полипептида нейбластина, включающий
получение клетки по п.52 и
культивирование клетки в условиях, способствующих экспрессии нуклеиновой кислоты, кодирующей вариант полипептида нейбластина.
54. Способ лечения или предотвращения заболевания или нарушения нервной системы у млекопитающего, включающий введение млекопитающему терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции по п.49.
55. Способ лечения нейропатической боли у млекопитающего, включающий введение млекопитающему терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции по п.49.
56. Способ активации рецептора RET у млекопитающего, включающий введение млекопитающему эффективного количества варианта полипептида нейбластина по любому из пп.29-45, димера по п.46, конъюгата по п.47, слитого белка по п.48 или фармацевтической композиции по п.49.
| 
