(57) 1. Трансформированная бактерия или ее потомство, которые включают нуклеотидную последовательность, реплицирующуюся и экспрессирующуюся в указанной трансформированной бактерии или в ее потомстве, где указанная нуклеотидная последовательность не связана с селектируемым маркером, и где указанная нуклеотидная последовательность присутствует в плазмиде, и где указанная нуклеотидная последовательность кодирует белок, необходимый для выживания, и где ген, кодирующий указанный необходимый для выживания белок, делетирован из бактериального генома указанной трансформированной бактерии.
2. Трансформированная бактерия или ее потомство, которые включают чужеродную нуклеотидную последовательность, реплицирующуюся и экспрессирующуюся в указанной трансформированной бактерии или в ее потомстве, где указанная чужеродная нуклеотидная последовательность не связана с селектируемым маркером, и где указанная чужеродная нуклеотидная последовательность присутствует в плазмиде, и где указанная плазмида содержит ген, кодирующий высвобождение из эндосомы, и где указанный ген, кодирующий высвобождение из эндосомы, может представлять собой чужеродную нуклеотидную последовательность, которая присутствует в указанной плазмиде или может присутствовать в указанной плазмиде в дополнение к чужеродной нуклеотидной последовательности, присутствующей в указанной плазмиде.
3. Трансформированная бактерия или ее потомство по п.2, где указанный ген, кодирующий высвобождение из эндосомы, представляет собой ген перфринголизина О (pfo) из Clostridium perfringens.
4. Трансформированная бактерия или ее потомство, которые включают чужеродную нуклеотидную последовательность, реплицирующуюся и экспрессирующуюся в указанной трансформированной бактерии или в ее потомстве, где указанная чужеродная нуклеотидная последовательность не связана с селектируемым маркером, где указанная чужеродная нуклеотидная последовательность присутствует в плазмиде и где указанная чужеродная нуклеотидная последовательность кодирует антиген 85A, антиген 85B или антиген 85A/85B.
5. Трансформированная бактерия или ее потомство, которые включают чужеродную нуклеотидную последовательность, реплицирующуюся и экспрессирующуюся в указанной трансформированной бактерии или в ее потомстве, где указанная чужеродная нуклеотидная последовательность не связана с селектируемым маркером, где указанная чужеродная нуклеотидная последовательность присутствует в плазмиде и где указанная плазмида содержит ген, кодирующий белки, которые сохраняют и/или стабилизируют плазмиду.
6. Трансформированная бактерия или ее потомство по п.5, где указанный ген, кодирующий белки, кодирует антиген 85A, антиген 85B или антиген 85A/85B.
7. Трансформированная бактерия или ее потомство по п.2, где указанной бактерией является Mycobacterium.
8. Трансформированная бактерия или ее потомство, которые включают чужеродную нуклеотидную последовательность, реплицирующуюся и экспрессирующуюся в указанной трансформированной бактерии или в ее потомстве, где указанная чужеродная нуклеотидная последовательность не связана с селектируемым маркером, где указанная чужеродная нуклеотидная последовательность кодирует апоптоз.
9. Трансформированная бактерия или ее потомство, которые включают чужеродную нуклеотидную последовательность, реплицирующуюся и экспрессирующуюся в указанной трансформированной бактерии или в ее потомстве, где указанная чужеродная нуклеотидная последовательность не связана с селектируемым маркером, и где указанная чужеродная нуклеотидная последовательность присутствует в плазмиде, и где указанная плазмида содержит ген, кодирующий апоптоз.
10. Трансформированная бактерия или ее потомство, которые включают чужеродную нуклеотидную последовательность, реплицирующуюся и экспрессирующуюся в указанной трансформированной бактерии или в ее потомстве, где указанная чужеродная нуклеотидная последовательность не связана с селектируемым маркером и где указанная чужеродная нуклеотидная последовательность не может реплицироваться в грамотрицательных бактериях.
11. Трансформированная бактерия или ее потомство по п.1, где указанной трансформированной бактерией является ауксотрофная бактерия.
12. Трансформированная бактерия или ее потомство по п.1, где указанная чужеродная нуклеотидная последовательность является по меньшей мере частью однонаправленного челночного вектора.
13. Способ трансформирования бактерии, включающий стадию введения нуклеотидной последовательности, которая реплицируется и экспрессируется в указанной бактерии, где указанная нуклеотидная последовательность не связана с селектируемым маркером, и где указанная нуклеотидная последовательность присутствует в плазмиде, где указанная нуклеотидная последовательность кодирует белок, необходимый для выживания, и где ген, кодирующий указанный необходимый для выживания белок, делетирован из бактериального генома указанной бактерии.
14. Способ по п.13, где указанную стадию введения осуществляют путем электропорации.
15. Способ по п.13, где указанная нуклеотидная последовательность является по меньшей мере частью однонаправленного челночного вектора.
16. Трансформированная Mycobacterium или ее потомство, содержащие чужеродную нуклеотидную последовательность, которая кодирует представляющий интерес белок, и где указанная трансформированная Mycobacterium включает плазмиду, которая не способна реплицироваться в грамотрицательных бактериях.
17. Трансформированная Mycobacterium или ее потомство по п.16, где указанная чужеродная нуклеотидная последовательность является частью плазмиды.
18. Трансформированная Mycobacterium или ее потомство по п.17, где указанная плазмида не содержит селектируемого маркера.
19. Трансформированная Mycobacterium или ее потомство по п.17, где указанный белок является необходимым для выживания и соответствует белку выживания, который кодируется нуклеотидной последовательностью, делетированной из бактериального генома указанной трансформированной микобактерии.
20. Трансформированная Mycobacterium или ее потомство по п.19, где указанным белком является leuD.
21. Трансформированная Mycobacterium или ее потомство по п.19, дополнительно содержащие промоторные последовательности, которые активируются in vivo.
22. Трансформированная Mycobacterium или ее потомство по п.16, где указанная трансформированная Mycobacterium является аттенюированной.
23. Трансформированная Mycobacterium или ее потомство по п.22, где указанной трансформированной Mycobacterium является BCG.
24. Трансформированная Mycobacterium или ее потомство по п.23, где указанный BCG выбран из нижеследующих штаммов: BCG1331, BCG Пастер, BCG Токио и BCG Копенгаген.
25. Вакцина, включающая трансформированную Mycobacterium или ее потомство, содержащие чужеродную нуклеотидную последовательность, которая кодирует представляющий интерес ген, и где указанная трансформированная Mycobacterium включает плазмиду, которая не способна реплицироваться в грамотрицательных бактериях.
26. Трансформированная Mycobacterium по п.16, где указанная трансформированная Mycobacterium не обладает резистентностью к антибиотикам.
27. Трансформированная Mycobacterium по п.16, где указанная трансформированная Mycobacterium является ауксотрофной.
28. Вакцина по п.25, где указанная трансформированная Mycobacterium не обладает резистентностью к антибиотикам.
29. Вакцина по п.25, где указанная трансформированная Mycobacterium является ауксотрофной.
30. Способ трансформирования бактерии, включающий стадию введения чужеродной нуклеотидной последовательности, которая реплицируется и экспрессируется в указанной бактерии, где указанная чужеродная нуклеотидная последовательность не связана с селектируемым маркером и где указанная чужеродная нуклеотидная последовательность присутствует в плазмиде, где указанная чужеродная нуклеотидная последовательность не может реплицироваться в грамотрицательных бактериях.
| 
