(57) 1. Моноклональное антитело или его антигенсвязывающая часть, которые специфически связываются с M-CSF, которые содержат
a) тяжелую цепь, содержащую CDR1, CDR2 и CDR3 тяжелой цепи антитела, выбранного из группы, состоящей из антител 252, 88, 100, 3.8.3, 2.7.3, 1.120.1, 9.14.4I, 8.10.3F, 9.7.2IF, 9.14.4, 8.10.3, 9.7.2, 9.7.2C-Ser, 9.14.4C-Ser, 8.10.3C-Ser, 8.10.3-CG2, 9.7.2-CG2, 9.7.2-CG4, 9.14.4-CG2, 9.14.4-CG4, 9.14.4-Ser, 9.7.2-Ser, 8.10.3-Ser, 8.10.3-CG4, 8.10.3FG1 и 9.14.4G1;
b) легкую цепь, содержащую CDR1, CDR2 и CDR3 легкой цепи антитела, выбранного из группы, состоящей из антител 252, 88, 100, 3.8.3, 2.7.3, 1.120.1, 9.14.4I, 8.10.3F, 9.7.2IF, 9.14.4, 8.10.3, 9.7.2, 9.7.2C-Ser, 9.14.4C-Ser, 8.10.3C-Ser, 8.10.3-CG2, 9.7.2-CG2, 9.7.2-CG4, 9.14.4-CG2, 9.14.4-CG4, 9.14.4-Ser, 9.7.2-Ser, 8.10.3-Ser, 8.10.3-CG4, 8.10.3FG1 и 9.14.4G1;
причем указанные антитело или его антигенсвязывающая часть могут содержать тяжелую цепь (а), или как тяжелую цепь (а), так и легкую цепь (b); и аминокислотные последовательности CDR тяжелой цепи и легкой цепи могут быть выбраны из одного и того же антитела, указанного в (а) и (b).
2. Моноклональное антитело или его антигенсвязывающая часть по п.1, содержащие
a) тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, начиная от CDR1 до конца CDR3 тяжелой цепи антитела, выбранного из группы, состоящей из антител 252, 88, 100, 3.8.3, 2.7.3, 1.120.1, 9.14.4I, 8.10.3F, 9.7.2IF, 9.14.4, 8.10.3, 9.7.2, 9.7.2C-Ser, 9.14.4C-Ser, 8.10.3C-Ser, 8.10.3-CG2, 9.7.2-CG2, 9.7.2-CG4, 9.14.4-CG2, 9.14.4-CG4, 9.14.4-Ser, 9.7.2-Ser, 8.10.3-Ser, 8.10.3-CG4, 8.10.3FG1 и 9.14.4G1;
b) легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, начиная от CDR1 до конца CDR3 антитела, выбранного из группы, состоящей из антител 252, 88, 100, 3.8.3, 2.7.3, 1.120.1, 9.14.4I, 8.10.3F, 9.7.2IF, 9.14.4, 8.10.3, 9.7.2, 9.7.2C-Ser, 9.14.4C-Ser, 8.10.3C-Ser, 8.10.3-CG2, 9.7.2-CG2, 9.7.2-CG4, 9.14.4-CG2, 9.14.4-CG4, 9.14.4-Ser, 9.7.2-Ser, 8.10.3-Ser, 8.10.3-CG4, 8.10.3FG1 и 9.14.4G1;
причем указанные антитело или его антигенсвязывающая часть могут содержать тяжелую цепь (а), или как тяжелую цепь (а), так и легкую цепь (b); и аминокислотные последовательности тяжелой цепи от CDR1 до CDR3 и легкой цепи от CDR1 до CDR3 могут быть выбраны из одного и того же антитела, указанного в (а) и (b).
3. Моноклональное антитело или его антигенсвязывающая часть по п.2, содержащие
a) аминокислотную последовательность вариабельного домена тяжелой цепи (VH), антитела, выбранного из группы, состоящей из антител 252, 88, 100, 3.8.3, 2.7.3, 1.120.1, 9.14.4I, 8.10.3F, 9.7.2IF, 9.14.4, 8.10.3, 9.7.2, 9.7.2C-Ser, 9.14.4C-Ser, 8.10.3C-Ser, 8.10.3-CG2, 9.7.2-CG2, 9.7.2-CG4, 9.14.4-CG2, 9.14.4-CG4, 9.14.4-Ser, 9.7.2-Ser, 8.10.3-Ser, 8.10.3-CG4, 8.10.3FG1 и 9.14.4G1;
b) аминокислотную последовательность вариабельного домена легкой цепи (VL), антитела, выбранного из группы, состоящей из антител 252, 88, 100, 3.8.3, 2.7.3, 1.120.1, 9.14.4I, 8.10.3F, 9.7.2IF, 9.14.4, 8.10.3, 9.7.2, 9.7.2C-Ser, 9.14.4C-Ser, 8.10.3C-Ser, 8.10.3-CG2, 9.7.2-CG2, 9.7.2-CG4, 9.14.4-CG2, 9.14.4-CG4, 9.14.4-Ser, 9.7.2-Ser, 8.10.3-Ser, 8.10.3-CG4, 8.10.3FG1 и 9.14.4G1;
причем указанные антитело или его антигенсвязывающая часть могут содержать аминокислотную последовательность VH (а), или как аминокислотную последовательность VH (а), так и
аминокислотную последовательность VL (b); и аминокислотные последовательности VH и VL могут быть выбраны из одного и того же антитела, указанного в (а) и (b).
4. Моноклональное антитело или его антигенсвязывающая часть по п.1, содержащие
а) аминокислотную последовательность тяжелой цепи моноклонального антитела, выбранного из группы 252, 88, 100, 3.8.3, 2.7.3, 1.120.1, 9.14.4I, 8.10.3F, 9.7.2IF, 9.14.4, 8.10.3, 9.7.2, 9.7.2C-Ser, 9.14.4C-Ser, 8.10.3C-Ser, 8.10.3-CG2, 9.7.2-CG2, 9.7.2-CG4, 9.14.4-CG2, 9.14.4-CG4, 9.14.4-Ser, 9.7.2-Ser, 8.10.3-Ser, 8.10.3-CG4, 8.10.3FG1 или 9.14.4G1, без сигнальной последовательности;
b) аминокислотную последовательность легкой цепи моноклонального антитела, выбранного из группы 252, 88, 100, 3.8.3, 2.7.3, 1.120.1, 9.14.4I, 8.10.3F, 9.7.2IF, 9.14.4, 8.10.3, 9.7.2, 9.7.2C-Ser, 9.14.4C-Ser, 8.10.3C-Ser, 8.10.3-CG2, 9.7.2-CG2, 9.7.2-CG4, 9.14.4-CG2, 9.14.4-CG4, 9.14.4-Ser, 9.7.2-Ser, 8.10.3-Ser, 8.10.3-CG4, 8.10.3FG1 или 9.14.4G1, без сигнальной последовательности;
причем указанные антитело или его антигенсвязывающая часть могут содержать аминокислотную последовательность тяжелой цепи (а), или как аминокислотную последовательность тяжелой цепи (a), так и аминокислотную последовательность легкой цепи (b); и аминокислотные последовательности тяжелой и легкой цепи могут быть выбраны из одного и того же антитела, указанного в (а) и (b).
5. Моноклональное антитело или антигенсвязывающая часть по п.1, выбранные из группы, состоящей из
a) антитела, содержащего аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:2 и аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO:4 без сигнальных последовательностей;
b) антитела, содержащего аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:6 и аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO:8 без сигнальных последовательностей;
c) антитела, содержащего аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:10 и аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO:12 без сигнальных последовательностей;
d) антитела, содержащего аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:14 и аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO:16 без сигнальных последовательностей;
e) антитела, содержащего аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:18 и аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO:20 без сигнальных последовательностей;
f) антитела, содержащего аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:22 и аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO:24 без сигнальных последовательностей;
g) антитела, содержащего аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:26 и аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO:28 без сигнальных последовательностей;
h) антитела, содержащего аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:38 и аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO:28 без сигнальных последовательностей;
i) антитела, содержащего аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:54 и аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO:56 без сигнальных последовательностей;
j) антитела, содержащего аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:74 и аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO:56 без сигнальных последовательностей;
k) антитела, содержащего аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:78 и аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO:56 без сигнальных последовательностей;
l) антитела, содержащего аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:82 и аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO:28 без сигнальных последовательностей;
m) антитела, содержащего аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:102 и аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO:28 без сигнальных последовательностей;
n) антитела, содержащего аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:30 и аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO:32 без сигнальных последовательностей;
о) антитела, содержащего аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:30 и аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO:44 без сигнальных последовательностей;
р) антитела, содержащего аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:58 и аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO:60 без сигнальных последовательностей;
q) антитела, содержащего аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:62 и аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO:60 без сигнальных последовательностей;
r) антитела, содержащего аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:90 и аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO:44 без сигнальных последовательностей;
s) антитела, содержащего аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:94 и аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO:60 без сигнальных последовательностей;
t) антитела, содержащего аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:98 и аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO:32 без сигнальных последовательностей;
u) антитела, содержащего аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:34 и аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO:36 без сигнальных последовательностей;
v) антитела, содержащего аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:46 и аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO:48 без сигнальных последовательностей;
w) антитела, содержащего аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:50 и аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO:52 без сигнальных последовательностей;
х) антитела, содержащего аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:66 и аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO:52 без сигнальных последовательностей;
у) антитела, содержащего аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:70 и аминокислотную последовательность легкой цепи, представленную в SEQ ID NO:52, без сигнальных последовательностей; и
z) антитела, содержащего аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:86 и аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO:48 без сигнальных последовательностей.
6. Моноклональное антитело или антигенсвязывающая часть по п.1, содержащие аминокислотные последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 вариабельного домена легкой цепи в SEQ ID NO:32 и аминокислотные последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 вариабельного домена тяжелой цепи в SEQ ID NO:30.
7. Моноклональное антитело по п.6, содержащее аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:30 без сигнальной последовательности и аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO:32 без сигнальной последовательности.
8. Моноклональное антитело или антигенсвязывающая часть по п.1, содержащие аминокислотные последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 вариабельного домена тяжелой цепи антитела 8.10.3F и аминокислотные последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 вариабельного домена легкой цепи антитела 8.10.3F.
9. Моноклональное антитело или антигенсвязывающая часть по п.1, содержащие аминокислотные последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 вариабельного домена легкой цепи в SEQ ID NO:28, и аминокислотные последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 вариабельного домена тяжелой цепи в SEQ ID NO:26.
10. Моноклональное антитело по п.9, содержащее аминокислотную последовательностью тяжелой цепи SEQ ID NO:26 без сигнальной последовательности и аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO:28 без сигнальной последовательности.
11. Моноклональное антитело или антигенсвязывающая часть по п.1, содержащие аминокислотные последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 вариабельного домена тяжелой цепи антитела 9.14.4I и аминокислотные последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 вариабельного домена легкой цепи антитела 9.14.4I.
12. Моноклональное антитело или антигенсвязывающая часть по любому из пп.1-11, содержащие любые одну или несколько аминокислотных последовательностей FR1, FR2, FR3 или FR4 антитела, выбранного из группы, состоящей из антител 252, 88, 100, 3.8.3, 2.7.3, 1.120.1, 9.14.4I, 8.10.3F, 9.7.2IF, 9.14.4, 8.10.3, 9.7.2, 9.7.2C-Ser, 9.14.4C-Ser, 8.10.3C-Ser, 8.10.3-CG2, 9.7.2-CG2, 9.7.2-CG4, 9.14.4-CG2, 9.14.4-CG4, 9.14.4-Ser, 9.7.2-Ser, 8.10.3-Ser, 8.10.3-CG4, 8.10.3FG1 и 9.14.4G1.
13. Человеческое моноклональное антитело 8.10.3F или его антигенсвязывающая часть, которые специфически связываются с М-CSF.
14. Человеческое моноклональное антитело 9.14.4I или его антигенсвязывающая часть, которые специфически связываются с М-CSF.
15. Моноклональное антитело или его антигенсвязывающая часть по любому из пп.1-14, где С-концевой лизин тяжелой цепи антитела или его части отсутствует.
16. Фармацевтическая композиция, содержащая моноклональное антитело или его антигенсвязывающую часть по любому из пп.1-15 и фармацевтически приемлемый носитель.
17. Фармацевтическая композиция по п.16, где моноклональным антителом является антитело 9.14.4I или 8.10.3F.
18. Применение моноклонального антитела или его антигенсвязывающей части по любому из пп.1-15 в изготовлении лекарственного средства для лечения состояния, выбранного из группы, состоящей из артрита, псориатического артрита, анкилозирующего спондилита, синдрома Рейтера, ревматоидного артрита, подагры, травматического артрита, коревого артрита и острого синовита, и других артритных состояний, сепсиса, септического шока, эндотоксического шока, сепсиса, вызванного грамотрицательными бактериями, синдрома токсического шока, болезни Альцгеймера, инсульта, нейротравмы, астмы, острого респираторного дистресс-синдрома, церебральной малярии, хронического воспалительного заболевания легких, силикоза, саркоидоза легких, резорбции кости, остеопороза, рестеноза, реперфузионного поражения сердца и почек, тромбоза, гломерулонефрита, диабета, реакции "трансплантат против хозяина", отторжения аллотрансплантата, воспалительного заболевания кишечника, болезни Крона, язвенного колита, рассеянного склероза, дегенерации мышц, экземы, контактного дерматита, псориаза, солнечных ожогов и острого конъюнктивита.
19. Применение моноклонального антитела или его антигенсвязывающей части по любому из пп.1-15 в изготовлении лекарственного средства для лечения солидной опухоли, такой как саркома, карцинома или лимфома.
20. Применение моноклонального антитела или антигенсвязывающей части по любому из пп.1-15 для изготовления фармацевтической композиции.
21. Применение по п.18, где указанным состоянием является ревматоидный артрит.
22. Применение по любому из пп.18-21, где указанным антителом является антитело 8.10.3F или 9.14.4I.
23. Выделенная клеточная линия, которая продуцирует моноклональное антитело или антигенсвязывающую часть по любому из пп.1-15 или тяжелую цепь указанного антитела или его части.
24. Клеточная линия по п.23, которая продуцирует моноклональное антитело, выбранное из группы, состоящей из антител 252, 88, 100, 3.8.3, 2.7.3, 1.120.1, 9.14.4I, 8.10.3F, 9.7.2IF, 9.14.4, 8.10.3, 9.7.2, 9.7.2C-Ser, 9.14.4C-Ser, 8.10.3C-Ser, 8.10.3-CG2, 9.7.2-CG2, 9.7.2-CG4, 9.14.4-CG2, 9.14.4-CG4, 9.14.4-Ser, 9.7.2-Ser, 8.10.3-Ser, 8.10.3-CG4, 8.10.3FG1 и 9.14.4G1.
25. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты, содержащая нуклеотидную последовательность, которая кодирует тяжелую цепь или ее антигенсвязывающую часть, или как тяжелую цепь, так и легкую цепь или их антигенсвязывающие части, моноклонального антитела по любому из пп.1-15.
26. Вектор, содержащий молекулу нуклеиновой кислоты по п.25, где указанный вектор при необходимости содержит последовательность регуляции экспрессии, функционально присоединенную к указанной молекуле нуклеиновой кислоты.
27. Выделенная клетка-хозяин, содержащая вектор по п.26 или молекулу нуклеиновой кислоты по п.25.
28. Выделенная клетка-хозяин по п.27, содержащая молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую тяжелую цепь, и молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую легкую цепь антитела или его антигенсвязывающей части по любому из пп.1-15.
29. Способ получения анти-M-CSF-антитела или его антигенсвязывающей части, предусматривающий культивирование клетки-хозяина по п.27 или клеточной линии по п.23 в подходящих условиях и выделение указанного антитела или его части.
30. Моноклональное антитело или антигенсвязывающая часть по п.1, или выделенный полипептид, содержащие тяжелую цепь антитела, содержащего
a) аминокислотную последовательность SEQ ID NO:2 без сигнальной последовательности;
b) аминокислотную последовательность SEQ ID NO:6 без сигнальной последовательности;
c) аминокислотную последовательность SEQ ID NO:10 без сигнальной последовательности;
d) аминокислотную последовательность SEQ ID NO:14 без сигнальной последовательности;
e) аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18 без сигнальной последовательности;
f) аминокислотную последовательность SEQ ID NO:22 без сигнальной последовательности;
g) аминокислотную последовательность SEQ ID NO:26 без сигнальной последовательности;
h) аминокислотную последовательность SEQ ID NO:30 без сигнальной последовательности;
i) аминокислотную последовательность SEQ ID NO:34 без сигнальной последовательности;
j) аминокислотную последовательность SEQ ID NO:38 без сигнальной последовательности;
k) аминокислотную последовательность SEQ ID NO:46 без сигнальной последовательности;
l) аминокислотную последовательность SEQ ID NO:50 без сигнальной последовательности;
m) аминокислотную последовательность SEQ ID NO:54 без сигнальной последовательности;
n) аминокислотную последовательность SEQ ID NO:58 без сигнальной последовательности;
o) аминокислотную последовательность SEQ ID NO:62 без сигнальной последовательности;
р) аминокислотную последовательность SEQ ID NO:66 без сигнальной последовательности;
q) аминокислотную последовательность SEQ ID NO:70 без сигнальной последовательности;
r) аминокислотную последовательность SEQ ID NO:74 без сигнальной последовательности;
s) аминокислотную последовательность SEQ ID NO:78 без сигнальной последовательности;
t) аминокислотную последовательность SEQ ID NO:82 без сигнальной последовательности;
u) аминокислотную последовательность SEQ ID NO:86 без сигнальной последовательности;
v) аминокислотную последовательность SEQ ID NO:90 без сигнальной последовательности;
w) аминокислотную последовательность SEQ ID NO:94 без сигнальной последовательности;
х) аминокислотную последовательность SEQ ID NO:98 без сигнальной последовательности; и
у) аминокислотную последовательность SEQ ID NO:102 без сигнальной последовательности.
31. Выделенный полипептид по п.30, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:30 без сигнальной последовательности.
32. Выделенный полипептид по п.30, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:26 без сигнальной последовательности.
33. Моноклональное антитело или антигенсвязывающая часть по п.1, или выделенный полипептид, содержащие легкую цепь антитела, содержащего
a) аминокислотную последовательность SEQ ID NO:4 без сигнальной последовательности;
b) аминокислотную последовательность SEQ ID NO:8 без сигнальной последовательности;
c) аминокислотную последовательность SEQ ID NO:12 без сигнальной последовательности;
d) аминокислотную последовательность SEQ ID NO:16 без сигнальной последовательности;
e) аминокислотную последовательность SEQ ID NO:20 без сигнальной последовательности;
f) аминокислотную последовательность SEQ ID NO:24 без сигнальной последовательности;
g) аминокислотную последовательность SEQ ID NO:28 без сигнальной последовательности;
h) аминокислотную последовательность SEQ ID NO:36 без сигнальной последовательности;
i) аминокислотную последовательность SEQ ID NO:44 без сигнальной последовательности;
j) аминокислотную последовательность SEQ ID NO:48 без сигнальной последовательности;
k) аминокислотную последовательность SEQ ID NO:52 без сигнальной последовательности;
l) аминокислотную последовательность SEQ ID NO:56 без сигнальной последовательности; и
m) аминокислотную последовательность SEQ ID NO:60 без сигнальной последовательности.
34. Выделенный полипептид по п.33, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:28 без сигнальной последовательности.
|
