(57) 1. Полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую полипептид фактора VIII, причем полипептид фактора VIII содержит легкую цепь, тяжелую цепь и полипептидный линкер, соединяющий С-конец тяжелой цепи с N-концом легкой цепи,
где тяжелая цепь полипептида фактора VIII включает первую полипептидную последовательность, имеющую, по меньшей мере, 95% идентичности с аминокислотами 20-759 из SEQ ID NO: 2;
где легкая цепь полипептида фактора FVIII включает вторую полипептидную последовательность, имеющую, по меньшей мере, 95% идентичности с аминокислотами 774-1457 из SEQ ID NO: 2; и
где полипептидный линкер включает сайт расщепления фурином и пептид гликозилирования, где пептид гликозилирования имеет аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 51, 53, 55, 57, 59, 61, 63, 65, 67, 69, 71 и 73.
2. Полинуклеотид по п.1, причем кодируемый полипептид фактора VIII содержит аминокислотные замены I105V, A127S, G151K, М166Т и L171P относительно SEQ ID NO: 19.
3. Полинуклеотид по п.1 или 2, причем пептид гликозилирования имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 55.
4. Полинуклеотид по любому из пп.1-3, причем полипептидный линкер имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 113.
5. Полинуклеотид по любому из пп.1-4,
где тяжелая цепь полипептида фактора VIII включает первую полипептидную последовательность, имеющую, по меньшей мере, 99% идентичности с аминокислотами 20-759 из SEQ ID NO: 2;
где легкая цепь полипептида фактора FVIII включает вторую полипептидную последовательность, имеющую, по меньшей мере, 99% идентичности с нуклеиновыми кислотами 774-1457 из SEQ ID NO: 2.
6. Полинуклеотид по любому из пп.1-5, причем кодируемый полипептид фактора VIII содержит последовательность, имеющую, по меньшей мере, 99% идентичности последовательности с SEQ ID NO: 2.
7. Полинуклеотид по любому из пп.1-6, дополнительно содержащий промоторный элемент, функционально связанный с полинуклеотидом, кодирующим полипептид фактора VIII.
8. Полинуклеотид по п.7, в котором промоторный элемент представляет собой промоторную последовательность, специфичную для печени, выше нуклеотидной последовательности, кодирующей полипептид фактора VIII.
9. Вектор на основе аденоассоциированного вируса (AAV), содержащий полинуклеотид по любому из пп.1-8.
10. Частица аденоассоциированного вируса (AAV), содержащая полинуклеотид по любому из пп.1-8.
11. Частица аденоассоциированного вируса (AAV) по п.10, причем AAV частица представляет собой AAV-8 частицу.
12. Клетка-хозяин, инфицированная частицей аденоассоциированного вируса (AAV), содержащей полинуклеотид по любому из пп.1-8.
13. Способ in vitro получения частицы аденоассоциированного вируса (AAV), включающий введение полинуклеотида по любому из пп.1-8 в клетку-хозяин млекопитающего, причем полинуклеотид является компетентным для репликации в клетке-хозяине млекопитающего.
14. Способ лечения гемофилии А, включающий введение эффективного количества полинуклеотида по любому из пп.1-8.
15. Применение полинуклеотида по любому из пп.1-8 для лечения гемофилии А.
16. Применение полинуклеотида по любому из пп.1-8 для получения лекарственного средства для лечения гемофилии А.
17. Способ лечения гемофилии А, включающий введение эффективного количества частицы аденоассоциированного вируса (AAV) по п.10.
18. Применение частицы аденоассоциированного вируса (AAV) по п.10 для лечения гемофилии А.
19. Применение частицы аденоассоциированного вируса (AAV) по п.10 для получения лекарственного средства для лечения гемофилии А.
20. Полипептид фактора VIII, содержащий легкую цепь, тяжелую цепь и полипептидный линкер, соединяющий С-конец тяжелой цепи с N-концом легкой цепи,
где тяжелая цепь полипептида фактора VIII включает первую полипептидную последовательность, имеющую, по меньшей мере, 95% идентичности с аминокислотами 20-759 из SEQ ID NO: 2;
где легкая цепь полипептида фактора FVIII включает вторую полипептидную последовательность, имеющую, по меньшей мере, 95% идентичности с аминокислотами 774-1457 из SEQ ID NO: 2; и
где полипептидный линкер включает сайт расщепления фурином и пептид гликозилирования, где пептид гликозилирования имеет аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 51, 53, 55, 57, 59, 61, 63, 65, 67, 69, 71 и 73.
21. Полипептид фактора VIII по п.20, содержащий аминокислотные замены I105V, A127S, G151K, М166Т и L171P относительно SEQ ID NO: 19.
22. Полипептид фактора VIII по п.20 или 21, причем пептид гликозилирования имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 55.
23. Полипептид фактора VIII по любому из пп.20-22, причем полипептидный линкер имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 113.
24. Полипептид фактора VIII по любому из пп.20-23,
где тяжелая цепь полипептида фактора VIII включает первую полипептидную последовательность, имеющую, по меньшей мере, 99% идентичности с аминокислотами 20-759 из SEQ ID NO: 2;
где легкая цепь полипептида фактора FVIII включает вторую полипептидную последовательность, имеющую, по меньшей мере, 99% идентичности с нуклеиновыми кислотами 774-1457 из SEQ ID NO: 2.
25. Полипептид фактора VIII по любому из пп.20-24, включающий последовательность, имеющую, по меньшей мере, 99% идентичности последовательности с SEQ ID NO: 2.
26. Способ лечения гемофилии А, включающий введение эффективного количества полипептида фактора VIII по любому из пп.20-25.
27. Применение полипептида фактора VIII по любому из пп.20-25 для лечения гемофилии А.
28. Применение полипептида фактора VIII по любому из пп.20-25 для получения лекарственного средства для лечения гемофилии А.

---