(57) 1. Противоопухолевый антагонист, содержащий:
первый нацеливающий домен, который специфично связывается с PD-1 или LAG-3; и
второй нацеливающий домен, содержащий scFv, который специфично связывается с TIGIT,
причем указанный scFv содержит:
(1) HCVR иммуноглобулина, содержащую три определяющих комплементарность участка (HCDR): HCDR1, HCDR2 и HCDR3,
причем HCDR1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 23, причем HCDR2 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 24, причем HCDR3 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 25; и
(2) LCVR иммуноглобулина, содержащую три определяющих комплементарность участка (LCDR): LCDR1, LCDR2 и LCDR3,
причем LCDR1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 45, причем LCDR2 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 46, и причем LCDR3 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 47;
причем указанный первый нацеливающий домен, который специфично связывается с PD-1, содержит:
(a) HCVR иммуноглобулина, содержащую три определяющих комплементарность участка (HCDR): HCDR1, HCDR2 и HCDR3,
причем HCDR1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 79, причем HCDR2 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 80, причем HCDR3 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 81; и
(b) LCVR иммуноглобулина, содержащую три определяющих комплементарность участка (LCDR): LCDR1, LCDR2 и LCDR3,
причем LCDR1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 93, причем LCDR2 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 94, и причем LCDR3 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 95; и
причем указанный первый нацеливающий домен, который специфично связывается с LAG-3, содержит:
(i) HCVR иммуноглобулина, содержащую три определяющих комплементарность участка (HCDR): HCDR1, HCDR2 и HCDR3,
причем HCDR1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 163, причем HCDR2 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 164, причем HCDR3 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 165; и
(ii) LCVR иммуноглобулина, содержащую три определяющих комплементарность участка (LCDR): LCDR1, LCDR2 и LCDR3,
причем LCDR1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 172, причем LCDR2 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 173, и причем LCDR3 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 174.
2. Противоопухолевый антагонист по п.1, отличающийся тем, что указанный первый нацеливающий домен специфично связывается с PD-1 и содержит:
(1) HCVR иммуноглобулина, содержащую три определяющих комплементарность участка (HCDR): HCDR1, HCDR2 и HCDR3,
где HCDR1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 79, где HCDR2 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 80, где HCDR3 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 81; и
(2) LCVR иммуноглобулина, содержащую три определяющих комплементарность участка (LCDR): LCDR1, LCDR2 и LCDR3,
где LCDR1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 93, где LCDR2 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 94, и где LCDR3 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 95.
3. Противоопухолевый антагонист по п.2, отличающийся тем, что указанный первый нацеливающий домен содержит:
HCVR иммуноглобулина, которая имеет, по меньшей мере, 90% идентичности c SEQ ID NO: 106; и/или
LCVR иммуноглобулина, которая имеет, по меньшей мере, 90% идентичности c SEQ ID NO: 107.
4. Противоопухолевый антагонист по п.3, отличающийся тем, что указанный первый нацеливающий домен содержит:
HCVR иммуноглобулина, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 106; и/или
LCVR иммуноглобулина, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 107.
5. Противоопухолевый антагонист по п.1, отличающийся тем, что указанный первый нацеливающий домен специфично связывается с LAG-3 и содержит:
(1) HCVR иммуноглобулина, содержащую три определяющих комплементарность участка (HCDR): HCDR1, HCDR2 и HCDR3,
где HCDR1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 163, где HCDR2 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 164, где HCDR3 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 165; и
(2) LCVR иммуноглобулина, содержащую три определяющих комплементарность участка (LCDR): LCDR1, LCDR2 и LCDR3,
где LCDR1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 172, где LCDR2 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 173, и где LCDR3 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 174.
6. Противоопухолевый антагонист по п.5, отличающийся тем, что указанный первый нацеливающий домен содержит:
HCVR иммуноглобулина, которая, по меньшей мере, на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 180; и/или
LCVR иммуноглобулина, которая, по меньшей мере, на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 181.
7. Противоопухолевый антагонист по п.6, отличающийся тем, что указанный первый нацеливающий домен содержит:
HCVR иммуноглобулина, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 180; и/или
LCVR иммуноглобулина, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 181.
8. Противоопухолевый антагонист по любому из пп.1-7, отличающийся тем, что указанный scFv содержит:
HCVR иммуноглобулина, которая имеет, по меньшей мере, 90% идентичности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 66; и/или
LCVR иммуноглобулина, которая имеет, по меньшей мере, 90% идентичности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 67.
9. Противоопухолевый антагонист по п.8, отличающийся тем, что указанный scFv содержит:
HCVR иммуноглобулина, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 66; и/или
LCVR иммуноглобулина, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 67.
10. Противоопухолевый антагонист по любому из пп.1-9, дополнительно содержащий иммуноглобулиновый каркас, имеющий аминоконец и карбокси-конец,
причем указанный первый нацеливающий домен связан с аминоконцом указанного иммуноглобулинового каркаса и указанный второй нацеливающий домен связан с карбокси-концом указанного иммуноглобулинового каркаса с помощью пептидного линкера, и
причем указанный пептидный линкер содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 188-191.
11. Противоопухолевый антагонист по любому из пп.2-4, который содержит:
тяжелую цепь иммуноглобулина, которая имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 160 или 162; и/или
легкую цепь иммуноглобулина, которая имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 161.
12. Противоопухолевый антагонист по любому из пп.5-7, который содержит:
тяжелую цепь иммуноглобулина, которая имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 192 или 193; и/или
легкую цепь иммуноглобулина, которая имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 194.
13. Нуклеиновая кислота, кодирующая один или более доменов противоопухолевого антагониста по любому из пп.1-12.
14. Вектор экспрессии, содержащий одну или более нуклеиновых кислот по п.13.
15. Способ лечения клеточного пролиферативного расстройства у субъекта, включающий введение нуждающемуся в этом субъекту эффективного количества противоопухолевого антагониста по любому из пп.1-12, нуклеиновой кислоты по п.13 или вектора экспрессии по п.14.
16. Способ лечения по п.15, отличающийся тем, что клеточное пролиферативное расстройство представляет собой опухоль или рак.

---