(57) 1. Средство на основе двухнитевой RNAi для ингибирования экспрессии кетогексокиназы (KHK),
где указанное средство на основе двухнитевой RNAi содержит смысловую нить и антисмысловую нить, образующие двухнитевой участок,
указанная смысловая нить содержит по меньшей мере 17 смежных нуклеотидов, отличающихся не более чем на 3 нуклеотида от последовательности нуклеотидов 798-833 SEQ ID NO: 5, и указанная антисмысловая нить содержит по меньшей мере 17 смежных нуклеотидов, отличающихся не более чем на 3 нуклеотида от последовательности нуклеотидов соответствующей нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 6,
смысловая нить и антисмысловая нить, каждая независимо, имеют длину 17-25 нуклеотидов,
не более 5 нуклеотидов смысловой цепи и не более 5 нуклеотидов антисмысловой цепи представляют собой немодифицированные нуклеотиды и
указанная смысловая нить конъюгирована с лигандом, присоединенным на 3'-конце.
2. Средство на основе двухнитевой RNAi по п.1, где все нуклеотиды указанной смысловой цепи и все нуклеотиды указанной антисмысловой цепи содержат нуклеотидную модификацию.
3. Средство на основе двухнитевой RNAi по п.2, где модификации нуклеотидов выбраны из группы, состоящей из 2'-O-метил-модификации нуклеотида, модификации нуклеотида, содержащего модификацию 5'-фосфоротиоатной группы, модификации дезоксинуклеотида, модификации 3'-концевого дезокситиминового (dT) нуклеотида, 2'-О-метил-модификации нуклеотида, 2'-фтор-модификации нуклеотида, модификации 2'-дезоксинуклеотида, модификации концевого нуклеотида, связанного с холестериловым производным или бисдециламидной группой додекановой кислоты, модификации 2'-дезокси-2'-фторнуклеотида, модификации "запертого" нуклеотида, модификации "незапертого" нуклеотида, модификации конформационно ограниченного нуклеотида, модификации затрудненного этилом нуклеотида, модификации нуклеотида, лишенного азотистого основания, модификации 2'-аминонуклеотида, модификации 2'-О-аллилнуклеотида, модификации 2'-С-алкилнуклеотида, модификации 2'-гидроксинуклеотида, модификации 2'-метоксиэтилнуклеотида, модификации 2'-О-алкилнуклеотида, модификации морфолинового нуклеотида, модификации фосфорамидата, модификации нуклеотида, содержащего не встречающиеся в природе основания, модификации тетрагидропиранового нуклеотида, модификации 1,5-ангидро­гекситолнуклеотида, модификации циклогексенилнуклеотида, модификации нуклеотида, содержащего фосфоротиоатную группу, модификации нуклеотида, содержащего метилфосфонатную группу, модификации нуклеотида, содержащего 5'-фосфат, и модификации нуклеотида, содержащего миметик 5'-фосфат.
4. Средство на основе двухнитевой RNAi по п.2, где модификации нуклеотидов представляют собой 2'-О-метил-модификации или 2'-фтор-модификации.
5. Средство на основе двухнитевой RNAi по п.1, где по меньшей мере одна нить содержит 3'-выступ по меньшей мере из 1 нуклеотида или 3'-выступ по меньшей мере из 2 нуклеотидов.
6. Средство на основе двухнитевой RNAi по п.1, где указанное средство на основе двухнитевой RNAi дополнительно содержит по меньшей мере одну фосфоротиоатную или метилфосфонатную межнуклеотидную связь.
7. Средство на основе двухнитевой RNAi по п.6, где указанное средство на основе двухнитевой RNAi содержит 6-8 фосфоротиоатных межнуклеотидных связей.
8. Средство на основе двухнитевой RNAi по п.7, где антисмысловая нить содержит две фосфоротиоатные межнуклеотидные связи на 5'-конце и две фосфоротиоатные межнуклеотидные связи на 3'-конце, а смысловая нить содержит по меньшей мере две фосфоротиоатные межнуклеотидные связи либо на 5'-конце, либо на 3'-конце.
9. Средство на основе двухнитевой RNAi по п.1, где лиганд представляет собой одно или несколько производных GalNAc, присоединенных через двухвалентный или трехвалентный разветвленный линкер.
10. Средство на основе двухнитевой RNAi для ингибирования экспрессии кетогексокиназы (KHK),
где указанное средство на основе двухнитевой RNAi содержит смысловую нить и антисмысловую нить, образующие двухнитевой участок,
указанная смысловая нить содержит по меньшей мере 17 смежных нуклеотидов, отличающихся не более чем на 3 нуклеотида от последовательности нуклеотидов 798-833 SEQ ID NO: 5, а указанная антисмысловая нить содержит по меньшей мере 17 смежных нуклеотидов, отличающихся не более чем на 3 нуклеотида от последовательности нуклеотидов соответствующей нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 6,
смысловая нить и антисмысловая нить, каждая независимо, имеют длину 17-25 нуклеотидов,
не более 5 нуклеотидов указанной смысловой цепи содержат модификацию, отличную от модификации нуклеотидов, выбранной из группы, состоящей из 2'-О-метил-модификации и 2'-фтор-модификации,
указанная смысловая нить содержит две фосфоротиоатные межнуклеотидные связи на 5'-конце,
не более 5 нуклеотидов указанной антисмысловой цепи содержат модификацию, отличную от модификации нуклеотидов, выбранной из группы, состоящей из 2'-О-метил-модификации и 2'-фтор-модификации,
указанная антисмысловая нить содержит две фосфоротиоатные межнуклеотидные связи на 5'-конце и две фосфоротиоатные межнуклеотидные связи на 3'-конце и
указанная смысловая нить конъюгирована с одним или несколькими производными GalNAc, присоединенными через разветвленный двухвалентный или трехвалентный линкер на 3'-конце.
11. Средство на основе двухнитевой RNAi по п.10, где все нуклеотиды указанной смысловой цепи и все нуклеотиды указанной антисмысловой цепи содержат модификацию нуклеотидов, выбранную из группы, состоящей из 2'-О-метил-модификации и 2'-фтор-модификации.
12. Средство на основе двухнитевой RNAi по п.1 или 10, где длина двухцепочечной области составляет 17-25 пар нуклеотидов.
13. Средство на основе двухнитевой RNAi по п.1 или 10, где длина двухцепочечной области составляет 17-23 пары нуклеотидов.
14. Средство на основе двухнитевой RNAi по п.1 или 10, где каждая нить независимо имеет длину 19-25 нуклеотидов.
15. Средство на основе двухнитевой RNAi по п.1 или 10, где длина каждой цепи независимо составляет 17-23 нуклеотида.
16. Средство на основе двухнитевой RNAi по п.1 или 10, где длина каждой цепи независимо составляет 19-23 нуклеотида.
17. Средство на основе двухнитевой RNAi по п.1 или 10, где лиганд представляет собой

18. Средство на основе двухнитевой RNAi по п.17, где средство на основе двухнитевой RNAi конъюгировано с лигандом, как показано на следующей схеме:

где X представляет собой О или S.
19. Средство на основе двухнитевой RNAi по п.1 или 10, где антисмысловая нить содержит нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, состоящей из
5'-AUCUUUGCUGACAAACACCACGU-3' (SEQ ID NO: 212),
5'-AUUUGCUGACAAACACCACGUCU-3' (SEQ ID NO: 211),
5'-AAACACCACGUCUCCGUAGCCAA-3' (SEQ ID NO: 208),
5'-UAAACACCACGUCUCCGUAGCCA-3' (SEQ ID NO: 209),
5'-UACAUCUUUGCUGACAAACACCA-3' (SEQ ID NO: 214),
5' - ACAUCUUUGCUGACAAACACCAC-3' (SEQ ID NO: 213).
20. Средство на основе двухнитевой RNAi по п.19, где:
(a) смысловая нить содержит последовательность нуклеотидов 5'-GUGGUGUUUGUCAGCAAAGAU-3' (SEQ ID NO: 162) и антисмысловая нить содержит последовательность нуклеотидов 5'-AUCUUUGCUGACAAACACCACGU-3' (SEQ ID NO: 212); или
(b) смысловая нить содержит последовательность нуклеотидов 5'-ACGUGGUGUUUGUCAGCAAAU-3' (SEQ ID NO: 161) и антисмысловая нить содержит последовательность нуклеотидов 5'-AUUUGCUGACAAACACCACGUCU-3' (SEQ ID NO: 211); или
(c) смысловая нить содержит последовательность нуклеотидов 5'-GGCUACGGAGACGUGGUGUUU-3' (SEQ ID NO: 158) и антисмысловая нить содержит последовательность нуклеотидов 5'-AAACACCACGUCUCCGUAGCCAA-3' (SEQ ID NO: 208); или
(d) смысловая нить содержит последовательность нуклеотидов 5'-GCUACGGAGACGUGGUGUUUA-3' (SEQ ID NO: 159) и антисмысловая нить содержит последовательность нуклеотидов 5'-UAAACACCACGUCUCCGUAGCCA-3' (SEQ ID NO: 209); или
(e) смысловая нить содержит последовательность нуклеотидов 5'-GUGUUUGUCAGCAAAGAUGUA-3' (SEQ ID NO: 164) и антисмысловая нить содержит последовательность нуклеотидов 5'-UACAUCUUUGCUGACAAACACCA-3' (SEQ ID NO: 214); или
(f) смысловая нить содержит последовательность нуклеотидов 5'-GGUGUUUGUCAGCAAAGAUGU-3' (SEQ ID NO: 163) и антисмысловая нить содержит последовательность нуклеотидов 5'-ACAUCUUUGCUGACAAACACCAC-3' (SEQ ID NO: 213).
21. Выделенная клетка, содержащая средство на основе двухнитевой RNAi по любому из пп.1-20.
22. Фармацевтическая композиция для ингибирования экспрессии кетогексокиназы (KHK), содержащая средство на основе двухнитевой RNAi по любому из пп.1-20.
23. Фармацевтическая композиция по п.22, где средство на основе двухнитевой RNAi находится в незабуференном растворе.
24. Фармацевтическая композиция по п.23, где незабуференный раствор представляет собой физиологический раствор или воду.
25. Фармацевтическая композиция по п.22, где средство на основе двухнитевой RNAi находится в буферном растворе.
26. Фармацевтическая композиция по п.25, где буферный раствор содержит ацетат, цитрат, проламин, карбонат или фосфат или любую их комбинацию.
27. Фармацевтическая композиция по п.25, где буферный раствор представляет собой фосфатно-солевой буферный раствор (PBS).
28. Фармацевтическая композиция для ингибирования экспрессии кетогексокиназы (KHK), содержащая средство на основе двухнитевой RNAi по любому из пп.1-20 и липидный состав.
29. Способ in vitro ингибирования экспрессии кетогексокиназы (KHK) в клетке, включающий:
(а) приведение клетки в контакт со средством на основе двухнитевой RNAi по любому из пп.1-20 или фармацевтической композицией по любому из пп.22-28 и
(b) поддержание клетки, полученной на стадии (а), в течение времени, достаточного для разрушения транскрипта mRNA гена KHK с ингибированием тем самым экспрессии гена KHK в клетке.
30. Способ лечения субъекта с нарушением, ассоциированным с кетогексокиназой (KHK), включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества средства на основе двухнитевого RNAi по любому из пп.1-20 или фармацевтической композиции по любому из пп.22-28, таким образом лечение указанного субъекта.
31. Способ по п.30, где субъектом является человек.
32. Способ по п.30, где заболевание, ассоциированное с кетогексокиназой, выбрано из группы, состоящей из заболевания печени, дислипидемии, нарушений гликемического контроля, сердечно-сосудистого заболевания, заболевания почек, метаболического синдрома, дисфункции адипоцитов, отложения висцерального жира, ожирения, гиперурикемии, подагры, расстройств пищевого поведения и чрезмерного пристрастия к сахару.
33. Способ по п.32, где заболевание печени представляет собой жировое перерождение печени и/или стеатогепатит.
34. Способ по п.32, где дислипидемия выбрана из группы, состоящей из гиперлипидемии, высокого уровня холестерина LDL, низкого уровня холестерина HDL, гипертриглицеридемии и постпрандиальной гипертриглицеридемии.
35. Способ по п.32, где нарушение гликемического контроля представляет собой инсулинорезистентность и/или диабет.
36. Способ по п.32, где сердечно-сосудистое заболевание представляет собой гипертензию и/или дисфункцию эндотелиальных клеток.
37. Способ по п.32, где заболевание почек выбрано из группы, состоящей из острого нарушения функции почек, канальцевой дисфункции и провоспалительных изменений проксимальных канальцев.

---