(57) 1. Применение антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, которое потенцирует цитотоксическую активность и тем самым активирует натуральные клетки киллеры (NK-клетки) путем блокирования или нейтрализации ингибирования NK-клеток, опосредуемого экспрессированным на NK-клетках полипептидом KIR2DL1, KIR2DL2 и/или KIR2DL3 для лечения аутоиммунного заболевания или воспалительного заболевания, где аутоиммунные заболевания или воспалительное заболевание опосредуются, по меньшей мере частично, Т-клетками, где активированные NK-клетки уничтожают или уменьшают количество Т-клеток, вовлеченных в опосредуемое воспалительное заболевание или аутоиммунное заболевание, и где указанное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержат:
(i) область V_L содержащую CDR1, имеющий аминокислотную последовательность, соответствующую остаткам 24-34 из SEQ ID NO: 1; CDR2, имеющий аминокислотную последовательность, соответствующую остаткам 50-56 из SEQ ID NO: 1; и CDR3, имеющий аминокислотную последовательность, соответствующую остаткам 89-97 из SEQ ID NO: 1; и область V_H содержащую CDR1, имеющий аминокислотную последовательность, соответствующую остаткам 31-35 из SEQ ID NO: 2; CDR2, имеющий аминокислотную последовательность, соответствующую остаткам 50-65 из SEQ ID NO: 2; и CDR3, имеющий аминокислотную последовательность, соответствующую остаткам 99-112 из SEQ ID NO: 2; или
(ii) область V_L содержащую CDR1, имеющий аминокислотную последовательность, соответствующую остаткам 24-34 из SEQ ID NO: 3; CDR2, имеющий аминокислотную последовательность, соответствующую остаткам 50-56 из SEQ ID NO: 3; и CDR3, имеющий аминокислотную последовательность, соответствующую остаткам 89-97 из SEQ ID NO: 3; и область V_H содержащую CDR1, имеющий аминокислотную последовательность, соответствующую остаткам 31-35 из SEQ ID NO: 4; CDR2, имеющий аминокислотную последовательность, соответствующую остаткам 50-65 из SEQ ID NO: 4; и CDR3, имеющий аминокислотную последовательность, соответствующую остаткам 99-112 из SEQ ID NO: 4.
2. Применение по п.1, где указанные Т-клетки выбраны из Т-клеток, включающих по меньшей мере одно из:
(i) провоспалительные, активированные и/или пролиферирующие Т-клетки, CD4⁺ Т-клетки, проникающие в ткани Т-клетки и Т-клетки, экспрессирующие HLA-cw3 и/или HLA-cw4; или
(ii) циркулирующие Т-клетки, Т-клетки, содержащиеся в подверженных заболеванию или воспаленных тканях, проникшие в подверженные заболеванию ткани Т-клетки, Т-клетки, содержащиеся в синовиальной ткани сустава или синовиальной жидкости, и Т-клетки, находящиеся в центральной нервной системе, прямой кишке или дерме.
3. Применение по п.1, где аутоиммунное заболевание выбрано из группы, включающей острый синусит, хронический синусит, болезнь Аддисона, аутоиммунный гепатит, болезнь Бехчета, глютеновую энтеропатию, хронический активный гепатит, контактный дерматит, болезнь Крона, дерматомиозит, экземы, синдром Гудпасчера, синдром Гийена-Барре, энцефалит Хашимото, тиреоидит Хашимото, сахарный диабет I типа, красную волчанку, рассеянный склероз (PC), спинно-оптический PC, опсоклонус миоклонус синдром (OMS), паранеопластическую дегенерацию мозжечка, злокачественную анемию, полимиозит, первичный билиарный цирроз, ревматоидный артрит, саркоидоз, склеродермию, височный артериит/гигантоклеточный артериит и язвенный колит.
4. Применение по п.1, где воспалительное заболевание, необязательно установленное воспалительное заболевание, выбрано из группы, включающей ревматоидный артрит, остеоартрит, псориатический артрит, анкилозирующий спондилит, реактивный артрит, синдром Рейтера, подагру, псевдоподагру, расстройство осаждения пирофосфата кальция, рассеянный склероз, болезнь Лайма, ревматическую полимиалгию, системную красную волчанку, системный склероз, полиомиозит, дерматомиозит, синдром Шегрена, нодозный полиартериит, гранулематоз Вегенера, синдром Черга-Штраусса, атеросклеротическую болезнь сосудов, атеросклероз, окклюзионные болезни сосудов, ишемическую болезнь сердца, рестеноз в стенте сосудов, увеит, заболевания роговицы, ирит, иридоциклит, целиакию, колит, болезнь Крона, экзему, фибромиалгию, гломерулонефрит, интерстициальный цистит, полиартериит, полихондрит, псориаз, саркоидоз, склеродермию и васкулит.
5. Применение по п.1, где антитело или антигенсвязывающий фрагмент является химерным, гуманизированным, антиидиотипическим, одноцепочечным, бифункциональным или ко-специфическим.
6. Применение по п.1, где антитело или антигенсвязывающий фрагмент содержит:
(i) последовательность, изложенную в п.1, подпункте (i), где антитело или антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область легкой цепи, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1;
(ii) последовательность, изложенную в п.1, подпункте (ii), где антитело или антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область легкой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 3, где необязательно
(a) остатки в положениях 3, 4, 9, 24, 32, 41, 47, 50, 55, 71 и 74 аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 3 представляют собой Q, L, S, R, A, G, L, D, E, F и А соответственно или
(b) остатки 3, 4, 9, 24, 32, 41, 47, 50, 55, 71 и 74 аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 3 представляют собой R, M, F, W, Y, A, F, Y, Q, Y и Т соответственно;
(iii) последовательность, изложенную в п.1, подпункте (i), где антитело или антигенсвязывающий фрагмент содержит легкую цепь, имеющую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 5;
(iv) последовательность, изложенную в п.1, подпункте (i), где антитело или антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 2;
(v) последовательность, изложенную в п.1, подпункте (ii), где антитело или антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 4;
(vi) последовательность, изложенную в п.1, подпункте (i), где антитело или антигенсвязывающий фрагмент содержит тяжелую цепь, имеющую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 6;
(vii) последовательность, изложенную в п.1, подпункте (i), где антитело или антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область легкой цепи, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, и вариабельную область тяжелой цепи, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2;
(viii) последовательность, изложенную в п.1, подпункте (i), где антитело или антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область легкой цепи, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3, и вариабельную область тяжелой цепи, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4; или
(ix) последовательность, изложенную в п.1, подпункте (i), где антитело или антигенсвязывающий фрагмент содержит легкую цепь, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5, и тяжелую цепь, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6.
7. Применение по любому из пп.1-6, где антитело или антигенсвязывающий фрагмент напрямую или не напрямую конъюгировано с меткой, цитотоксическим агентом, терапевтическим агентом или иммуносупрессирующим агентом,
где указанная метка представляет собой хемилюминесцентную метку, парамагнитную метку, контрастный агент для МРТ, флуоресцентную метку, биолюминесцентную метку или радиоактивную метку, где дополнительно указанная парамагнитная метка представляет собой алюминий, марганец, платину, кислород, лантан, лютеций, скандий, иттрий или галлий; и
где цитотоксический агент представляет собой компонент, который ингибирует синтез ДНК, РНК или белка, радионуклид или белок, ингибирующий работу рибосом, выбранный из ²¹²Bi, ¹³¹I, ¹⁸⁸Re, виндезина, метотрексата, адриамицина, цисплатина, противовирусного белка лаконоса, экзотоксина А пвсевдомонад (Pseudomonas), рицина, дифтерийного токсина, цепи А рицина или цитотоксического фермента фосфолипазы.
8. Применение по п.1, где антитело или антигенсвязывающий фрагмент:
(i) нейтрализует опосредуемое KIR2DL1, KIR2DL2 и/или KIR2DL3 ингибирование цитотоксичности NK-клеток;
(ii) обладает аффинностью к KIR2DL1, KIR2DL2 и/или KIR2DL3 по меньшей мере от около 10⁴ до около 10¹⁰ М^-1, предпочтительно по меньшей мере от около 10⁷ до около 10⁹ М^-1;
(iii) связывается с KIR2DL1, KIR2DL2 и/или KIR2DL3 с константой диссоциации менее чем около 100 нМ;
(iv) вводят в виде монотерапии или
(v) вводят в комбинации со вторым терапевтическим агентом, необязательно выбранным из (а) агента, уменьшающего воспаление; (b) низкомолекулярного соединения; (с) DMARD, предпочтительно анти-TNF-альфа антитела, низкомолекулярного ингибитора тирозинкиназы или метотрексата (МТХ); и (d) агента, отличающегося от антитела IgG1 или IgG3 изотипа.
9. Применение по п.1, где антитело или антигенсвязывающий фрагмент вводят в фармацевтически приемлемой композиции, включающей эффективное количество анти-KIR2DL1, KIR2DL2 и/или KIR2DL3 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, где необязательно отсутствуют любые другие фармацевтически активные агенты.
10. Применение по п.1, где антитело или его антигенсвязывающий фрагмент
(i) предназначен для введения в количестве, приводящем к почти полному насыщению KIR2DL1, KIR2DL2 и/или KIR2DL3 на NK-клетках в течение по меньшей мере одной недели, по меньшей мере двух недель или по меньшей мере одного месяца; и/или
(ii) предназначен для введения несколько раз с частотой дозирования один раз в две недели, один раз в месяц, или один раз каждые два месяца, или в период времени более двух месяцев.
11. Применение по любому из пп.1-10, в котором антитело или его антигенсвязывающий фрагмент представляет собой антитело IgG2 или антитело IgG4.

---