(57) 1. Триспецифичная связывающая молекула, способная иммуноспецифично связывать три различных эпитопа, включающая:
(I) четыре различные полипептидные цепи, ковалентно связанные вместе в виде комплекса;
(II) антигенсвязывающий домен I, который способен иммуноспецифично связываться с эпитопом I, присутствующем на первом антигене, и антигенсвязывающий домен II, который способен иммуноспецифично связываться с эпитопом II на втором антигене;
(III) антигенсвязывающий домен III, который способен иммуноспецифично связываться с эпитопом III на третьем антигене; и
(IV) Fc-домен, где
(A) первая полипептидная цепь содержит по направлению от N-конца к С-концу
(VL_I домен)-(линкер 1)-(VH_II домен)-(линкер 2)-(домен, стимулирующий гетеродимеризацию)-(линкер 3)-(CH2-CH3-домен); или
(CH2-СН3-домен)-(линкер 4)-(VL_I домен)-(линкер 1)-(VH_II домен)-(линкер 2)-(домен, стимулирующий гетеродимеризацию); или
(цистеинсодержащий домен)-(CH2-CH3-домен)-(линкер 4)-(VL_I домен)-(линкер 1)-(VH_II домен)-(линкер 2)-(домен, стимулирующий гетеродимеризацию);
(B) вторая полипептидная цепь содержит по направлению от N-конца к С-концу
(VL_II домен)-(линкер 1)-(VH_I домен)-(линкер 2)-(домен, стимулирующий гетеродимеризацию);
(C) третья полипептидная цепь, которая включает по направлению от N-конца к С-концу
(VH_III домен)-(цистеинсодержащий домен)-(CH2-CH3-домен);
(D) четвертая полипептидная цепь, которая включает по направлению от N-конца к С-концу
(VL_III домен)-(цистеинсодержащий домен);
(E) VL_I домен представляет собой вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина, способный связывать эпитоп I, VH_I домен представляет собой вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина, способный связывать эпитоп I, VL_II домен представляет собой вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина, способный связывать эпитоп II, VH_II домен представляет собой вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина, способный связывать эпитоп II, VL_III домен представляет собой вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина, способный связывать эпитоп III, и VH_III домен представляет собой вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина, способный связывать эпитоп III;
(F) VL_I домен и VH_I домен ассоциируются с образованием антигенсвязывающего домена I, VL_II домен и VH_II домен ассоциируются с образованием антигенсвязывающего домена II, VL_III домен и VH_III домен ассоциируются с образованием антигенсвязывающего домена III, и CH2-CH3-домен первой полипептидной цепи и CH2-CH3-домен третьей полипептидной цепи ассоциируются с образованием Fc-домена; и
(G) первый, второй и третий антигены являются одинаковым антигеном или независимо одинаковы или отличны от других антигенов.
2. Триспецифичная связывающая молекула по п.1, в которой цистеинсодержащая полипептидная цепь выбирается из CH1-домена и/или шарнирного домена и цистеинсодержащий домен четвертой полипептидной цепи представляет собой CL-домен.
3. Триспецифичная связывающая молекула, способная иммуноспецифически связывать три различных эпитопа, включающая:
(I) три различные полипептидные цепи, ковалентно связанные вместе в виде комплекса;
(II) антигенсвязывающий домен I, который способен иммуноспецифично связываться с эпитопом I, присутствующим на первом антигене, и антигенсвязывающий домен II, который способен иммуноспецифично связываться с эпитопом II на втором антигене;
(III) антигенсвязывающий домен III, который способен иммуноспецифично связываться с эпитопом III на третьем антигене; и
(IV) Fc-домен, где
(A) первая полипептидная цепь содержит по направлению от N-конца к С-концу
(VL_I домен)-(линкер 1)-(VH_II домен)-(линкер 2)-(домен, стимулирующий гетеродимеризацию)-(линкер 3)-(CH2-CH3-домен); или
(CH2-СН3-домен)-(линкер 4)-(VL_I домен)-(линкер 1)-(VH_II домен)-(линкер 2)-(домен, стимулирующий гетеродимеризацию); или
(цистеинсодержащий домен)-(CH2-CH3-домен)-(линкер 4)-(VL_I домен)-(линкер 1)-(VH_II домен)-(линкер 2)-(домен, стимулирующий гетеродимеризацию);
(B) вторая полипептидная цепь содержит по направлению от N-конца к С-концу
(VL_II домен)-(линкер 1)-(VH_I домен)-(линкер 2)-(домен, стимулирующий гетеродимеризацию);
(C) третья полипептидная цепь, которая включает по направлению от N-конца к С-концу
(VL_III домен)-(гибкий линкер)-(VH_III домен)-(цистеинсодержащий домен)-(CH2-CH3-домен); или
(цистеинсодержащий домен 1)-(VL_III домен)-(гибкий линкер)-(VH_III домен)-(цистеинсодержащий домен 2)-(цистеинсодержащий домен)-(CH2-CH3-домен);
(D) VL_I домен представляет собой вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина, способного связывать эпитоп I, VH_I домен представляет собой вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина, способного связывать эпитоп I, VL_II домен представляет собой вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина, способного связывать эпитоп II, VH_II домен представляет собой вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина, способного связывать эпитоп II, VL_III домен представляет собой вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина, способного связывать эпитоп III, и VH_III домен представляет собой вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина, способного связывать эпитоп III;
(E) VL_I домен и VH_I домен ассоциируются с образованием антигенсвязывающего домена I, VL_II домен и VH_II домен ассоциируются с образованием антигенсвязывающего домена II, VL_III домен и VH_III домен ассоциируются с образованием антигенсвязывающего домена III, и CH2-CH3-домен первой полипептидной цепи и CH2-CH3-домен третьей полипептидной цепи ассоциируются с образованием Fc-домена; и
(F) первый, второй и третий антигены являются одинаковым антигеном или независимо одинаковы или отличны от других антигенов.
4. Триспецифичная связывающая молекула по п.3, в которой цистеинсодержащий домен 1 третьей полипептидной цепи представляет собой CL-домен и цистеинсодержащий домен 2 третьей полипептидной цепи выбирают из CH1-домена и/или шарнирного домена.
5. Триспецифичная связывающая молекула, способная иммуноспецифически связывать три различных эпитопа, включающая:
(I) четыре различные полипептидные цепи, ковалентно связанные вместе в виде комплекса;
(II) антигенсвязывающий домен I, который способен иммуноспецифично связываться с эпитопом I, присутствующим на первом антигене, и антигенсвязывающий домен II, который способен иммуноспецифично связываться с эпитопом II на втором антигене;
(III) связывающий домен рецепторного типа и
(IV) Fc-домен, где
(A) первая полипептидная цепь содержит по направлению от N-конца к С-концу
(VL_I домен)-(линкер 1)-(VH_II домен)-(линкер 2)-(домен, стимулирующий гетеродимеризацию)-(линкер 3)-(CH2-CH3-домен); или
(CH2-СН3-домен)-(линкер 4)-(VL_I домен)-(линкер 1)-(VH_II домен)-(линкер 2)-(домен, стимулирующий гетеродимеризацию); или
(цистеинсодержащий домен)-(CH2-СН3-домен)-(линкер 4)-(VL_I домен)-(линкер 1)-(VH_II домен)-(линкер 2)-(домен, стимулирующий гетеродимеризацию);
(B) вторая полипептидная цепь содержит по направлению от N-конца к С-концу
(VL_II домен)-(линкер 1)-(VH_I домен)-(линкер 2)-(домен, стимулирующий гетеродимеризацию);
(C) третья полипептидная цепь, которая включает по направлению от N-конца к С-концу
(первый полипептид связывающего домена рецепторного типа)-(цистеинсодержащий домен)-(CH2-CH3-домен);
(D) четвертая цепь включает по направлению от N-конца к С-концу
(второй полипептид связывающего домена рецепторного типа)-(цистеинсодержащий домен);
(E) VL_I домен представляет собой вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина, способного связывать эпитоп I, VH_I домен представляет собой вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина, способного связывать эпитоп I, VL_II домен представляет собой вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина, способного связывать эпитоп II, VH_II домен представляет собой вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина, способного связывать эпитоп II;
(F) VL_I домен и VH_I домен ассоциируются с образованием антигенсвязывающего домена I, VL_II домен и VH_II домен ассоциируются с образованием антигенсвязывающего домена II, первый полипептид связывающего домена рецепторного типа и второй полипетид связывающего домена рецепторного типа ассоциируются с образованием связывающего домена рецепторного типа и CH2-СН3-домен первой полипептидной цепи и CH2-СН3-домен третьей полипептидной цепи ассоциируются с образованием Fc-домена; и
(G) первый, второй и третий антигены являются одинаковым антигеном или независимо одинаковы или отличны от других антигенов.
6. Триспецифичная связывающая молекула по любому из пп.1, 2 и 5, в которой (i) первая полипептидная цепь и вторая полипептидная цепь ковалентно связаны друг с другом; (ii) первая полипептидная цепь и третья полипептидная цепь ковалентно связаны друг с другом; и (iii) третья полипептидная цепь и четвертая полипептидная цепь ковалентно связаны друг с другом.
7. Триспецифичная связывающая молекула по любому из пп.1-6, в которой линкер 2 включает остаток цистеина, или домен, стимулирующий гетеродимеризацию, включает остаток цистеина, или линкер 2 включает остаток цистеина и домен, стимулирующий гетеродимеризацию, включает остаток цистеина.
8. Триспецифичная связывающая молекула по любому из пп.1-7, в которой CH2-CH3-домен первой полипептидной цепи представляет собой несущий выпуклость CH2-CH3-домен и CH2-CH3-домен третьей полипептидной цепи представляет собой CH2-СН3-домен, несущий углубление; или CH2-CH3-домен третьей полипептидной цепи представляет собой несущий выпуклость CH2-CH3-домен и CH2-CH3-домен первой полипептидной цепи представляет собой CH2-CH3-домен, несущий углубление.
9. Триспецифичная связывающая молекула по любому из пп.1-8, в которой CH2-CH3-домен первой полипептидной цепи и третьей полипептидной цепи содержат по меньшей мере одну аминокислотную замену по отношению к последовательности SEQ ID NO: 6 таким образом, что Fc-домен, образованный при их объединении, демонстрирует видоизмененную FcgR-опосредованную эффекторную функцию.
10. Триспецифичная связывающая молекула по любому из пп.1-9, в которой
домен, содействующий гетеродимеризации, на первой полипептидной цепи является E-спиральным доменом, а домен, содействующий гетеродимеризации, на второй полипептидной цепи является K-спиральным доменом; или
домен, содействующий гетеродимеризации, на первой полипептидной цепи является K-спиральным доменом, а домен, содействующий гетеродимеризации, на второй полипептидной цепи является E-спиральным доменом.
11. Триспецифичная связывающая молекула по любому из пп.1-10, в которой
линкер 1 включает последовательность SEQ ID NO: 1;
линкер 2 включает последовательность SEQ ID NO: 2 или 131;
домен, стимулирующий гетеродимеризацию, включает последовательность SEQ ID NO: 3, 4, 115 или 116;
линкер 3 включает последовательность SEQ ID NO: 5 или GGG;
линкер 4 включает последовательность SEQ ID NO: 15, 16, 131 или 132 или GGG;
CH2-СН3-домен включает последовательность SEQ ID NO: 7 или 8;
CH1-шарнирный домен включает последовательность SEQ ID NO: 9 или 10;
цистеинсодержащий домен включает последовательность SEQ ID NO: 2, 5, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 127, 128, 129, 130 или 133; или
комбинацию вышеуказанного.
12. Триспецифичная связывающая молекула по п.11, в которой домен, стимулирующий гетеродимеризацию, из SEQ ID NO: 115 или 116 присутствует, когда линкер 2 содержит последовательность SEQ ID NO: 131, или домен, стимулирующий гетеродимеризацию, из SEQ ID NO: 3, 4, 115 или 116 присутствует, когда линкер 2 содержит последовательность SEQ ID NO: 2.
13. Триспецифичная связывающая молекула по любому из пп.1-12, в которой один из эпитопа I, эпитопа II или эпитопа III представляет собой эпитоп
эффекторной клетки, выбранный из числа CD2, CD3, CD16, CD19, CD20, CD22, CD32B, CD64, В-клеточного рецептора (BCR), Т-клеточного рецептора (TCR) или NKG2D-рецептора; или
CD8; или
антигена, ассоциированного с заболеванием.
14. Триспецифичная связывающая молекула по любому из пп.1-13, в которой
(A) эпитоп I, эпитоп II и эпитоп III представляют собой, соответственно, эпитоп CD3, эпитоп CD8 и эпитоп антигена, ассоциированного с заболеванием;
(B) эпитоп I, эпитоп II и эпитоп III представляют собой, соответственно, эпитоп CD3, эпитоп антигена, ассоциированного с заболеванием, и эпитоп CD8;
(C) эпитоп I, эпитоп II и эпитоп III представляют собой, соответственно, эпитоп CD8, эпитоп CD3 и эпитоп антигена, ассоциированного с заболеванием;
(D) эпитоп I, эпитоп II и эпитоп III представляют собой, соответственно, эпитоп CD8, эпитоп антигена, ассоциированного с заболеванием, и эпитоп CD3;
(E) эпитоп I, эпитоп II и эпитоп III представляют собой, соответственно, эпитоп антигена, ассоциированного с заболеванием, эпитоп CD3 и эпитоп CD8; или
(F) эпитоп I, эпитоп II и эпитоп III представляют собой, соответственно, эпитоп антигена, ассоциированного с заболеванием, эпитоп CD8 и эпитоп CD3.
15. Триспецифичная связывающая молекула по п.13 или 14, в которой один из эпитопа I, эпитопа II или эпитопа III представляет собой эпитоп CD3 и антигенсвязывающий домен, который способен иммуноспецифически связывать эпитоп CD3, включает шесть CDR SEQ ID NO: 17 и 18; 19 и 20; 21 и 22; 23 и 25; 22 и 25; 26 и 27; 26 и 28 или 101 и 102; или содержит одну или более SEQ ID NO: 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 101 и 102.
16. Триспецифичная связывающая молекула по любому из пп.13-15, в которой один из эпитопа I, эпитопа II или эпитопа III представляет собой эпитоп CD8 и антигенсвязывающий домен, который способен иммуноспецифически связывать эпитоп CD8, включает шесть CDR SEQ ID NO: 29 и 30; или 31 и 32; или включает одну или несколько из числа SEQ ID NO: 29, 30, 31 и 32.
17. Триспецифичная связывающая молекула по любому из пп.13-16, в которой ассоциированный с заболеванием антиген представляет собой антиген злокачественной опухоли, который расположен на поверхности клетки злокачественной опухоли.
18. Триспецифичная связывающая молекула по п.17, в которой антиген представляет собой антиген 19.9 рака толстой кишки; антиген муцина 4.2 рака желудка; антиген A33 колоректального рака A33; ADAM-9; онкофетальный AFP антиген-a-фетопротеин; ALCAM; B7-H3; BAGE; b-катенин; СА125; карбоксипептидазу М; В1; CD5; CD19; CD20; CD22; CD23; CD25; CD27; CD28; CD30; CD33; CD36; CD40/CD154; CD45; CD56; CD46; CD52; CD79a/CD79b; CD103; CD317; CDK4; СЕА карциноэмбриональный антиген; СЕАСАМ5 и СЕАСАМ6; СО-43 (группа крови Leb) и СО-514 (группа крови Lea); CTLA-1 и CTLA-4; цитокератин 8; DR5; Е1 серии (группа крови В); рецептор эпидермального фактора роста EGF-R; рецепторы эфрина (и в частности, EphA2); Erb (ErbB1; ErbB3; ErbB4); антиген аденокарциномы легкого F3; антиген FC10.2; GAGE (GAGE-1; GAGE-2); GD2/GD3/GD49/GM2/GM3; GICA 19-9; gp37 (Т-клеточный антиген лейкоза человека); gp75 (антиген меланомы); gp100; HER-2/neu; антиген CD20 В-клеточной лимфомы человека; антиген жировых глобул человеческого молока; вирус папилломы человека-E6/вирус папилломы человека-Е7; HMW-MAA (антиген меланомы высокой молекулярной массы); I антиген (дифференцировочный антиген); I(Ма), обнаруженный при аденокарциномах желудка; интегрин a-V-b-6, интегрин b6 (ITGB6); рецептор a2 интерлейкина-13 (IL13Ra2); JAM-3; KID3; KID31; антиген KS 1/4 пан-карциномы; KSA (17-1A); антигены L6 и L20 карциномы легкого человека; LEA; LUCA-2; M1:22:25:8, M18, М39; MAGE (MAGE-1; MAGE-3); MART; Myl, MUC-1; MUM-1; N-ацетилглюкозаминилтрансферазу; неогликопротеин; NS-10; OFA-1 и OFA-2; онкостатин М (рецептор онкостатина b); r15; PSA (простат-специфический антиген); PSMA; РЕМА (антиген полиморфного эпителиального муцина); PIPA; фосфат простатической кислоты; R24; ROR1; SSEA-1, SSEA-3 и SSEA-4; sTn; пептид, выделенный из Т-клеточного рецептора; Т₅А₇; тканевые антигены 37; TAG-72; TL5 (группа крови А); TNF-рецептор (TNF-a рецептор, TNF-b рецептор или TNF-g рецептор); TRA-1-85 (группа крови Н); рецептор трансферрина; TSTA опухолеспецифичный трансплантационный антиген; VEGF-R, Y-гаптен, Le^y или 5Т4.
19. Триспецифичная связывающая молекула по п.18, в которой один из эпитопа I, эпитопа II или эпитопа III представляет собой эпитоп B7-H3, A33, 5Т4 или ROR1 и антигенсвязывающий домен, который способен иммуноспецифически связывать эпитоп B7-H3, A33, 5Т4 или ROR1, включает шесть CDR SEQ ID NO: 39 и 40; 41 и 42; 43 и 44; 45 и 46; 47 и 48; 49 и 50; 51 и 52; 53 и 54; 55 и 56 или 57 и 58; или включает одну или несколько из числа SEQ ID NO: 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57 и 58.
20. Триспецифичная связывающая молекула по любому из пп.13-16, отличающаяся тем, что ассоциированный с заболеванием антиген представляет собой антиген патогена, который расположен на поверхности патогена или инфицированной патогеном клетки.
21. Триспецифичная связывающая молекула по п.8, в которой патоген представляет собой вирус, и/или патоген представляет собой вирус иммунодифицита человека (HIV) или респираторный синцитиальный вирус (RSV), и/или антиген патогена представляет собой HIV gp41, HIV gp120 или RSV гликопротеин F.
22. Триспецифичная связывающая молекула по п.21, в которой один из числа эпитопа I, эпитопа II или эпитопа III представляет собой эпитоп HIV gp41, HIV gp120 или RSV гликопротеина F и антигенсвязывающий домен, который способен иммуноспецифически связывать эпитоп HTV gp41, HIV gp120 или RSV гликопротеина F, включает шесть CDR SEQ ID NO: 33 и 34; 35 и 36 или 37 и 38; или включает одну или несколько из числа SEQ ID NO: 33, 34, 35, 36, 37 и 38.
23. Триспецифичная связывающая молекула по любому из пп.20-22, в которой эпитоп I представляет собой эпитоп HIV, эпитоп II представляет собой эпитоп CD3 и эпитоп III представляет собой эпитоп CD8, или эпитоп I представляет собой эпитоп CD3, эпитоп II представляет собой эпитоп HIV, эпитоп III представляет собой эпитоп CD8.
24. Триспецифичная связывающая молекула, включающая четыре полипептидные цепи, в которой
(A) первая полипептидная цепь, которая включает по направлению от N-конца к С-концу
(1) вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина, способный связываться с эпитопом антигена 5Т4 (VL_I);
(2) вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина, способный связываться с эпитопом антигена CD3 (VH_II);
(3) первый цистеинсодержащий домен;
(4) домен, стимулирующий гетеродимеризацию;
(5) второй цистеинсодержащий домен и
(6) CH2 и CH3-домены IgG;
(B) вторая полипептидная цепь, которая включает по направлению от N-конца к С-концу
(1) вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина, способный связываться с эпитопом антигена CD3 (VL_II);
(2) вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина, способный связываться с эпитопом антигена 5Т4 (VH_I);
(3) цистеинсодержащий домен и
(4) домен, стимулирующий гетеродимеризацию, где домен, стимулирующий гетеродимеризацию, второй полипептидной цепи комплементарен домену, стимулирующему гетеродимеризацию, первой полипептидной цепи;
(C) третья полипептидная цепь включает по направлению от N-конца к С-концу
(1) вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина, способный связываться с эпитопом антигена CD8 (VH_III);
(2)CH1-домен;
(3) CH2-СН3-домен IgG; и
(D) четвертая полипептидная цепь включает по направлению от N-конца к С-концу
(1) вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина, способный связываться с эпитопом антигена CD8 (VL_III); и
(2) цистеинсодержащий константный домен легкой цепи (CL); где
(i) VL_I и VH_I домены ассоциируются с образованием домена, способного связывать эпитоп 5Т4-антигена;
(ii) VL_II и VH_II домены ассоциируются с образованием домена, способного связывать эпитоп CD3-антигена;
(iii) VL_III и VH_III домены ассоциируются с образованием домена, способного связывать эпитоп CD8-антигена;
(iv) CH2-CH3-домен первой полипептидной цепи и CH2-СН3-домен третьей полипептидной цепи ассоциируются с образованием Fc-домена;
(v) первая и вторая полипептидные цепи ковалентно связаны друг с другом;
(vi) первая и третья полипептидные цепи ковалентно связаны друг с другом;
(vii) третья и четвертая полипептидные цепи ковалентно связаны друг с другом.
25. Триспецифичная связывающая молекула по п.24, в которой
VL_I включает CDR_L1, имеющий последовательность RASQGISNYLA, CDR_L2, имеющий последовательность RANRLQS, и CDR_L3, имеющий последовательность LQYDDFPWT; и
VH_I включает CDR_H1, имеющий последовательность GYTFTSFWMH, CDR_H2, имеющий последовательность RIDPNRGGTEYNEKAKS, и CDR_H3, имеющий последовательность GNPYYPMDY.
26. Триспецифичная связывающая молекула по п.24 или 25, в которой
VL_I включает последовательность SEQ ID NO: 47 и VH_I включает последовательность SEQ ID NO: 48;
VL_II включает последовательность SEQ ID NO: 26 и VH_II включает последовательность SEQ ID NO: 27 или 28;
VL_III включает последовательность SEQ ID NO: 29 и VH_III включает последовательность SEQ ID NO: 30;
VL_III включает последовательность SEQ ID NO: 31 и VH_III включает последовательность SEQ ID NO: 32;
или комбинацию вышеуказанного.
27. Триспецифичная связывающая молекула по любому из пп.24-26, отличающаяся тем, что
первый цистеинсодержащий домен первой полипептидной цепи включает последовательность SEQ ID NO: 2, а домен, стимулирующий гетеродимеризацию, первой полипептидной цепи включает последовательность SEQ ID NO: 3;
первый цистеинсодержащий домен второй полипептидной цепи включает последовательность SEQ ID NO: 2, а домен, стимулирующий гетеродимеризацию, первой полипептидной цепи включает последовательность SEQ ID NO: 4;
CH1-домен третьей полипептидной цепи включает последовательность SEQ ID NO: 9;
CL-домен четвертой полипептидной цепи включает последовательность SEQ ID NO: 13;
CH2- и CH3-домены первой полипептидной цепи и третьей полипептидной цепи отличаются друг от друга, и каждый имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7 или SEQ ID NO: 8;
или комбинацию вышеуказанного.
28. Триспецифичная связывающая молекула по любому из пп.24-27, в которой
первая полипептидная цепь включает последовательность SEQ ID NO: 103;
вторая полипептидная цепь включает последовательность SEQ ID NO: 104;
третья полипептидная цепь включает последовательность SEQ ID NO: 105;
четвертая полипептидная цепь включает последовательность SEQ ID NO: 106.
29. Триспецифическая связывающая молекула по п.15, включающая:
(A) вариабельный домен легкой цепи, включающий CDR_L1, имеющий последовательность RSSTGAVTTSNYAN, CDR_L2, имеющий последовательность ALWYSNLWV; и
(B) вариабельный домен тяжелой цепи, включающий CDR_H1, имеющий последовательность GFTFSTYAMN, CDR_H2, имеющий последовательность RIRSKYNNYATYYADSVKG, и CDR_H3, имеющий последовательность HKNFGNSYVTWFAY.
30. Триспецифическая связывающая молекула по п.29, в которой вариабельный домен легкой цепи включает последовательность SEQ ID NO: 101, а вариабельный домен тяжелой цепи включает последовательность SEQ ID NO: 102.
31. Триспецифическая связывающая молекула по п.19, включающая:
(A) вариабельный домен легкой цепи, включающий CDR_L1, имеющий последовательность RASQGISNYLA, CDR_L2, имеющий последовательность RANRLQS, и CDR_L3, имеющий последовательность LQYDDFPWT; или CDR_L1, имеющий последовательность RSSQSIVYSNGNTYLE, CDR_L2, имеющий последовательность KVSNRFS, и CDR_L3, имеющий последовательность FQGSHVPFT; и
(B) вариабельный домен легкой цепи, включающий CDR_L1, имеющий последовательность GYTFTSFWMH, CDR_L2, имеющий последовательность RIDPNRGGTEYNEKAKS, и CDR_L3, имеющий последовательность GNPYYPMDY; или CDR_L1, имеющий последовательность GYTFTSYWIT, CDR_L2, имеющий последовательность DIYPGSGRANYNEKFKS, и CDR_L3, имеющий последовательность YGPLFTTVVDPNSYAMDY.
32. Триспецифическая связывающая молекула п.31, в которой вариабельный домен легкой цепи включает последовательность SEQ ID NO: 47; вариабельный домен тяжелой цепи включает последовательность SEQ ID NO: 48; вариабельный домен легкой цепи включает последовательность SEQ ID NO: 49 и вариабельный домен тяжелой цепи включает последовательность SEQ ID NO: 50.
33. Триспецифическая связывающая молекула по п.19, включающая:
(A) вариабельный домен легкой цепи, включающий CDR_L1, имеющий последовательность SEQ ID NO: 117, CDR_L2, имеющий последовательность SEQ ID NO: 118, и CDR_L3, имеющий последовательность SEQ ID NO: 119; и
(B) вариабельный домен тяжелой цепи, включающий CDR_L1, имеющий последовательность SEQ ID NO: 120, CDR_L2, имеющий последовательность SEQ ID NO: 121, и CDR_L3, имеющий последовательность SEQ ID NO: 122.
34. Триспецифическая связывающая молекула по п.33, в которой вариабельный домен легкой цепи включает последовательность SEQ ID NO: 51 и вариабельный домен тяжелой цепи включает последовательность SEQ ID NO: 52.
35. Композиция нуклеиновой кислоты для лечения злокачественной опухоли или патогенной инфекции, включающая полинуклеотиды, которые кодируют полипептидные цепи триспецифичной молекулы по любому из пп.1-34.
36. Фармацевтическая композиция для лечения злокачественной опухоли или патогенной инфекции, включающая триспецифичную связывающую молекулу по любому из пп.1-34 и и фармацевтически приемлемый носитель, вспомогательное вещество или разбавитель.
37. Применение триспецифичной связывающей молекулы по любому из пп.1-34 в качестве медикамента для лечения злокачественной опухоли или патогенной инфекции.
38. Применение композиции по п.36 в качестве медикамента для лечения злокачественной опухоли или патогенной инфекции.
39. Применение триспецифичной связывающей молекулы по любому из пп.1-34 для изготовления медикамента для лечения злокачественной опухоли или патогенной инфекции.
40. Применение композиции по п.36 для изготовления медикамента для лечения злокачественной опухоли или патогенной инфекции.

---