Евразийский сервер публикаций

Евразийский патент № 047272

Библиографические данные
(11)047272 (13) B1
(21)202391135

[ A ] [ B ] [ C ] [ D ] [ E ] [ F ] [ G ] [ H ]

Текущий раздел:


Документ опубликован 2024.06.26
Текущий бюллетень: 2024-06
Все публикации: 047272
Реестр евразийского патента: 047272

(22)2021.10.15
(51) G01N 31/16(2006.01)
(43)A1 2023.06.13 Бюллетень № 06 тит.лист, описание
(45)B1 2024.06.26 Бюллетень № 06 тит.лист, описание
(31)63/093,124; 63/144,744; 63/251,465
(32)2020.10.16; 2021.02.02; 2021.10.01
(33)US; US; US
(86)US2021/055116
(87)2022/081938 2022.04.21
(71)ЭМДЖЕН ИНК. (US)
(72)Сото Роберт Джозеф (US)
(73)ЭМДЖЕН ИНК. (US)
(74)Медведев В.Н. (RU)
(54)СПОСОБЫ ТИТРОВАНИЯ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ ПОЛИВИНИЛСУЛЬФОНАТА (PVS) В БУФЕРАХ
Формула
(57) 1. Способ титрования для выявления полианионного ингибитора ферментов в жидкости, включающий:
(a) приведение в контакт жидкости с известным количеством поликатионного соединения, где жидкость в качестве буфера содержит 2-(N-морфолино)этансульфоновую кислоту (MES);
(b) приведение в контакт материала из (а) с индикаторным соединением, где индикаторное соединение проявляет измененное свойство в свободной форме по сравнению с его формой при нахождении в комплексе с поликатионным соединением и где достаточное количество индикаторного соединения добавляют для выявления свободной формы индикаторного соединения при отсутствии комплексообразования;
(c) повторение (а) и
(d) выявление свободной формы индикаторного соединения в точке титрования, за счет чего выявляют полианионный ингибитор ферментов.
2. Способ по п.1, где получают множество образцов буфера, при этом каждый образец буфера характеризуется разной концентрацией буферного соединения, за счет чего получают серию разбавлений буфера.
3. Способ по любому из пп.1, 2, где предел выявления поливинилсульфоната (PVS) составляет 1,5 части на миллион буферного раствора, 0,25 части на миллион буферного раствора или 0,16 мкг/мл буферного раствора.
4. Способ по любому из пп.1-3, где конечная точка титрования представляет собой точку, где поглощающая способность образца находится посередине между начальной поглощающей способностью образца и установившейся поглощающей способностью или представляет собой локальный максимум первой производной кривой поглощающей способности образца.
5. Способ по любому из пп.1-4, где свободную форму индикаторного соединения выявляют электрохимическим или спектроскопическим путем.
6. Способ по п.5, где выявление с помощью спектроскопии включает колориметрическое выявление, фотометрическое выявление, флуорометрическое выявление, рамановскую или FTIR-спектроскопию.
7. Способ по любому из пп.1-6, где полианионный ингибитор ферментов представляет собой поливинилсульфонат (PVS) или его производное.
8. Способ по п.7, где полианионный ингибитор ферментов представляет собой поливинилсульфонат (PVS).
9. Способ по любому из пп.1-8, где поликатионное соединение представляет собой pH-независимое поликатионное соединение или pH-зависимое поликатионное соединение.
10. Способ по п.9, где pH-независимое поликатионное соединение представляет собой полимер на основе четвертичного аммония.
11. Способ по п.9, где pH-зависимое поликатионное соединение представляет собой полиамин.
12. Способ по п.10, где полимер на основе четвертичного аммония представляет собой бромид гексадиметрина (HDBr), хлорид поли(диаллил)диметиламмония (pDADMAC) или метилгликольхитозан.
13. Способ по п.10, где полимер на основе четвертичного аммония представляет собой бромид гексадиметрина (HDBr).
14. Способ по п.13, где к жидкости добавляют несколько аликвот HDBr, в совокупности составляющих по меньшей мере 0,1% от общего объема жидкости.
15. Способ по п.12, где полимер на основе четвертичного аммония представляет собой хлорид поли(диаллил)диметиламмония (pDADMAC).
16. Способ по любому из пп.1-15, где индикаторное соединение представляет собой краситель.
17. Способ по п.16, где краситель представляет собой азокраситель.
18. Способ по п.17, где азокраситель представляет собой эриохром черный Т (ЕСВТ), эриохром сине-черный R (Calcon) или натриевую соль сульфоназо.
19. Способ по п.18, где азокраситель представляет собой эриохром черный Т (ЕСВТ).
20. Способ по п.19, где 0,8-1,7 мкг ЕСВТ добавляют на 1 мл жидкости, содержащей известное количество поликатионного соединения.
21. Способ по любому из пп.1-20, дополнительно включающий определение концентрации полианионного ингибитора ферментов из количества поликатионного соединения, необходимого для титрования полианионного ингибитора ферментов.
22. Способ по п.21, дополнительно включающий сравнение результатов с результатами, полученными с помощью стандартной кривой полианионного ингибитора ферментов, за счет чего определяют концентрацию полианионного ингибитора ферментов в жидкости.
23. Способ по любому из пп.1-22, где способ является автоматизированным.
24. Автоматизированный способ титрования для выявления полианионного ингибитора ферментов в жидкости, включающий:
(a) объединение жидкости с индикаторным соединением, где жидкость в качестве буфера содержит 2-(N-морфолино)этансульфоновую кислоту (MES), где индикаторное соединение проявляет измененное свойство в свободной форме по сравнению с его формой при нахождении в комплексе с поликатионным соединением и где достаточное количество индикаторного соединения добавляют для выявления свободной формы индикаторного соединения при отсутствии комплексообразования;
(b) приведение в контакт материала из (а) с известным количеством поликатионного соединения;
(c) измерение поглощающей способности жидкости, содержащей индикаторное соединение и поликатионное соединение, с применением прибора для титрования;
(d) автоматическое повторение (b) и (с), где выявление свободной формы индикаторного соединения обеспечивает выявление полианионного ингибитора ферментов.
25. Способ по п.24, где прибор для титрования содержит насос, такой как шприцевой насос или дозирующий привод с интеллектуальным управлением, в сообщении по текучей среде с поликатионным соединением и жидкостью.

Загрузка данных...