Евразийский сервер публикаций
Евразийская заявка № 202390485
Библиографические данные | ||||||||||||||||||||||||
| ||||||||||||||||||||||||
Реферат [ENG] | ||||||||||||||||||||||||
(57) Изобретение относится к способу очистки белка ИФР-1, включающему: a) денатурацию белка с помощью солюбилизирующего буфера, содержащего 7-8 М мочевины и 2-10 мМ дитиотреитола, с рН не менее 12,5; b) фолдинг белка; c) хроматографическую очистку; d) смену буферного раствора; причем стадия фолдинга (b) включает: b1) смешивание полученной на стадии (a) смеси с фолдирующим буфером в соотношении 1:2-1:3 об.:об., причем фолдирующий буфер содержит воду, стабилизатор, представляющий собой сахар или полиол, и пропанол; и с окислительно-восстановительным компонентом, представляющим собой цистеин и цистамин, который содержится в указанном фолдирующем буфере или добавляется отдельно; и инкубирование полученной смеси в течение не менее 5 суток; b2) разведение полученной на стадии (b1) смеси ацетатным буфером в соотношении 1:3-1:3,5 об.:об. таким образом, чтобы рН составлял 5,4-5,7; b3) добавление перекиси водорода к полученной на стадии (b2) смеси в концентрации 0,03-1,96 ммоль/л, инкубирование в течение не менее 30 мин; b4) центрифугирование полученной смеси и фильтрацию супернатанта, который затем направляют на стадию (c); а также к способу получения ИФР-1, включающему указанный выше способ очистки. Предложенным способом обеспечивается, в частности, больший выход продукта и больший выход правильно уложенных, т.е. активных форм ИФР-1.
Загрузка данных...
| ||||||||||||||||||||||||