(57) Изобретение относится к способу конструирования нуклеиновых кислот в условиях in vitro. Изобретение дополнительно относится к in vitro конструированию вирусных геномов и к улучшению вирусных свойств с помощью геномной инженерии in vitro вирусных геномов. В частности, изобретение относится к расщеплению вирусного генома в условиях in vitro с использованием РНК-направляемой Cas9, сборки рекомбинантного генома путем вставки фрагмента ДНК или РНК в расщепленный вирусный геном и трансформации клетки-хозяина рекомбинантным геномом. Данный способ также относится к конструированию in vitro для исправления ошибок в нуклеиновых кислотах.