(57) 1. Антигенная мультивалентная молекулярная конструкция для получения вакцины для защиты субъекта от инфекций, вызванных по меньшей мере одной из энтеропатогенных бактерий, выбранных из Clostridium difficile, Salmonella typhi, Escherichia coli, Vibrio cholerae, Salmonella enteritidis, Shigella flexneri, Shigella sonnei, Salmonella paratyphi A, Salmonella dysenteriae, Salmonella cholerasuis или их комбинации, включающая в себя основные структурные единицы, содержащие зависимый от присутствия Т-хелперов инактивированный белок-носитель, выбранный из энтеротоксоида А или цитотоксоида В из Clostridium difficile, ковалентно связанный с тремя углеводными структурами с разной серологической специфичностью, выбранными из капсульных полисахаридов Salmonella typhi, Vibrio cholerae, Escherichia coli и Clostridium difficile или их комбинации, где каждая углеводная структура содержит по меньшей мере один из повторяющихся основных эпитопов, включающих в себя не менее пяти-двенадцати моносахаридных остатков, где по меньшей мере один моль белка-носителя связан по меньшей мере с одним молем каждой из трех углеводных структур или их молярной суммой.
2. Антигенная мультивалентная молекулярная конструкция по п.1, где указанные энтеротоксоид А или цитотоксоид В, происходящие из Clostridium difficile, инактивированы путем обработки формалином или с помощью технологии рекомбинантных ДНК.
3. Антигенная мультивалентная молекулярная конструкция по п.1 или 2, выбранная из
энтеротоксоида А, ковалентно связанного с капсульными полисахаридами Salmonella typhi, Vibrio cholerae и Escherichia coli;
цитотоксоида В, ковалентно связанного с капсульными полисахаридами Salmonella typhi, Vibrio cholerae и Escherichia coli.
4. Применение антигенной мультивалентной молекулярной конструкции по любому из предыдущих пунктов в вакцине для защиты субъекта от инфекций, вызванных по меньшей мере одной из энтеропатогенных бактерий, выбранных из Clostridium difficile, Salmonella typhi, Escherichia coli, Vibrio cholerae, Salmonella enteritidis, Shigella flexneri, Shigella sonnei, Salmonella paratyphi A, Salmonella dysenteriae, Salmonella cholerasuis или их комбинации.
5. Вакцинный состав для защиты субъекта от инфекций, вызванных по меньшей мере одной из энтеропатогенных бактерий, выбранных из Clostridium difficile, Salmonella typhi, Escherichia coli, Vibrio cholerae, Salmonella enteritidis, Shigella flexneri, Shigella sonnei, Salmonella paratyphi A, Salmonella dysenteriae, Salmonella cholerasuis или их комбинации, содержащий по меньшей мере одну антигенную мультивалентную молекулярную конструкцию по любому из пп.1-3 в физиологически приемлемой среде.
6. Вакцинный состав по п.5, дополнительно содержащий фармацевтически приемлемые адъювант или наполнители.
7. Вакцинный состав по п.5 или 6, где доза каждого антигена-носителя и/или переносимых антигенов находится в диапазоне от 0,1 до 100 мкг, при этом предпочтительно составляет от 1 до 10 мкг.
8. Вакцинный состав по п.6 или 7, где указанный адъювант выбран из неорганического адъюванта, выбранного из фосфата алюминия, гидроксида алюминия; органического адъюванта, выбранного из адъювантов на основе сквалена, таких как MF59, QF 21, Addavax, и биологического адъюванта, выбранного из монофосфорил-липида А и дикориномиколата трегалозы.
9. Вакцинный состав по любому из пп.6-8, где количество адъюванта находится в диапазоне 0,1-1 мг/доза, при этом предпочтительно составляет 0,5 мг/доза.
10. Вакцинный состав по любому из пп.5-9, причем указанный состав является подходящим для введения подкожным, внутримышечным, внутрикожным или чрескожным путем.
11. Применение вакцинного состава по любому из пп.5-10 в области медицины человека или ветеринарной медицины для защиты субъекта от системной и кишечной инфекций, вызванных по меньшей мере одной из энтеропатогенных бактерий, выбранных из Clostridium difficile, Salmonella typhi, Escherichia coli, Vibrio cholerae, Salmonella enteritidis, Shigella flexneri, Shigella sonnei, Salmonella paratyphi A, Salmonella dysenteriae, Salmonella cholerasuis, Klebsiella, Enterobacter или их комбинации.
12. Применение по п.11, где указанный субъект представляет собой человека.
13. Способ конъюгирования для получения антигенной мультивалентной молекулярной конструкции по любому из пп.1-3, который включает следующие стадии:
a) химической активации трех антигенно отличающихся углеводных структур, выбранных из капсульных полисахаридов Salmonella typhi, Vibrio cholerae, Escherichia coli и Clostridium difficile;
с обеспечением полифункциональности путем отщепления водорода от О посредством окисления и восстановительного аминирования с образованием восстановленных иминовых связей с алкилдиаминовым спейсером с последующей дериватизацией до активных сложных эфиров;
b) одновременного связывания трех углеводных структур на основе производных сложных эфиров с аминогруппами полифункционального белка-носителя энтеротоксоида А или цитотоксоида В из Clostridium difficile посредством образования амидных связей;
где по меньшей мере один моль белка-носителя вводят в реакцию по меньшей мере с одним молем каждой из указанных антигенно отличающихся углеводных структур или их молярной суммой.
14. Способ конъюгирования по п.13, где углеводные структуры являются химически активированными в их соответствующих производных диаминомасляной кислоты, а активные сложные эфиры представляют собой сукцинимидильные сложные эфиры.
15. Способ конъюгирования для получения антигенной мультивалентной молекулярной конструкции по любому из пп.1-3, который включает одновременное связывание аминогрупп полифункционального белка-носителя энтеротоксоида А или цитотоксоида В из Clostridium difficile с тремя антигенно отличающимися углеводными структурами, выбранными из капсульных полисахаридов Salmonella typhi, Vibrio cholera, Escherichia coli и Clostridium difficile;
посредством восстановительного аминирования с образованием восстановленной(восстановленных) иминовой связи(иминовых связей), причем такие углеводные структуры предварительно активируют с обеспечением полифункциональности, с молекулярными спейсерами или без них, путем отщепления водорода от О в смежных гидроксильных группах посредством окисления.
16. Способ конъюгирования по любому из пп.13-15, где углеводные структуры из стадии а) содержат по меньшей мере один из повторяющихся основных эпитопов, включающих в себя не менее пяти-двенадцати моносахаридных остатков, что оценивают путем определения молекулярной массы и ЯМР-спектроскопии, при этом оценивают антигенность указанных повторяющихся основных эпитопов по реакционной способности с типоспецифическими или группоспецифическими поликлональными или моноклональными антителами посредством определения их соответствующих значений MIC₅₀ (минимальной ингибиторной концентрации) при ингибировании их эталонной системы гомологичный полисахарид-антитело.

---