(21)	201990928 (13) A1	Разделы: A B C D E F G H
(22)	2017.10.16
(51)	C12Q 1/68 (2018.01)
(31)	1617491.4
(32)	2016.10.14
(33)	GB
(86)	PCT/GB2017/053128
(87)	WO 2018/069737 2018.04.19
(71)	РЕВОЛЮДЖЕН ЛИМИТЕД (GB)
(72)	Патсос Георгиос, Минтер Стефен Джон (GB)
(74)	Медведев В.Н. (RU)
(54)	АМПЛИФИКАЦИЯ НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ЭКЗОНУКЛЕАЗЫ И ЗАМЕЩЕНИЯ ЦЕПИ

(57) Представлен способ амплификации последовательности нуклеиновой кислоты. Способ включает предоставление смеси для амплификации, содержащей экзонуклеазу, способную к расщеплению цепи двухцепочечной молекулы нуклеиновой кислоты от 5'-конца к 3'-концу, полимеразу с замещением цепи, двухцепочечную молекулу нуклеиновой кислоты, содержащую первую и вторую цепи нуклеиновой кислоты, первый праймер нуклеиновой кислоты и нуклеотиды по ситуации для обеспечения амплификации первой последовательности нуклеиновой кислоты, подлежащей амплификации. Способ дополнительно включает проведение реакции амплификации в условиях, допускающих расщепление, экзонуклеазное расщепление и полимеризацию с замещением цепи, тем самым получая смесь продуктов, содержащую амплифицированное количество указанной первой последовательности нуклеиновой кислоты. Также представлен способ определения присутствия или количества целевой последовательности нуклеиновой кислоты в биологическом образце с использованием двухцепочечного зонда, имеющего флуорофор на одной цепи и его гаситель на другой, и с использованием денатурации и повторной гибридизации для того, чтобы обнаруживать мишень.