(11)	033027 (13) B1	Разделы: A B C E F G H
(21)	201500140
(22)	2013.07.11
(51)	A61K 39/145 (2006.01) C12N 7/00 (2006.01) A61P 31/04 (2006.01)
(31)	61/672,398
(32)	2012.07.17
(33)	US
(43)	2016.02.29
(86)	PCT/US2013/050000
(87)	WO 2014/014726 2014.01.23
(71)	(73) МЕРИАЛ, ИНК. (US)
(72)	Хаус Бенджамин М. (US)
(74)	Фелицына С.Б. (RU)
(54)	ОСЛАБЛЕННЫЕ ВАКЦИНЫ ОТ СВИНОГО ГРИППА И СПОСОБЫ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ

(57) 1. Ослабленный штамм вируса свиного гриппа, способный обеспечить безопасную и эффективную иммунную реакцию у свиньи против вирулентного штамма вируса свиного гриппа H3N2 или заболеваний, вызванных указанным вирусом свиного гриппа H3N2, включающий ген НА, кодирующий белок НА, содержащий пять дополнительных сайтов гликозилирования по сравнению с соответствующим исходным вирулентным штаммом, где исходный вирулентный штамм содержит ген НА, кодирующий белок НА, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18, и 5 сайтов гликозилирования представляют собой S71N, K90N, L173T, Р287Т и K294Т, причем нумерация аминокислотных замен основана на белке НА, кодируемом геном НА исходного вирулентного штамма, который имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18.

2. Ослабленный штамм по п.1, содержащий ген НА, кодирующий белок НА, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 22.

3. Ослабленный штамм по п.1, где исходным вирулентным штаммом является A/swine/North Carolina/3793/08 (H1N1), который содержит нуклеотидные последовательности: SEQ ID NO: 1, 3, 5, 9, 11, 13, 15 и 17.

4. Ослабленный штамм по п.2, где исходным вирулентным штаммом является A/swine/North Carolina/3793/08 (H1N1), который содержит нуклеотидные последовательности, кодирующие аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 2, 4, 6, 10, 12, 14, 16 и 18.

5. Ослабленный штамм по п.3, где исходным вирулентным штаммом является A/swine/North Carolina/3793/08 (H1N1), где указанные нуклеотидные последовательности кодируют аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 2, 4, 6, 10, 12, 14, 16 и 18.

6. Иммунологическая композиция для обеспечения безопасного и эффективного иммунного ответа у свиньи против вирулентного штамма вируса свиного гриппа H3N2 или заболеваний, вызванных указанным вирусом свиного гриппа H3N2, включающая штамм по п.1.

7. Иммунологическая композиция для обеспечения безопасного и эффективного иммунного ответа у свиньи против вирулентного свиного гриппа H3N2 или заболеваний, вызванных свиным гриппом H3N2, включающая штамм по п.2.

8. Композиция по п.6 или 7, дополнительно включающая фармацевтически или ветеринарно приемлемый носитель, разбавитель или наполнитель.

9. Композиция по п.8, дополнительно включающая по меньшей мере один дополнительный антиген, происходящий из другого патогена свиней, чем вирус свиного гриппа H3N2.

10. Композиция по п.9, где по меньшей мере один или несколько дополнительных антигенов способны вызвать у свиньи иммунную реакцию против Mycoplasma hyopneumoniae (M. hyo), свиного цирковируса 2 (PCV2), вируса репродуктивного и респираторного синдрома свиней (PRRSV) или иного патогена, способного инфицировать и вызывать заболевание или предрасположенность к заболеванию у свиней.

11. Способ вакцинации свиней, нуждающихся в защите от свиного гриппа H3N2, включающий введение животному композиции по любому из пп.6-10.

12. Способ по п.11, где свинья представляет собой свиноматку примерно от 3 до 6 недель перед опоросом.

13. Способ по п.12, где полученные от свиноматки поросята обладают пониженной заболеваемостью и/или смертностью по сравнению с поросятами, полученными от невакцинированных свиноматок.

14. Композиция для получения ослабленного штамма вируса свиного гриппа по п.1, содержащая вектор, включающий промотор, функционально связанный с кДНК НА вируса гриппа H3N2, причем указанная кДНК НА кодирует пять дополнительных сайтов гликозилирования по сравнению с НА соответствующего исходного вирулентного штамма вируса свиного гриппа, где дополнительные сайты гликозилирования представляют собой S71N, K90N, L173T, Р287Т и K294Т, причем нумерация аминокислотных замен основана на белке НА, кодируемом геном НА исходного вирулентного штамма, который имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18.

15. Композиция по п.14, где кДНК НА для получения ослабленного штамма вируса гриппа кодирует аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 22 или SEQ ID NO: 24, содержащую сайты гликозилирования S71N, K90N, L173T, Р287Т и K294Т.

16. Способ получения ослабленного штамма вируса свиного гриппа, способного обеспечить безопасную и эффективную иммунную реакцию у свиньи против вирулентного штамма вируса свиного гриппа H3N2, включающий обеспечение контактирования клеток хозяина с композицией по п.14 в количестве, эффективном для получения ослабленного штамма.

17. Клетка-хозяин для обеспечения безопасного и эффективного иммунного ответа у свиньи против вирулентного штамма вируса свиного гриппа H3N2 или заболеваний, вызванных указанным вирусом свиного гриппа H3N2, содержащая вектор, включающий промотор, функционально связанный с кДНК НА вируса гриппа H3N2, где кДНК НА кодирует пять дополнительных сайтов гликозилирования относительно НА, кодируемого соответствующим родительским штаммом вируса свиного гриппа, где дополнительные сайты гликозилирования представляют собой S71N, K90N, L173T, Р287Т и K294Т, причем нумерация аминокислотных замен основана на белке НА, кодируемом геном НА исходного вирулентного штамма, который имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18.