(11)	031652 (13) B1	Разделы: A B C D E F G H
(21)	201690602
(22)	2014.09.16
(51)	C12M 1/00 (2006.01)
(31)	61/878,502
(32)	2013.09.16
(33)	US
(43)	2016.07.29
(86)	PCT/US2014/055897
(87)	WO 2015/039115 2015.03.19
(71)	(73) ДЖЕНЗИМ КОРПОРЕЙШН (US)
(72)	Чжоу Хан (CN), Райт Бенджамин, Юй Марчелла, Инь Цзинь, Константинов Константин (US)
(74)	Медведев В.Н. (RU)
(54)	СПОСОБ И СИСТЕМА ДЛЯ ОБРАБОТКИ КЛЕТОЧНОЙ КУЛЬТУРЫ

(57) 1. Способ обработки клеточной культуры, причем данный способ включает:

(a) изготовление незамкнутой фильтрационной системы, включающей биореактор, содержащий клеточную культуру, блок тангенциальной проточной фильтрации (ТПФ), имеющий первый и второй впуски, первый трубопровод в гидравлическом сообщении между биореактором и первым впуском блока ТПФ и второй трубопровод в гидравлическом сообщении между биореактором и вторым впуском блока ТПФ, и по меньшей мере один насос, расположенный внутри системы для перекачивания текучей среды через систему, причем система выполнена с возможностью обратимого перекачивания текучей среды через систему из биореактора или в биореактор и через первый и второй трубопроводы и блок ТПФ посредством по меньшей мере одного насоса, и сбора фильтрата из блока ТПФ;

(b) перекачивание клеточной культуры из биоректора через блок ТПФ в первом направлении потока в течение первого периода времени;

(c) обращение первого направления потока и перекачивание клеточной культуры через блок ТПФ во втором направлении потока в течение второго периода времени;

(d) обращение второго направления потока и перекачивание клеточной культуры через блок ТПФ в первом направлении потока в течение третьего периода времени;

(e) повтор стадий (с) и (d) по меньшей мере два раза и

(f) сбор фильтрата.

2. Способ по п.1, в котором один или оба из первого и второго трубопроводов включает (включают) биосовместимые трубы.

3. Способ по п.1, в котором блок ТПФ включает единственный поперечно-проточный фильтр.

4. Способ по п.3, в котором единственный поперечно-проточный фильтр представляет собой трубчатый поперечно-проточный фильтр.

5. Способ по п.1, в котором блок ТПФ включает два или более поперечно-проточных фильтра.

6. Способ по п.1, в котором система включает один или несколько дополнительных блоков ТПФ, расположенных в первом трубопроводе и/или во втором трубопроводе.

7. Способ по любому из пп.3-6, в котором один или несколько поперечно-проточных фильтров имеют средний размер пор, составляющий приблизительно 0,2 мкм.

8. Способ по п.1, в котором по меньшей мере один насос располагается в первом трубопроводе и/или во втором трубопроводе.

9. Способ по п.6, в котором по меньшей мере один насос располагается в системе между какими-либо двумя блоками ТПФ.

10. Способ по п.1, в котором по меньшей мере один насос располагается в биореакторе и вблизи первого или второго трубопровода для текучей среды.

11. Способ по любому из пп.1 и 8-10, в котором по меньшей мере один насос представляет собой низкотурбулентный насос (НТН).

12. Способ по п.11, в котором НТН представляет собой перистальтический насос.

13. Способ по п.11, в котором система включает первый и второй НТН, причем первый НТН перекачивает клеточную культуру в первом направлении и второй НТН перекачивает клеточную культуру во втором направлении.

14. Способ по п.11, в котором система включает единственный НТН, где единственный НТН перекачивает клеточную культуру в первом направлении в течение первого и третьего периодов времени и перекачивает клеточную культуру во втором направлении в течение второго периода времени.

15. Способ по п.1, в котором каждый из первого, второго и третьего периодов времени составляет от приблизительно 30 с до приблизительно 15 мин.

16. Способ по п.1, в котором клеточная культура перекачивается в течение одной или нескольких из стадий (а), (b) и (с) со скоростью, составляющей от приблизительно 0,5 до приблизительно 80 л/мин.

17. Способ по п.16, в котором клеточная культура перекачивается в течение одной или нескольких из стадий (а), (b) и (с) со скоростью, составляющей от приблизительно 3,0 до приблизительно 60 л/мин.

18. Способ по п.1, в котором в результате единственного повтора стадий (b) и (с) доля обмена составляет более чем 50%.

19. Способ по п.1, в котором клеточная культура содержит секретируемый рекомбинантный белок и фильтрат содержит секретируемый рекомбинантный белок.

20. Способ по п.19, в котором секретируемый рекомбинантный белок представляет собой антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, фактор роста, цитокин, или фермент, или их сочетание.

21. Способ по п.19, дополнительно включающий выделение секретируемого рекомбинантного белка из фильтрата.

22. Способ по п.21, в котором выделение осуществляется с использованием интегрированного и непрерывного процесса, который включает выделение посредством по меньшей мере одной многоколоночной хроматографической системы (МКХС).

23. Способ по п.21, дополнительно включающий составление терапевтической лекарственной субстанции посредством смешивания выделенного рекомбинантного белка с фармацевтически приемлемым вспомогательным или буферным веществом.

24. Способ по п.1, в котором клеточная культура и/или фильтрат являются стерильными.

25. Способ по п.1, причем данный способ непрерывно осуществляется в течение периода, составляющего от приблизительно 14 до приблизительно 80 суток.

26. Незамкнутая фильтрационная система для осуществления способа по п.1, включающая биореактор, блок тангенциальной проточной фильтрации (ТПФ), имеющий первый и второй впуски, первый трубопровод в гидравлическом сообщении между биореактором и первым впуском блока ТПФ и второй трубопровод в гидравлическом сообщении между биореактором и вторым впуском блока ТПФ, и по меньшей мере один насос, расположенный внутри системы, в которой по меньшей мере один насос своим действием перекачивает текучую среду обратимо через систему из биореактора, через первый трубопровод, блок ТПФ, второй трубопровод и обратно в биореактор.

27. Незамкнутая фильтрационная система по п.26, в которой один или оба из первого и второго трубопроводов включает (включают) биосовместимые трубы.

28. Незамкнутая фильтрационная система по п.26, в которой блок ТПФ включает единственный поперечно-проточный фильтр.

29. Незамкнутая фильтрационная система по п.28, в которой единственный поперечно-проточный фильтр представляет собой трубчатый поперечно-проточный фильтр.

30. Незамкнутая фильтрационная система по п.26, в которой блок ТПФ включает два или более поперечно-проточных фильтра.

31. Незамкнутая фильтрационная система по п.26, в которой система включает один или несколько дополнительных блоков ТПФ, расположенных в первом трубопроводе и/или во втором трубопроводе.

32. Незамкнутая фильтрационная система по любому из пп.28-31, в которой один или несколько поперечно-проточных фильтров имеют средний размер пор, составляющий приблизительно 0,2 мкм.

33. Незамкнутая фильтрационная система по п.26, в которой по меньшей мере один насос располагается в первом трубопроводе и/или во втором трубопроводе.

34. Незамкнутая фильтрационная система по п.31, в которой по меньшей мере один насос располагается в системе между какими-либо двумя блоками ТПФ.

35. Незамкнутая фильтрационная система по п.26, в которой по меньшей мере один насос располагается в биореакторе и вблизи первого или второго трубопровода для текучей среды.

36. Незамкнутая фильтрационная система по любому из пп.26 и 33-35, в которой по меньшей мере один насос представляет собой низкотурбулентный насос (НТН).

37. Незамкнутая фильтрационная система по п.36, в которой НТН представляет собой перистальтический насос.

38. Незамкнутая фильтрационная система по п.36, в которой система включает первый и второй НТН, причем первый НТН предназначается для перекачивания клеточной культуры в первом направлении потока и второй НТН предназначается для обращения первого направления потока и перекачивания клеточной культуры во втором направлении потока.

39. Незамкнутая фильтрационная система по п.36, в которой система включает единственный НТН, предназначенный для обратимого перекачивания клеточной культуры в первом и втором направлениях потока.

40. Незамкнутая фильтрационная система по п.37, в которой перистальтический насос имеет объем свободного пространства насоса, составляющий от приблизительно 20 до приблизительно 250 мл.

41. Незамкнутая фильтрационная система по п.26, дополнительно включающая резервуар для хранения фильтрата и трубопровод для фильтрата в гидравлическом сообщении между блоком ТПФ и резервуаром для хранения фильтрата.

42. Незамкнутая фильтрационная система по п.26, дополнительно включающая биологическую производственную систему, включающую по меньшей мере одну многоколоночную хроматографическую систему (МКХС), а также впуск и выпуск, и трубопровод для фильтрата в гидравлическом сообщении между блоком ТПФ и впуском биологической производственной системы, причем данное устройство имеет такую конфигурацию, что фильтрат проходит во впуск биологической производственной системы через по меньшей мере одну МКХС и выходит из устройства через выпуск биологической производственной системы.

43. Незамкнутая фильтрационная система по п.26, в которой блок ТПФ располагается в корпусе.