(11)	027436 (13) B1	Разделы: A B C E F G H
(21)	201300600
(22)	2012.09.06
(51)	A61B 10/02 (2006.01) G06F 19/12 (2011.01)
(31)	2011140055
(32)	2011.10.03
(33)	RU
(43)	2013.09.30
(86)	PCT/RU2012/000745
(87)	WO 2013/051963 2013.04.11
(71)	(73) ОБЩЕСТВО С ОГРАНИЧЕННОЙ ОТВЕТСТВЕННОСТЬЮ "ВИТАЦЕЛ" (RU)
(72)	Зорин Вадим Леонидович, Зорина Алла Ивановна, Черкасов Владимир Рюрикович, Копнин Павел Борисович (RU)
(54)	СПОСОБЫ ДИАГНОСТИКИ РЕГЕНЕРАТОРНОГО И ПРОЛИФЕРАТИВНОГО ПОТЕНЦИАЛОВ КОЖИ ПАЦИЕНТА, А ТАКЖЕ КОМПЬЮТЕРНАЯ СИСТЕМА ДЛЯ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ ЭТИХ СПОСОБОВ

(57) 1. Способ определения регенераторного потенциала кожи пациента, включающий:

a) отбор образца кожи пациента;

b) выделение жизнеспособных субстрат-зависимых клеток фибробластов из образца кожи в стандартных условиях;

c) эксплантацию выделенных клеток фибробластов с плотностью, позволяющей получить колонии для статистически достоверного анализа, на поверхность культурального пластика с использованием классических методов культивирования клеток;

d) культивирование клеток фибробластов в стандартных условиях в течение контролируемого времени, достаточного для образования сформировавшихся дискретных клеточных колоний, пригодных для визуализации;

e) визуализацию образовавшихся колоний фибробластов с использованием стандартных средств и протоколов;

f) анализ изображений колоний фибробластов с целью получения указанных ниже параметров, характеризующих рост и морфологические особенности клеточных культур, по которым определяют регенераторный потенциал кожи пациента,

при этом эффективность колониеобразования рассчитывают как процентное отношение образовавшихся колоний с числом клеток более 20 к общему количеству эксплантированных клеток, плотные колонии характеризуются средней оптической плотностью ≥46 отн.ед., а диффузные колонии ≤25 отн.ед., причем при значении эффективности колониеобразования ниже 45% для мужчин и ниже 36% для женщин определяют низкий регенераторный потенциал, при значении эффективности колониеобразования в интервале 45-49% для мужчин и 36-45% для женщин определяют нормальный регенераторный потенциал, а при значении эффективности колониеобразования выше 49% для мужчин и выше 45% для женщин определяют высокий регенераторный потенциал.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что полученные на стадии f) значения параметров обрабатывают с использованием средств вычислительной техники, статистического анализа и математического моделирования.

3. Способ определения пролиферативного потенциала кожи пациента, включающий:

a) отбор образца кожи пациента;

b) выделение жизнеспособных субстрат-зависимых клеток фибробластов из образца кожи в стандартных условиях;

c) эксплантацию выделенных клеток фибробластов с плотностью, позволяющей получить колонии для статистически достоверного анализа, на поверхность культурального пластика с использованием классических методов культивирования клеток;

d) культивирование клеток фибробластов в стандартных условиях в течение контролируемого времени, достаточного для образования сформировавшихся дискретных клеточных колоний, пригодных для визуализации;

e) визуализацию образовавшихся колоний фибробластов с использованием стандартных средств и

f) определение показателя пролиферации по формуле

ПП=[1(ДД)+2(ДС)+3(ДП)]/100(%),

где ПП - показатель пролиферации; ДД - процентная доля диффузных колоний (%); ДС - процентная доля смешанных колоний (%); ДП - процентная доля плотных колоний (%), причем плотные колонии характеризуются средней оптической плотностью ≥46 отн.ед., а диффузные колонии ≤25 отн.ед., при значении показателя пролиферации ниже 2,0 для мужчин и ниже 1,8 для женщин определяют низкий пролиферативный потенциал, при значении показателя пролиферации в интервале равным 2,0-2,4 для мужчин и 1,8-2,0 для женщин определяют нормальный пролиферативный потенциал, при значении показателя пролиферации выше 2,4 для мужчин и выше 2,0 для женщин определяют высокий пролиферативный потенциал.

4. Способ по п.3, отличающийся тем, что полученные на стадии f) значения параметров обрабатывают с использованием средств вычислительной техники, статистического анализа и математического моделирования.

5. Компьютерная система, используемая в способе по пп.1-4, включающая блок формирования изображения, обеспечивающий оптическое разрешение не менее 800 dpi, блок центрального процессорного устройства, соединенного с блоком оперативной памяти и способного проводить обработку информации, получаемую либо непосредственно от блока формирования изображения, либо через блок ввода и вывода информации, при этом компьютерная система снабжена:

а) программным обеспечением для проведения статистически достоверного анализа колоний, определения параметров, характеризующих регенераторный потенциал и пролиферативный потенциал, обработки полученных параметров, позволяющей оценить регенерационную и пролиферативную способность кожи пациента;

b) базой данных с хранящимися в ней нормальными значениями указанных в пп.1 и 3 параметров, характеризующих регенераторный и пролиферативный потенциалы кожи человека.