| |
(21) | 201692565 (13) A1 |
Разделы: A B C D E F G H |
(22) | 2015.06.12 |
(51) | C07K 14/415 (2006.01) C12N 15/82 (2006.01) |
(31) | PCT/EP2014/062290 |
(32) | 2014.06.12 |
(33) | EP |
(86) | PCT/EP2015/063216 |
(87) | WO 2015/189409 2015.12.17 |
(71) | СЕСВАНДЕРХАВЕ Н.В. (BE) |
(72) | Вейенс Ги, Лефебвр Марк, Тамманнаговда Шивеговда, Ломмель Мюриэль (BE), Сун Ло (US) |
(74) | Харин А.В., Котов И.О., Буре Н.Н. (RU) |
(54) | СПОСОБ ТРАНСФОРМАЦИИ ПРОТОПЛАСТОВ САХАРНОЙ СВЕКЛЫ НА ПЛАТФОРМЕ ТЕХНОЛОГИИ TALEN |
(57) Способ трансформации протопластов сахарной свеклы, содержащий следующие стадии: получение протопластов из замыкающих клеток устьица, выделенных из растения сахарной свеклы, трансформирование указанных протопластов конструкцией нуклеиновой кислоты, содержащей интересующую нуклеотидную последовательность и эффекторные нуклеазы, подобные активаторам транскрипции (TALEN), или один или более векторов, содержащих последовательности, кодирующие эти последовательности эффекторных нуклеаз, подобных активаторам транскрипции (TALEN), где эти TALEN таргетируют и процессируют последовательность-мишень и замещают эту последовательность-мишень посредством гомологичной рекомбинации на конструкцию нуклеиновой кислоты, содержащую интересующую нуклеотидную последовательность, возможно применение к in vitro культуре этих протопластов среды, которая является токсичной, предпочтительно смертельной для in vitro культуры протопластов, и регенерирование растений сахарной свеклы из клеточной культуры, предпочтительно из выживших протопластов, интегрировавших конструкцию нуклеиновой кислоты, содержащую интересующую последовательность, которая возможно придает трансформированной клетке устойчивость к токсичной активности примененной среды.
|