(11)	024722 (13) B1	Разделы: A B C D E F G H
(21)	201100884
(22)	2009.12.24
(51)	C07K 16/34 (2006.01) C12N 15/13 (2006.01)
(31)	2730/MUM/2008
(32)	2008.12.31
(33)	IN
(43)	2012.02.28
(86)	PCT/IN2009/000741
(87)	WO 2010/079510 2010.07.15
(71)	(73) БХАРАТ СИРУМС ЭНД ВЭКСИНС ЛТД. (IN)
(72)	Дафтару Гаутам Винод (IN), Каундиня Джон, Синек Томас (US)
(74)	Вахнина Т.А. (RU)
(54)	МОНОКЛОНАЛЬНЫЕ АНТИТЕЛА АНТИ-RhD

(57) 1. Выделенное моноклональное анти-RhD антитело, содержащее

вариабельную область тяжелой цепи, имеющую первую, вторую и третью CDRs, которые являются идентичными или идентичными по существу соответствующим первой, второй и третьей CDRs SEQ ID NO: 2; и

вариабельную область легкой цепи, имеющую первую, вторую и третью CDRs, которые идентичны, или идентичны по существу соответствующим первой, второй и третьей CDRs SEQ ID NO: 4;

где две CDRs по существу идентичны, если они имеют аминокислотные последовательности, которые по меньшей мере на 80% идентичны и/или отличаются не более чем на одну аминокислоту и где CDRs моноклонального тела определены с помощью программы IMGT/V-QUEST,

где первая, вторая и третья CDRs SEQ ID NO: 2 представляют собой соответственно аминокислоты 45-52, аминокислоты 70-77 и аминокислоты 116-138 SEQ ID NO: 2,

где первая, вторая и третья CDRs SEQ ID NO: 4 представляют собой соответственно аминокислоты 45-53, аминокислоты 71-73 и аминокислоты 110-119 SEQ ID NO: 4.

2. Выделенное моноклональное анти-RhD антитело, содержащее

вариабельную область тяжелой цепи, имеющую первую, вторую и третью CDRs, которые являются идентичными или идентичными по существу соответствующим первой, второй и третьей CDRs SEQ ID NO: 6; и

вариабельную область легкой цепи, имеющую первую, вторую и третью CDRs, которые идентичны или идентичны по существу соответствующим первой, второй и третьей CDRs SEQ ID NO: 8;

где две CDRs по существу идентичны, если они имеют аминокислотные последовательности, которые по меньшей мере на 80% идентичны и/или отличаются не более чем на одну аминокислоту и где CDRs моноклонального тела определены с помощью программы IMGT/V-QUEST,

где первая, вторая и третья CDRs SEQ ID NO: 6 представляют собой соответственно аминокислоты 45-52, аминокислоты 70-77 и аминокислоты 116-138 SEQ ID NO: 6,

где первая, вторая и третья CDRs SEQ ID NO: 8 представляют собой соответственно аминокислоты 45-53, аминокислоты 71-73 и аминокислоты 110-119 SEQ ID NO: 8.

3. Выделенное моноклональное анти-RhD антитело, содержащее

вариабельную область тяжелой цепи, имеющую первую, вторую и третью CDRs, которые являются идентичными или идентичными по существу соответствующим первой, второй и третьей CDRs SEQ ID NO: 10; и

вариабельную область легкой цепи, имеющую первую, вторую и третью CDRs, которые идентичны или идентичны по существу соответствующим первой, второй и третьей CDRs SEQ ID NO: 12;

где две CDRs по существу идентичны, если они имеют аминокислотные последовательности, которые по меньшей мере на 80% идентичны и/или отличаются не более чем на одну аминокислоту и где CDRs моноклонального тела определены с помощью программы IMGT/V-QUEST,

где первая, вторая и третья CDRs SEQ ID NO: 10 представляют собой соответственно аминокислоты 45-54, аминокислоты 72-78 и аминокислоты 117-138 SEQ ID NO: 10,

где первая, вторая и третья CDRs SEQ ID NO: 12 представляют собой соответственно аминокислоты 49-54, аминокислоты 72-74 и аминокислоты 111-120 SEQ ID NO: 12.

4. Антитело по п.1, содержащее

вариабельную область тяжелой цепи, которая по меньшей мере на 80% идентична вариабельной области SEQ ID NO: 2 и имеет первую, вторую и третью CDRs, которые идентичны или по существу идентичны соответствующим первой, второй и третьей CDRs SEQ ID NO: 2;

вариабельную область легкой цепи, которая по меньшей мере на 80% идентична вариабельной области SEQ ID NO: 4 и имеет первую, вторую и третью CDRs, которые идентичны или по существу идентичны соответствующим первой, второй и третьей CDRs SEQ ID NO: 4.

5. Антитело по п.2, содержащее

вариабельную область тяжелой цепи, которая по меньшей мере на 80% идентична вариабельной области SEQ ID NO: 6 и имеет первую, вторую и третью CDRs, которые идентичны или по существу идентичны соответствующим первой, второй и третьей CDRs SEQ ID NO: 6;

вариабельную область легкой цепи, которая по меньшей мере на 80% идентична вариабельной области SEQ ID NO: 8 и имеет первую, вторую и третью CDRs, которые идентичны или по существу идентичны соответствующим первой, второй и третьей CDRs SEQ ID NO: 8.

6. Антитело по п.3, содержащее

вариабельную область тяжелой цепи, которая по меньшей мере на 80% идентична вариабельной области SEQ ID NO: 10 и имеет первую, вторую и третью CDRs, которые идентичны или по существу идентичны соответствующим первой, второй и третьей CDRs SEQ ID NO: 10;

вариабельную область легкой цепи, которая по меньшей мере на 80% идентична вариабельной области SEQ ID NO: 12 и имеет первую, вторую и третью CDRs, которые идентичны или по существу идентичны соответствующим первой, второй и третьей CDRs SEQ ID NO: 12.

7. Антитело по п.4, содержащее

вариабельную область тяжелой цепи, которая по меньшей мере на 80% идентична вариабельной области SEQ ID NO: 2 и имеет первую, вторую и третью CDRs, которые идентичны или по существу идентичны соответствующим первой, второй и третьей CDRs SEQ ID NO: 2;

вариабельную область легкой цепи, которая по меньшей мере на 80% идентична вариабельной области SEQ ID NO: 4 и имеет первую, вторую и третью CDRs, которые идентичны или по существу идентичны соответствующим первой, второй и третьей CDRs SEQ ID NO: 4.

8. Антитело по п.5, содержащее

вариабельную область тяжелой цепи, которая по меньшей мере на 80% идентична вариабельной области SEQ ID NO: 6 и имеет первую, вторую и третью CDRs, которые идентичны или по существу идентичны соответствующим первой, второй и третьей CDRs SEQ ID NO: 6;

вариабельную область легкой цепи, которая по меньшей мере на 80% идентична вариабельной области SEQ ID NO: 8 и имеет первую, вторую и третью CDRs, которые идентичны или по существу идентичны соответствующим первой, второй и третьей CDRs SEQ ID NO: 8.

9. Антитело по п.6, содержащее

вариабельную область тяжелой цепи, которая по меньшей мере на 80% идентична вариабельной области SEQ ID NO: 10 и имеет первую, вторую и третью CDRs, которые идентичны или по существу идентичны соответствующим первой, второй и третьей CDRs SEQ ID NO: 10;

вариабельную область легкой цепи, которая по меньшей мере на 80% идентична вариабельной области SEQ ID NO: 12 и имеет первую, вторую и третью CDRs, которые идентичны или по существу идентичны соответствующим первой, второй и третьей CDRs SEQ ID NO: 12.

10. Антитело по пп.4-9, в котором соответствующие вариабельные области по меньшей мере на 90% идентичны.

11. Антитело по п.10, в котором соответствующие вариабельные области по меньшей мере на 95% идентичны.

12. Антитело по п.11, в котором соответствующие вариабельные области идентичны.

13. Антитело по любому из предшествующих пунктов, где антитело содержит константный домен легкой цепи и константный домен тяжелой цепи.

14. Антитело по п.13, в котором антитело содержит константную область тяжелой цепи.

15. Антитело по п.13 или 14, где указанный константный домен или область тяжелой цепи означает константный домен или область IgG.

16. Антитело или фрагмент по п.15, в котором указанный константный домен или область IgG означает константный домен или область IgG 1 или IgG 3.

17. Выделенный полинуклеотид, кодирующий легкую и/или тяжелую цепь антитела в соответствии с любым предшествующим пунктом.

18. Экспрессирующий вектор, включающий последовательности, кодирующие легкую и тяжелую цепи антитела в соответствии с любым из пп.1-16.

19. Экспрессирующая система, включающая последовательности, кодирующие легкую и тяжелую цепи антитела в соответствии с любым из пп.1-16, содержащая

первый экспрессирующий вектор, в том числе последовательность, кодирующую легкую цепь; и

второй экспрессирующий вектор, в том числе последовательность, кодирующую тяжелую цепь.

20. Клетка, трансформированная экспрессирующим вектором или экспрессирующей системой в соответствии с п.18 или 19.

21. Рекомбинантная клетка по п.20, в которой клетка означает клетку млекопитающего.

22. Способ получения моноклональных антител, включающий культивирование рекомбинантных клеток в соответствии с п.20 или 21 и извлечение моноклонального антитела из культуральной среды.

23. Фармацевтическая композиция для ингибирования или предупреждения иммунизации RhD-отрицательного пациента человека против RhD-положительной крови, содержащая моноклональное антитело по любому из пп.1-16 и фармацевтически приемлемый носитель.

24. Фармацевтическая композиция по п.23, в которой содержится первое моноклональное антитело в соответствии с любым из пп.1-16 и второе моноклональное антитело в соответствии с любым из пп.1-16, где указанные первое и второе моноклональные антитела отличаются друг от друга.

25. Фармацевтическая композиция по п.24, в которой первое моноклональное антитело имеет тяжелую цепь, содержащую константный домен или область IgG 1, и второе моноклональное антитело имеет тяжелую цепь, содержащую константный домен или область IgG 3.

26. Способ ингибирования или предупреждения иммунизации RhD-отрицательного пациента человека против RhD-положительной крови, содержащий введение профилактически эффективного количества моноклонального антитела в соответствии с любым из пп.1-16 или фармацевтической композиции в соответствии с любым из пп.23-25.

27. Применение моноклонального антитела в соответствии с любым из пп.1-16 для ингибирования или предупреждения иммунизации RhD-отрицательного пациента человека против RhD-положительной крови.

28. Применение фармацевтической композиции в соответствии с любым из пп.23-26 для ингибирования или предупреждения иммунизации RhD-отрицательного пациента человека против RhD-положительной крови.

29. Применение моноклонального антитела в соответствии с любым из пп.1-16 в изготовлении лекарственного средства для ингибирования или предупреждения иммунизации RhD-отрицательного пациента человека против RhD-положительной крови.