(11)	022609 (13) B1	Разделы: A B C D E F G H
(21)	200970758
(22)	2008.02.12
(51)	G01N 33/569 (2006.01) G01N 33/68 (2006.01) G01N 33/72 (2006.01)
(31)	0700339-5
(32)	2007.02.12
(33)	SE
(43)	2010.02.26
(86)	PCT/EP2008/001051
(87)	WO 2008/098734 2008.08.21
(71)	(73) А1М ФАРМА АБ (SE)
(72)	Ханссон Стефан, Окерстрем Бо (SE)
(74)	Медведев В.Н. (RU)
(54)	ПРИМЕНЕНИЕ СВОБОДНОГО ФЕТАЛЬНОГО ГЕМОГЛОБИНА В КАЧЕСТВЕ МАРКЕРА ПРЕЭКЛАМПСИИ

(57) 1. Применение свободного фетального гемоглобина из выделенного неэмбрионального биологического образца беременной особи млекопитающего в качестве маркера преэклампсии.

2. Применение по п.1, где неэмбриональный биологический образец представляет собой образец крови, образец плазмы, образец мочи или образец ткани плаценты.

3. Применение по п.1 или 2, где беременная особь млекопитающего считается страдающей преэклампсией или имеющей повышенный риск развития преэклампсии, если концентрация фетального гемоглобина плазмы повышена приблизительно в 20 раз или более по сравнению с нормальной концентрацией фетального гемоглобина в плазме.

4. Применение по любому из предыдущих пунктов, где беременная особь млекопитающего считается страдающей преэклампсией или имеющей повышенный риск развития преэклампсии, если концентрация фетального гемоглобина плазмы составляет приблизительно 0,5 мкг/мл или более.

5. Применение по любому из предыдущих пунктов, где беременная особь млекопитающего считается страдающей преэклампсией или имеющей повышенный риск развития преэклампсии, если концентрация фетального гемоглобина мочи составляет приблизительно 0,06 мкг/мл или более.

6. Способ диагностики преэклампсии, включающий следующие стадии:

i) получение неэмбрионального биологического образца от беременной особи млекопитающего,

ii) измерение уровня свободного фетального гемоглобина в указанном биологическом образце и

iii) сравнение уровня свободного фетального гемоглобина в образце со средним уровнем свободного фетального гемоглобина в образцах контрольной группы, включающей беременные особи млекопитающих, у которых не диагностирована преэклампсия в качестве контрольного значения, где повышенный уровень свободного фетального гемоглобина в образце относительно контрольного значения указывает на наличие преэклампсии или риска развития преэклампсии.

7. Способ диагностики преэклампсии, включающий следующие стадии:

i) получение неэмбрионального биологического образца от беременной особи млекопитающего,

ii) измерение уровня свободного фетального гемоглобина и уровня общего свободного гемоглобина в указанном биологическом образце и

iii) сравнение соотношения между уровнем свободного фетального гемоглобина и уровнем общего свободного гемоглобина в образце с соотношением между уровнем свободного фетального гемоглобина и уровнем общего свободного гемоглобина в образцах контрольной группы, включающей беременные особи млекопитающих, у которых не диагностирована преэклампсия в качестве контрольного значения, где повышенное значение указанного соотношения в образце относительно контрольного значения указывает на наличие преэклампсии или риска развития преэклампсии.

8. Способ мониторинга прогрессирования или регрессии преэклампсии, включающий стадии:

i) измерения уровня свободного фетального гемоглобина в первом биологическом образце, взятом у беременной особи млекопитающего,

ii) измерения уровня свободного фетального гемоглобина во втором биологическом образце, взятом у беременной особи млекопитающего в более поздний момент времени, и

iii) сравнения значений, измеренных на стадиях i) и ii), где повышенный уровень свободного фетального гемоглобина во втором образце в сравнении с уровнем свободного фетального гемоглобина в первом образце указывает на прогрессирование преэклампсии, а уменьшение уровня свободного фетального гемоглобина во втором образце в сравнении с уровнем свободного фетального гемоглобина в первом образце указывает на регрессию преэклампсии.

9. Способ мониторинга прогрессирования или регрессии преэклампсии, включающий стадии:

i) измерения уровня свободного фетального гемоглобина и уровня общего свободного гемоглобина в первом биологическом образце, взятом у беременной особи млекопитающего,

ii) измерения уровня свободного фетального гемоглобина и уровня общего свободного гемоглобина во втором биологическом образце, взятом у беременной особи млекопитающего в более поздний момент времени, и

iii) сравнения значений, измеренных на стадиях i) и ii), где повышенное соотношение между уровнем свободного фетального гемоглобина и уровнем общего свободного гемоглобина во втором образце в сравнении с соотношением между уровнем свободного фетального гемоглобина и уровнем общего свободного гемоглобина в первом образце указывает на прогрессирование преэклампсии, а уменьшение соотношения между уровнем свободного фетального гемоглобина и уровнем общего свободного гемоглобина во втором образце в сравнении с соотношением между уровнем свободного фетального гемоглобина и уровнем общего свободного гемоглобина в первом образце указывает на регрессию преэклампсии.

10. Способ оценки эффективности лечения преэклампсии, включающий стадии:

i) измерения уровня свободного фетального гемоглобина в первом биологическом образце, взятом у беременной особи млекопитающего перед лечением или в момент времени t₁,

ii) измерения уровня свободного фетального гемоглобина во втором биологическом образце, взятом у той же беременной особи млекопитающего в более поздний момент времени t₂, и

iii) сравнения значений, измеренных на стадиях i) и ii), где уменьшение уровня свободного фетального гемоглобина во втором образце в сравнении с уровнем свободного фетального гемоглобина в первом образце указывает на то, что лечение эффективно для излечения преэклампсии.

11. Способ оценки эффективности лечения преэклампсии, включающий стадии:

i) измерения уровня свободного фетального гемоглобина и уровня общего свободного гемоглобина в первом биологическом образце, взятом у беременной особи млекопитающего перед лечением или в момент времени t₁,

ii) измерения уровня свободного фетального гемоглобина и уровня общего свободного гемоглобина во втором биологическом образце, взятом у той же беременной особи млекопитающего в более поздний момент времени t₂, и

iii) сравнения значений, измеренных на стадиях i) и ii), где уменьшение соотношения между уровнем свободного фетального гемоглобина и уровнем общего свободного гемоглобина во втором образце в сравнении с соотношением между уровнем свободного фетального гемоглобина и уровнем общего свободного гемоглобина в первом образце указывает на то, что лечение эффективно для излечения преэклампсии.

12. Способ по любому из пп.6-11, где биологический образец представляет собой образец крови, образец плазмы, образец мочи или образец ткани плаценты.

13. Способ по любому из пп.6-12, где уровень свободного фетального гемоглобина измеряют посредством измерения уровня гамма-цепи гемоглобина (Hbγ) в образце.

14. Способ по любому из пп.6, 8 и 10, где уровень свободного фетального гемоглобина измеряют с использованием иммунологического анализа.

15. Способ по любому из пп.7, 9 и 11, где уровень свободного фетального гемоглобина и/или общего свободного гемоглобина измеряют с использованием иммунологического анализа.

16. Способ по п.14 или 15, где анализом является ELISA.

17. Способ по любому из пп.6-13, где уровень свободного фетального гемоглобина определяют посредством измерения РНК свободного фетального гемоглобина.

18. Способ по п.17, где уровень измеряют, используя ПЦР в режиме реального времени.

19. Способ по любому из пп.6-18, где млекопитающим является человек.

20. Применение набора для обнаружения свободного фетального гемоглобина в способе, определенном в любом из пп.6-19, где набор содержит:

i) твердую поверхность, покрытую одним или несколькими антителами или их иммунореактивными фрагментами, которые специфично связываются со свободным фетальным гемоглобином из выделенного неэмбрионального биологического образца беременной особи млекопитающего,

ii) компонент для обнаружения образования комплекса антиген-антитело и

iii) инструкции по применению.

21. Применение по п.20, где набор дополнительно содержит компоненты для измерения концентрации общего гемоглобина в образце.

22. Применение по п.21, где компоненты, необходимые для измерения концентрации общего гемоглобина в образце, включают:

i) одно или несколько антител или их иммунореактивный фрагмент, который специфично связывается с общим гемоглобином из выделенного неэмбрионального биологического образца беременной особи млекопитающего,

ii) средство для обнаружения образования комплекса антиген-антитело.

23. Применение по любому из пп.20-22, где указанная твердая поверхность i) является одной или несколькими лунками планшета для микротитрования.

24. Применение по любому из пп.20-23, где антитело или фрагмент антитела i) являются специфичными для альфа-цепи гемоглобина, бета-цепи гемоглобина, дельта-цепи гемоглобина, гамма-цепи гемоглобина или его иммуногенного пептида, фрагмента или эпитопа.

25. Применение по любому из пп.20-24, где указанное антитело i) является моноклональным или поликлональным антителом.

26. Применение по п.25, где указанное антитело получают из кроликов.

27. Применение по любому из пп.20-26, где антитело является антителом, меченым ферментом, таким как, например, антитело, меченое щелочной фосфатазой.

28. Применение по п.27, где средство для обнаружения образования комплекса антиген-антитело содержит свиное антитело против кроличьего IgG-щелочная фосфатаза.

29. Применение по любому из пп.20-28, где набор дополнительно содержит серии стандартных разведений гемоглобина в сосудах, готовые для применения.

30. Применение по п.20, в проведении ELISA типа сэндвича.

31. Применение по п.30, где набор содержит:

i) твердую поверхность, покрытую моноклональным или поликлональным антителом, специфичным к Hb-γ, и

ii) антигемоглобин-ALP кролика.

32. Набор для применения в способе по любому из пп.6-19, содержащий средства для определения мРНК фетального гемоглобина в биологическом образце беременной особи млекопитающего.

33. Набор по п.32, содержащий средство для проведения ELISA типа сэндвича и содержащий твердую поверхность, покрытую моноклональным или поликлональным антителом, специфичным к Hb-γ.

34. Набор по п.33, дополнительно содержащий антигемоглобин-ALP кролика.