(21)	201301143 (13) A1	Разделы: A B C E F G H
(22)	2013.10.11
(51)	C12N 1/21 (2006.01) C07K 14/485 (2006.01) C12N 15/70 (2006.01)
(96)	2013000136 (RU) 2013.10.11
(71)	ОБЩЕСТВО С ОГРАНИЧЕННОЙ ОТВЕТСТВЕННОСТЬЮ "ПРОТЕИНОВЫЙ КОНТУР" (RU)
(72)	Мурашев Борис Владимирович, Галачьянц Юрий Павлович, Зеров Юрий Петрович, Пивоваров Анатолий Михайлович, Васильев Андрей Валентинович, Коробицын Леонид Павлович (RU)
(54)	ПРОДУЦЕНТ ЭПИДЕРМАЛЬНОГО ФАКТОРА РОСТА ЧЕЛОВЕКА (рчЭФР)

(57) Изобретение относится к способу получения рекомбинантного эпидермального фактора роста человека культивированием нового штамма E.coli, продуцирующего рчЭФР, который был получен трансформацией рекомбинантной плазмидой, содержащей ген чЭФР в составе экспрессионной кассеты методом электропорации. Полученный продуцент культивируют в селективных условиях, синтез рчЭФР индуцируют с помощью индуктора - изопропилтиогалактозида (ИПТГ). Штамм способен продуцировать рчЭФР в количестве до 200 мг на 1 л культуры. После культивирования клетки собирают центрифугированием, лизируют и выделяют тельца включения. Процедура выделения рчЭФР включает выделение телец включения, ренатурацию ЭФР, кислотное осаждение балластных белков и хроматографическую очистку на сильном катионите. Получают электрофоретически чистый ЭФР с выходом до 90 мг с 1 л культуры. Рекомбинантный чЭФР по своим биологическим и физико-химическим свойствам соответствует природному чЭФР. Изобретение позволяет получить биологически активный рчЭФР с высоким выходом.