| |
(21) | 201391282 (13) A1 |
Разделы: A B C D E F G H |
(22) | 2012.03.05 |
(51) | C12N 15/10 (2006.01) C12N 9/10 (2006.01) C12N 15/01 (2006.01) |
(31) | 211583; 217216 |
(32) | 2011.03.06; 2011.12.27 |
(33) | IL |
(86) | PCT/IL2012/000109 |
(87) | WO 2012/120500 2012.09.13 |
(88) | 2012.11.15 |
(71) | МЕРК СЕРОНО С.А. (CH) |
(72) | Хельман Дэниел, Бар-Шимон Мейрав, Тойстер-Ачитув Мира (IL) |
(74) | Медведев В.Н. (RU) |
(54) | КЛЕТОЧНЫЕ ЛИНИИ С НИЗКИМ СОДЕРЖАНИЕМ ФУКОЗЫ И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ |
(57) Описан способ отбора клеток с нулевым уровнем фукозы, применимых в качестве клеток-хозяев для экспрессии рекомбинантных белков. Этот способ предусматривает: 1) введение генетических мутаций в популяцию клеток СНО путем контактирования этих клеток с метотрексатом (МТХ), 2) контактирование указанной популяции клеток СНО, содержащей мутантные клетки, с нетоксичным веществом, связывающим фукозу, в течение времени, которое дает возможность осуществить связывание вещества, связывающего фукозу, с фукозной группой на клеточной мембране популяции клеток, где период времени не дает возможности осуществить уничтожение клеток; и 3) извлечение из этой популяции клеток, содержащей мутантные клетки, субпопуляции клеток, которые связываются с веществом, связывающим фукозу, таким образом, отбирая клетки, применимые в качестве клеток-хозяев для экспрессии рекомбинантных белков, отобранные клетки имеют нулевое содержание фукозы. Также описаны клетки и клеточные линии, применимые в качестве клеток-хозяев для экспрессии рекомбинантных белков.
|