|
| |
(11) | 019512 (13) B1 |
    Разделы: A B C D E F G H  |
(21) | 201170030 |
(22) | 2009.07.02 |
(51) | A61K 39/395 (2006.01)
C07K 16/24 (2006.01)
C07K 16/28 (2006.01)
C07K 16/46 (2006.01) |
(31) | 61/077,859 |
(32) | 2008.07.02 |
(33) | US |
(43) | 2011.08.30 |
(86) | PCT/US2009/049593 |
(87) | WO 2010/003101 2010.01.07 |
(71) | (73) ЭМЕРДЖЕНТ ПРОДАКТ ДИВЕЛОПМЕНТ СИЭТЛ, ЛЛС (US) |
(72) | Мишер Линда, Лофквист Алан Кейт, Баум Питер Роберт, Томпсон Питер Армстронг (US) |
(74) | Нилова М.И. (RU) |
(54) | IL-6-ОПОСРЕДОВАННАЯ ИММУНОТЕРАПИЯ |
(57) 1. Изолированный полипептид, содержащий связывающий домен, специфичный к комплексу IL-6/IL-6R (IL-6xR), который:
(a) связывается с комплексом IL-6xR с большим сродством, чем с IL-6 или IL-6Rα по отдельности, или связывается с комплексом IL-6xR или с IL-6Rα по отдельности с большим сродством, чем только с IL-6; и
(b) конкурирует с мембранным gp130 за связывание с растворимым комплексом IL-6xR (комплексом "sIL-6xR"),
при этом указанный связывающий домен предпочтительно ингибирует транс-сигналинг IL-6 по отношению к цис-сигналингу IL-6,
причем указанный связывающий домен включает вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательности участков CDR1, CDR2 и CDR3, определяющих комплементарность, каждый из которых по меньшей мере на 80% идентичен CDR1, CDR2 и CDR3 вариабельной области легкой цепи, соответствующей SEQ ID NO: 373-434 или 799-804; вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательности участков CDR1, CDR2 и CDR3, определяющих комплементарность, каждый из которых по меньшей мере на 80% идентичен CDR1, CDR2 и CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, соответствующей SEQ ID NO: 435-496 и 805-810; или вариабельные области как указанной легкой, так и указанной тяжелой цепей или
причем указанный связывающий домен содержит последовательность, по меньшей мере на 80% идентичную вариабельной области легкой цепи, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 373-434 или 799-804, вариабельной области тяжелой цепи, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 435-496 или 805-810, или вариабельным областям как указанной легкой, так и указанной тяжелой цепей.
2. Полипептид по п.1, отличающийся тем, что указанный связывающий домен связывается с комплексом IL-6xR и с IL-6Rα по отдельности с большим сродством, чем только с IL-6.
3. Полипептид по п.1 или 2, отличающийся тем, что указанный связывающий домен не ингибирует передачу сигналов цитокинами семейства gp130, отличными от IL-6.
4. Полипептид по любому из пп.1-3, отличающийся тем, что указанный связывающий домен включает антигенсвязывающий домен одноцепочечного антитела.
5. Полипептид по любому из пп.1-4, отличающийся тем, что указанный связывающий домен включает вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательности участков CDR1, CDR2 и CDR3, определяющих комплементарность, каждый из которых по меньшей мере на 80% идентичен CDR1, CDR2 и CDR3 по меньшей мере одной вариабельной области легкой цепи, соответствующей SEQ ID NO: 373-434 и 799-804; и вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательности участков CDR1, CDR2 и CDR3, определяющих комплементарность, каждый из которых по меньшей мере на 80% идентичен CDR1, CDR2 и CDR3 по меньшей мере одной вариабельной области тяжелой цепи, соответствующей SEQ ID NO: 435-496 и 805-810.
6. Полипептид по любому из пп.1-5, отличающийся тем, что комплекс IL-6xR содержит последовательность аминокислот, состоящую из последовательности зрелого полипептида, соответствующей SEQ ID NO: 606.
7. Полипептид по п.1, дополнительно включающий первый линкер и участок константной области иммуноглобулина.
8. Полипептид по п.7, содержащий в направлении от аминоконца к карбоксильному концу (а) полипептидный связывающий домен, специфичный к IL-6xR комплексу, (b) первый линкер и (с) участок константной области иммуноглобулина.
9. Полипептид по п.7 или 8, отличающийся тем, что у указанного участка константной области отсутствуют эффекторные функции антителозависимой клеточно-опосредованной цитотоксичности (ADCC), антителозависимого клеточно-опосредованного фагоцитоза (ADCP), активации системы комплемента и комплементзависимой цитотоксичности (CDC) или их комбинация или такие функции присущи ему в минимальной степени.
10. Полипептид по п.9, отличающийся тем, что дополнительно сохраняет способность к связыванию с рецептором Fc.
11. Полипептид по п.10, отличающийся тем, что рецептор Fc представляет собой рецептор FcRn.
12. Полипептид по п.7 или 8, отличающийся тем, что указанный участок константной области содержит домен Fc иммуноглобулина или один или более доменов СН Fc-домена иммуноглобулина.
13. Полипептид по п.12, отличающийся тем, что один или более доменов СН Fc-домена иммуноглобулина содержат CH2 константную область и CH3 константную область.
14. Полипептид по п.13, отличающийся тем, что Fc-домен иммуноглобулина представляет собой Fc-домен IgG1, содержащий мутации L234A, L235A, G237A, E318A, K320A и K322A.
15. Полипептид по п.7 или 8, отличающийся тем, что указанный линкер представляет собой полипептид шарнирной области иммуноглобулина.
16. Полипептид по п.7 или 8, отличающийся тем, что указанный линкер выбран из группы, состоящей из SEQ ID NO: 497-604 и 823-828.
17. Мультиспецифичный одноцепочечный связывающий гибридный белок, содержащий первый связывающий домен, ковалентно связанный со вторым связывающим доменом посредством промежуточного домена, причем указанный первый связывающий домен включает связывающий домен, специфичный к комплексу IL-6/IL-6R (IL-6xR), который:
(a) связывается с комплексом IL-6xR с большим сродством, чем с IL-6 или IL-6Rα по отдельности, или связывается с комплексом IL-6xR или с IL-6Rα по отдельности с большим сродством, чем только с IL-6; и
(b) конкурирует с мембранным gp130 за связывание с растворимым комплексом IL-6xR (комплексом "sIL-6xR"),
причем указанный первый связывающий домен включает вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательности участков CDR1, CDR2 и CDR3, определяющих комплементарность, каждый из которых по меньшей мере на 80% идентичен CDR1, CDR2 и CDR3 вариабельной области легкой цепи, соответствующей SEQ ID NO: 373-434 или 799-804; вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательности участков CDR1, CDR2 и CDR3, определяющих комплементарность, каждый из которых по меньшей мере на 80% идентичен CDR1, CDR2 и CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, соответствующей SEQ ID NO: 435-496 и 805-810; или вариабельные области как указанной легкой, так и указанной тяжелой цепей или
причем указанный первый связывающий домен содержит последовательность, по меньшей мере на 80% идентичную вариабельной области легкой цепи, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 373-434 или 799-804, вариабельной области тяжелой цепи, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 435-496 или 805-810, или вариабельным областям как указанной легкой, так и указанной тяжелой цепей.
18. Мультиспецифичный одноцепочечный связывающий гибридный белок по п.17, отличающийся тем, что указанный второй связывающий домен представляет собой эктодомен рецептора, который не является антагонистом IL-6.
19. Мультиспецифичный одноцепочечный связывающий гибридный белок по п.17 или 18, отличающийся тем, что указанный промежуточный домен содержит константную область иммуноглобулина или ее часть, расположенную между первым и вторым связывающими доменами.
20. Мультиспецифичный одноцепочечный связывающий гибридный белок по п.19, отличающийся тем, что указанная константная область иммуноглобулина расположена между первым и вторым линкерами.
21. Мультиспецифичный одноцепочечный связывающий гибридный белок по любому из пп.17-20, отличающийся тем, что указанный промежуточный домен представляет собой домен димеризации.
22. Полинуклеотид, кодирующий полипептид по любому из пп.1-17 или гибридный белок по любому из пп.18-21.
23. Вектор экспрессии, содержащий полинуклеотид по п.22, функционально связанный с последовательностью контроля экспрессии.
24. Рекомбинантная клетка-хозяин, содержащая вектор экспрессии по п.23.
25. Композиция, содержащая полипептид по любому из пп.1-17, гибридный белок по любому из пп.18-21, полинуклеотид по п.22, вектор по п.23 или клетку-хозяина по п.24 и фармацевтически приемлемый носитель, растворитель или вспомогательное вещество.
26. Применение полипептида по любому из пп.1-17, гибридного белка по любому из пп.18-21, полинуклеотида по п.22, вектора по п.23, клетки-хозяина по п.24 или композиции по п.25 для получения лекарственного средства для лечения IL-6-ассоциированного заболевания у субъекта.
27. Применение по п.26, отличающееся тем, что указанное заболевание представляет собой воспалительное заболевание или рак.
28. Применение полипептида по любому из пп.1-17, гибридного белка по любому из пп.18-21, полинуклеотида по п.22, вектора по п.23, клетки-хозяина по п.24 или композиции по п.25 для получения лекарственного средства для ингибирования у субъекта транс-сигналинга IL-6.
29. Применение полипептида по любому из пп.1-17, гибридного белка по любому из пп.18-21, полинуклеотида по п.22, вектора по п.23, или клетки-хозяина по п.24, или композиции по п.25 для приготовления лекарственного средства для обеспечения конкурирования с мембранным gp130 за связывание с комплексом "sIL-6xR" у субъекта.
|
