(11)	013752 (13) B1	Разделы: A B C D E F G H
(21)	200700427
(22)	2005.08.09
(51)	A61K 39/395 (2006.01) A61K 38/17 (2006.01) C07K 16/18 (2006.01) C12N 5/12 (2006.01) A61K 39/00 (2006.01) A61P 25/28 (2006.01) G01N 33/68 (2006.01)
(31)	10/915,214; 11/185,907
(32)	2004.08.09; 2005.07.19
(33)	US
(43)	2008.02.28
(86)	PCT/US2005/028166
(87)	WO 2006/020581 2006.02.23
(71)	(73) ЭЛАН ФАРМАСЬЮТИКАЛЗ, ИНК.; ДЗЕ РИДЖЕНТС ОФ ДЗЕ ЮНИВЕРСИТИ ОФ КАЛИФОРНИЯ (US)
(72)	Шенк Дэйл Б., Маслиа Элиезер, Буттини Мануэль Дж., Чилкот Тэми Дж., Рокенштейн Эдвард, Геймз Кэт Дора (US)
(74)	Дементьев В.Н. (RU)
(54)	ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ И ЛЕЧЕНИЕ СИНУКЛЕИНОПАТИЧЕСКИХ И АМИЛОИДОГЕННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ

(57) 1. Способ профилактики и лечения заболевания, характеризующегося образованием телец Леви или агрегацией a-синуклеина в головном мозге, заключающийся во введении пациенту, имеющему риск развития данного заболевания или страдающему от данного заболевания, антитела в эффективном режиме, которое специфически связывается с эпитопом a-синуклеина человека по остаткам 1-20, причем остатки пронумерованы в соответствии с SEQ ID NO:1.

2. Способ по п.1, при котором антитело специфически связывается с эпитопом a-синуклеина человека по остаткам 1-10.

3. Способ по п.1 или 2, при котором антитело представляет собой моноклональное антитело.

4. Способ по п.3, при котором антитело представляет собой химерное антитело.

5. Способ по п.3, при котором антитело представляет собой человеческое антитело.

6. Способ по п.3, при котором антитело представляет собой гуманизированное антитело.

7. Способ по любому из пп.1-6, при котором антитело конкурирует с мышиным моноклональным антителом 6Н7 (АТСС номер доступа PTA 6910) за связывание с a-синуклеином человека.

8. Способ по п.7, при котором антитело представляет собой гуманизированный вариант мышиного моноклонального антитела 6Н7 (АТСС номер доступа PTA 6910).

9. Способ профилактики и лечения заболевания, характеризующегося образованием телец Леви или агрегацией a-синуклеина в головном мозге, заключающийся во введении пациенту, имеющему риск развития данного заболевания или страдающему от данного заболевания, антитела в эффективном режиме, которое специфически связывается с эпитопом a-синуклеина человека по остаткам 70-140, причем остатки пронумерованы в соответствии с SEQ ID NO:1.

10. Способ по п.9, при котором антитело специфически связывается с эпитопом a-синуклеина человека по остаткам 120-140.

11. Способ по п.9 или 10, при котором антитело представляет собой моноклональное антитело.

12. Способ по п.11, при котором антитело представляет собой химерное антитело.

13. Способ по п.11, при котором антитело представляет собой человеческое антитело.

14. Способ по п.11, при котором антитело представляет собой гуманизированное антитело.

15. Способ по любому из пп.9-14, при котором антитело конкурирует с мышиным моноклональным антителом 8А5 (АТСС номер доступа РТА-6909) за связывание с a-синуклеином человека.

16. Способ по п.10, при котором антитело представляет собой гуманизированный вариант мышиного моноклонального антитела 8А5 (АТСС номер доступа РТА-6909).

17. Способ по любому из предшествующих пунктов, при котором антитело представляет собой антитело изотипа IgG1 человека.

18. Способ по любому из предшествующих пунктов, при котором антитело вводят совместно с фармацевтическим носителем в составе фармацевтической композиции.

19. Способ по любому из предшествующих пунктов, при котором антитело вводят в дозе 0,0001-100 мг/кг, предпочтительно в дозе, составляющей по крайней мере 1 мг/кг массы тела.

20. Способ по любому из предшествующих пунктов, при котором антитело вводят в множественных дозах в течение по крайней мере 6 месяцев.

21. Способ по любому из предшествующих пунктов, при котором антитело вводят интраперитонеально, перорально, подкожно, интракраниально, внутримышечно, местно, интраназально или внутривенно.

22. Способ профилактики и лечения заболевания, характеризующегося образованием телец Леви или агрегацией a-синуклеина в головном мозге, заключающийся во введении пациенту в эффективном режиме первого антитела, которое специфически связывается с эпитопом a-синуклеина человека по остаткам 1-20, и второго антитела, которое специфически связывается с эпитопом a-синуклеина человека по остаткам 70-140, причем остатки пронумерованы в соответствии с SEQ ID NO:1.

23. Способ по п.22, при котором второе антитело специфически связывается с эпитопом a-синуклеина человека по остаткам 120-140.

24. Способ по любому из предшествующих пунктов, при котором заболевание представляет собой болезнь Паркинсона.

25. Фармацевтическая композиция, включающая химерное или гуманизированное антитело, которое специфически связывается с эпитопом a-синуклеина по остаткам 1-40, а также фармацевтический носитель.

26. Фармацевтическая композиция по п.25, в которой антитело специфически связывается с эпитопом a-синуклеина по остаткам 1-20.

27. Фармацевтическая композиция по п.26, в которой антитело специфически связывается с эпитопом a-синуклеина по остаткам 1-10.

28. Фармацевтическая композиция, включающая химерное или гуманизированное антитело, которое специфически связывается с эпитопом a-синуклеина по остаткам 70-140, а также фармацевтический носитель.

29. Фармацевтическая композиция по п.28, в которой антитело специфически связывается с эпитопом a-синуклеина по остаткам 120-140, а также фармацевтический носитель.

30. Моноклональное антитело, продуцируемое гибридомой JH17.6H7.1.54.28 (АТСС номер доступа РТА-6910) или JH4.8A5.25.7.36 (АТСС номер доступа РТА-6909).

31. Клетка гибридомы JH17.6H7.1.54.28 (АТСС номер доступа РТА-6910) или JH4.8А5.25.7.36 (АТСС номер доступа РТА-6909).

32. Способ профилактики и лечения заболевания, характеризующегося образованием телец Леви или агрегацией a-синуклеина в головном мозге, заключающийся во введении пациенту, имеющему риск развития данного заболевания или страдающему от данного заболевания, полипептида, имеющего в своем составе иммуногенный фрагмент a-синуклеина, эффективный для индукции иммунного ответа с образованием антител, которые специфически связываются с a-синуклеином человека по остаткам 70-140, причем остатки пронумерованы в соответствии с SEQ ID NO:1.

33. Способ по п.32, при котором иммуногенный фрагмент включает SN130-136 и содержит в целом не более 40 последовательных остатков a-синуклеина, причем остатки пронумерованы в соответствии с SEQ ID NO:1.

34. Способ по п.33, при котором иммуногенный фрагмент выбран из группы, включающей SN124-140, SN125-140, SN126-140, SN127-140, SN128-140, SN129-140, SN130-140, SN131-140, SN132-140, SN133-140, SN134-140, SN135-140, SN136-140, SN137-140, SN124-139, SN125-139, SN126-139, SN127-139, SN128-139, SN124-139, SN125-139, SN126-139, SN127-139, SN128-139, SN129-139, SN130-139, SN131-139, SN132-139, SN133-139, SN134-139, SN135-139, SN136-139, SN137-139, SN124-138, SN125-138, SN126-138, SN127-138, SN128-138, SN129-138, SN130-138, SN131-138, SN132-138, SN133-138, SN134-138, SN135-138, SN136-138, SN124-137, SN125-137, SN126-137, SN127-137, SN128-137, SN129-137, SN130-137, SN131-137, SN132-137, SN133-137, SN134-137, SN135-137, SN124-136, SN125-136, SN126-136, SN127-136, SN128-136, SN129-136, SN130-136, SN131-136, SN132-136, SN133-136 и SN134-136, причем остатки пронумерованы в соответствии с SEQ ID NO:1.

35. Способ профилактики и лечения заболевания, характеризующегося образованием телец Леви или агрегацией a-синуклеина в головном мозге, заключающийся во введении пациенту, имеющему риск развития данного заболевания или страдающему от данного заболевания, полипептида, имеющего в своем составе иммуногенный фрагмент a-синуклеина, эффективный для индукции иммунного ответа с образованием антител, которые специфически связываются с a-синуклеином человека по остаткам 1-40, причем остатки пронумерованы в соответствии с SEQ ID NO:1.

36. Способ по п.35, при котором иммуногенный фрагмент включает SN1-5 и содержит в целом не более 40 последовательных остатков a-синуклеина, причем остатки пронумерованы в соответствии с SEQ ID NO:1.

37. Способ по п.35, при котором иммуногенный фрагмент выбран из группы, включающей SN1-5, SN1-6, SN1-7, SN1-8, SN1-9, SN1-10, SN1-11, SN1-12, SN1-13 и SN1-14, SN1-15, SN1-16, SN1-17, SN1-18, SN1-19 и SN1-20.

38. Способ профилактики и лечения заболевания, характеризующегося образованием телец Леви или агрегацией a-синуклеина человека, заключающийся во введении пациенту, имеющему риск развития заболевания или страдающему от данного заболевания, полипептида, имеющего в своем составе иммуногенный фрагмент a-синуклеина, эффективный для индукции иммунного ответа с образованием антител, которые специфически связываются с эпитопом a-синуклеина человека по остаткам 1-20, причем остатки пронумерованы в соответствии с SEQ ID NO:1, при этом иммуногенный фрагмент a-синуклеина не имеет в своем составе остатков 25-69, остатков 70-140, остатков 41-140, остатков 25-140 a-синуклеина.

39. Способ по любому из пп.32-38, при котором иммуногенный фрагмент связан с носителем с формированием конъюгата.

40. Способ профилактики и лечения заболевания, характеризующегося образованием телец Леви или агрегацией a-синуклеина человека, заключающийся во введении пациенту, имеющему риск развития заболевания или страдающему от данного заболевания, полипептида или комбинации полипептидов, эффективной для индукции иммунного ответа с образованием антител, которые специфически связываются с эпитопом a-синуклеина человека по остаткам 1-20, и антител, которые специфически связываются с эпитопом a-синуклеина человека по остаткам 70-140, причем указанный полипептид или комбинация полипептидов не индуцируют иммунный ответ с образованием антител, которые специфически связываются с эпитопом a-синуклеина по остаткам 25-69.

41. Способ профилактики и лечения заболевания, характеризующегося образованием телец Леви или агрегацией a-синуклеина человека, заключающийся во введении пациенту, имеющему риск развития заболевания или страдающему от данного заболевания, полипептида, имеющего в своем составе иммуногенный фрагмент a-синуклеина, эффективный для индукции иммунного ответа с образованием антител, которые специфически связываются с эпитопом a-синуклеина человека по остаткам 1-20, а также полипептида, имеющего в своем составе второй иммуногенный фрагмент a-синуклеина, эффективный для индукции иммунного ответа с образованием антител, которые специфически связываются с эпитопом a-синуклеина человека по остаткам 70-140.

42. Способ скрининга агента для того, чтобы определить, обладает ли указанный агент активностью, полезной для лечения заболевания, характеризующегося образованием телец Леви, заключающийся в обеспечении контакта указанного агента и трансгенного животного (не человека), предрасположенного к развитию заболевания, характеризующегося образованием телец Леви; определении влияния агента на распространенность и уровень характерных симптомов по сравнению с контрольным трансгенным животным (не человеком), причем агент представляет собой (i) фрагмент a-синуклеина, который индуцирует образование антител, специфически связывающихся по крайней мере с одним эпитопом a-синуклеина человека по остаткам 70-140; (ii) фрагмент a-синуклеина, который индуцирует образование антител, которые специфически связываются по крайней мере с одним эпитопом a-синуклеина человека по остаткам 1-20; (iii) антитело, которое специфически связывается с эпитопом a-синуклеина человека по остаткам 70-140; или (iv) антитело, которое специфически связывается с эпитопом a-синуклеина человека по остаткам 1-20, причем остатки пронумерованы в соответствии с SEQ ED NO:1.

43. Способ по любому из предшествующих пунктов, при котором заболевание представляет собой болезнь Паркинсона.

44. Фармацевтическая композиция, включающая первый иммуногенный фрагмент a-синуклеина, причем указанный первый фрагмент эффективен для индукции иммунного ответа с образованием антител, которые специфически связываются с эпитопом a-синуклеина человека по остаткам 1-20, а также фармацевтический носитель.

45. Фармацевтическая композиция по п.44, дополнительно включающая второй иммуногенный фрагмент a-синуклеина, причем указанный второй фрагмент эффективен для индукции иммунного ответа с образованием антител, которые специфически связываются с эпитопом a-синуклеина человека по остаткам 70-140, при этом второй иммуногенный фрагмент отличается от первого иммуногенного фрагмента.

46. Способ гуманизации моноклонального антитела 8А5 или моноклонального антитела 6Н7, включающий

определение аминокислотной последовательности CDR участков моноклонального антитела;

выбор акцепторного антитела;

получение гуманизированного антитела, включающего CDRs из моноклонального антитела и каркасные участки вариабельных доменов акцепторного антитела.

47. Способ получения химерного антитела из моноклонального антитела 8А5 или моноклонального антитела 6Н7, включающий

определение аминокислотной последовательности вариабельных участков легких и тяжелых цепей моноклонального антитела;

выбор константных участков тяжелых и легких цепей;

получение химерного антитела, включающего легкую цепь, содержащую вариабельный участок легкой цепи, слитый с константным участком легкой цепи, и тяжелую цепь, содержащую вариабельный участок тяжелой цепи, слитый с константным участком тяжелой цепи.