(57) 1. Вакцинная композиция против вируса Зика, содержащая антиген вируса Зика в количестве от 0,125 до 100 мкг, где указанный антиген вируса Зика выбран из инактивированного цельного вириона (вируса) и очищенного рекомбинантного антигена вируса Зика, фармацевтически приемлемый буфер и алюминия гидроксид в концентрации в диапазоне от 0,1 до 1,5 мг алюминия, где очищенный рекомбинантный антиген вируса Зика имеет структурные протеиновые последовательности, раскрытые в SEQ ID NO. 3 и SEQ ID NO. 4.
2. Вакцинная композиция по п.1, причем композиция является эффективной против любого генотипа/генотипных вариантов/штаммов/синтетических вирусов Зика, имеющих в любом случае от 50 до 100% идентичности на аминокислотном уровне в любом участке генома.
3. Вакцинная композиция по п.2, содержащая антигены вируса Зика любого генотипа/генотипного варианта/штаммов/синтетического вируса Зика, причем антитела против какого-либо из указанных выше типов вируса Зика перекрестно нейтрализуют гомологический вирус или любой гетерологичный штамм вируса Зика, который имеет по меньшей мере 50-100% аминокислотную идентичность в любом участке всего своего генома, в частности протеина оболочки E.
4. Вакцинная композиция по п.1, причем вирусный антиген Зика получают с использованием клеток Vero в качестве клеточного субстрата путем адаптации вируса к клеткам Vero.
5. Вакцинная композиция по п.1, причем указанный вирусный антиген Зика представляет собой очищенный и концентрированный антиген, полученный одним или несколькими способами, выбранными из
a) ультрацентрифугирования;
b) центрифугирования по градиенту плотности;
c) осветления собранных вирусных клеток с использованием мембранной фильтрации с последующей очисткой с использованием колоночной хроматографии;
d) тангенциальной текущей фильтрации с использованием мембран с отсечением от 100 до 300 кДа, причем тангенциальную фильтрацию осуществляют или перед, или после инактивации вируса.
6. Вакцинная композиция по п.5, причем указанная очистка с использованием колоночной хроматографии включает гель-фильтрацию, колоночную хроматографию со смешанным режимом смолы, ионообменную колоночную хроматографию, афинную матричную хроматографию и хроматографию с гидрофобными взаимодействиями.
7. Вакцинная композиция по п.6, причем колоночная хроматография элюирует большинство антигена вируса в потоке, таком как Capto Core 700, наиболее предпочтительно Capto Core 700, причем вирусный образец очищен на колонке Capto Core 700 и элюирован в потоке.
8. Вакцинная композиция по п.1, причем вирус Зика инактивирован по меньшей мере одним или несколькими из химических инактивирующих агентов, физическими инактивирующими агентами и облучающими агентами.
9. Вакцинная композиция по п.8, причем инактивацию вируса Зика осуществляют перед или после очистки вируса.
10. Вакцинная композиция по п.9, причем вирус Зика инактивирован химическим инактивирующим агентом, выбранным из формалина (формальдегида), b-пропиолактона (BPL) и пероксида водорода.
11. Вакцинная композиция по п.10, причем вирус Зика инактивирован каким-либо одним из следующих способов, выбранных из
e) обработки формалином при любой концентрации, которая находится в диапазоне от 1:500 вплоть до 1:4000 об./об. формалин:вирус, при от 8 до 37°C, предпочтительно 25±3°C, в течение по меньшей мере от 1 до 7 дней;
f) обработки формалином при любой концентрации, которая находится в диапазоне от 1:500 вплоть до 1:4000 об./об. формалин:вирус, при от 2 до 8°C в течение по меньшей мере от 10 до 30 дней;
g) b-пропиолактона (далее BPL) при любой концентрации, которая находится в диапазоне от 1:500 вплоть до 1:4000 об./об. BPL:вирус, в течение по меньшей мере от 24 до 48 ч при температуре, которая находится в диапазоне от 8 до 30°C, предпочтительно 25±3°C, в течение 48 ч;
h) b-пропиолактона при любой концентрации, которая находится в диапазоне от 1:500 вплоть до 1:4000 (BPL:вирус, об./об.), при от 2 до 8°C в течение по меньшей мере 3-7 дней;
i) комбинации с BPL и формалином при любом из указанных выше условий, предпочтительно BPL инактивация при 1:3000 (BPL:вирус, об./об.) в течение 24 ч с последующей инактивацией формалином при 1:3000 (формалин:вирус, об./об.) в течение от 24 до 48 ч при от 15 до 30°C, предпочтительно 25±3°C;
j) пероксида водорода при любой концентрации от 0,1 до 3%, предпочтительно от 0,1 до 1%, при любой температуре от 20 до 30°C в течение от 5 до 120 мин.
12. Вакцинная композиция по п.8, причем инактивация вируса Зика облучающим агентом включает инактивацию g-облучением путем экспозиции от 20 кГр вплоть до 35 кГр, предпочтительно от 25 до 30 кГр из ⁶⁰Co источника.
13. Вакцинная композиция по п.8, причем инактивация вируса Зика облучающим агентом включает инактивацию облучением УФ за счет экспозиции на 254 нм в течение 30-60 мин.
14. Вакцинная композиция по п.8, причем вирус инактивирован путем термической обработки при температуре от 50 до 65°C в течение от 30 мин вплоть до 2 ч.
15. Вакцинная композиция по п.1, причем буфер выбран из перечня, включающего фосфатный буфер, цитратный буфер, фосфатно-цитратный буфер, боратный буфер, буфер, содержащий три(гидроксиметил)аминометан (Tris), сукцинатный буфер, буферы, содержащие глицин или гистидин, в качестве одного из буферных агентов.
16. Вакцинная композиция по п.15, причем фосфатный буфер представляет собой натрий-фосфатный буфер в концентрации от 5 мМ вплоть до 200 мМ фосфатных ионов при любом pH от 6,50 до 9, необязательно, содержащий натрия хлорид в концентрации от 50 до 200 мМ.
17. Вакцинная композиция по п.1, причем буфер поддерживает pH в жидкой композиции выше 6,5, предпочтительно выше 7,0 по всему биопроцессу от вирусной культуры вплоть до получения очищенного инактивированного основного вируса.
18. Вакцинная композиция по п.8, причем инактивацию вируса Зика осуществляют в присутствии стабилизирующего агента, выбранного из лактозы, сахарозы, трегалозы, мальтозы, маннозы, изо-мальтозы, рафинозы, стахиозы, лактобиозы, сорбита, маннита, лактобионовой кислоты, декстрана, L-глицина, L-гистидина, L-глутаминовой кислоты, L-аспарагиновой кислоты и альбумина сыворотки человека или их комбинаций.
19. Вакцинная композиция по п.18, причем стабилизирующий агент выбран из
a) 2% сорбита и 1% L-глицина;
b) 1% сорбита и 0,5% L-глицина;
c) 1% маннита и 0,5% L-глицина;
d) 1% маннита и 0,5% L-глутаминовой кислоты;
e) 1% сорбита и 0,5% L-глицина, 1% альбумина сыворотки человека.
20. Вакцинная композиция по п.8, причем инактивация вируса Зика включает инактивацию любого генотипа/штамма, живого ослабленного вируса Зика, дезактивированного вируса, вирусоподобных частиц, химерных вирусных частиц, несущих любые антигены вируса Зика, в частности E протеин, в каком-либо гетерологичном вирусном скелете, в векторных вакцинах и инфекционных синтетических вирусных частицах, полученных in vitro или in vivo с использованием последовательности генома любого вируса Зика.
21. Вакцинная композиция по п.1, причем очищенный рекомбинантный вирус Зика содержит антигены вируса Зика, содержащие протеин оболочки (E), мембранный (M) протеин и необязательно неструктурный 1 (NS1) протеин в качестве вакцинных антигенов для индуцирования иммунного ответа для профилактики вирусных инфекций Зика.
22. Вакцинная композиция по п.21, причем вирус Зика имеет структурные протеиновые последовательности, как раскрыто в SEQ ID NO. 3 и SEQ ID NO. 4, что соответствует нуклеотидным последовательностям SEQ ID NO. 1 и SEQ ID NO. 2 соответственно, для применения в качестве вакцинных антигенов против вирусных инфекций Зика, вызванных генотипами или их вариантами.
23. Вакцинная композиция по п.1, причем рекомбинантные ДНК конструкты содержат (i) вектор, (ii) по меньшей мере один фрагмент нуклеиновой кислоты, который соответствует SEQ ID NO. 1 или SEQ ID NO. 2, кодирующей аминокислотную последовательность протеинов SEQ ID NO. 3, SEQ ID NO. 4 соответственно, который применим к какой-либо протеиновой последовательности вируса Зика, имеющей по меньшей мере 70% аминокислотную идентичность к указанным выше SEQ ID NO. 3 и SEQ ID NO. 4.
24. Вакцинная композиция по п.23, содержащая рекомбинантный ДНК конструкт, причем вектор представляет собой эукариотический плазмидный вектор, клонированный в эукариотическом хозяине, таком как бакуловирус для экспрессии в клетках насекомых, как в вирусоподобных частицах (VLP).
25. Вакцинная композиция по п.21, причем рекомбинантный протеин вируса Зика получен способом, включающим стадии
a) трансфекция рекомбинантной плазмидной ДНК в клетках насекомых;
b) сбор клеток и выделение рекомбинантного протеина из них;
c) очистка протеина способом, выбранным из ионообменной хроматографии, гель-фильтрации, афинной хроматографии, гидрофобной колоночной хроматографии, хроматографии со смешанным режимом смол, диафильтрации, ультрацентрифугирования, центрифугирования по градиенту плотности и фракционирования с солью.
26. Вакцинная композиция по п.1, причем структурные антигены вируса Зика экспрессируются в какой-либо прокариотической или эукариотической системе экспрессирования, включающей экспрессию, опосредованную бакуловирусом в клетках насекомых.
27. Вакцинная композиция по п.1, причем композиция получена способом, причем нейтрализующие антитела в значительной степени индуцируются против протеина оболочки, например, в оптимально инактивированном вирусе, живом ослабленном вирусе, дезактивированном вирусе, ДНК вакцине, вирусоподобных частицах, химерных вирусных частицах, демонстрирующих протеин Е вируса Зика в любом гетерологичном вирусном скелете, таком как в векторных вакцинах и синтетических вирусных частицах, полученных из любой геномной РНК последовательности вируса Зика.
28. Вакцинная композиция по п.1, причем композиция является приемлемой для какого-либо из способов введения, включая внутримышечный, интрадермальный, подкожный, внутривенный, пероральный, интраназальный или транскутанный способы введения, с применением игл или шприцев, включая предварительно заполненные шприцы, микроигольный пластырь, безыгольный пластырь, ингаляционные и назальные спреи.
29. Вакцинная композиция по п.1 при введении в одноразовой дозе или двумя или более дозами у млекопитающих вызывает как Th1, так и Th2 иммунный ответ против вируса Зика.
30. Вакцинная композиция по п.1, причем композиция вводится прайм-буст стратегией, причем первичной является кандидатная инактивированная вакцина, и буст является или той же вакциной, или какой-либо иной вакциной, такой как ДНК вакцина, вакцина химерного вируса Зика, вирусоподобная частица, дезактивированная вакцина Зика, живая ослабленная вирусная вакцина, рекомбинантная субъединичная вакцина, векторная вакцина или какая-либо вакцина, полученная из синтетического вируса Зика, причем нейтрализующие антитела в каждом из них индуцируются против протеина оболочки вируса Зика.

---